產品簡介
新產品jetCRISPR?——用于基因編輯的RNP轉染試劑
公司簡介
上海澤邁生物技術有限公司成立于2005年，是專門從事標準品銷售的生物試劑公司。近年來，公司通過和國內權威第三方檢測機構，政府機關，大學和中科院等單位的緊密合作，為用戶提供分析檢測技術領域的標準品和耗材等服務，將國際知名品牌的產品和先進技術介紹到國內，為廣大國內科研工作者探索未知世界提供強大支持。公司由一群長期致力于生物科技發展及市場行銷箐英所組成，為您提供最完整之生物科技產品的服務。
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產品說明
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CRISPR/Cas9核酸酶系統，是一個強大且高特異性的基因編輯工具。CRISPR/Cas9是一個雙組分系統，由gRNA引導Cas9核酸酶到基因組的特異性靶向序列，從而進行基因編輯，如突變、插入或刪除。
jetCRISPR?是一種全新的專門為CRISPR/Cas9設計的RNP轉染試劑，可帶來更高的CRISPR基因編輯效率，同時保持佳的細胞活性和狀態。快來試試優異的CRISPR/Cas9 RNP轉染試劑吧！
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◆ 特別用于Cas9蛋白和gRNA轉染
◆ 基因編輯效率高
◆ 細胞活性高，狀態好
◆ 快速可靠的基因編輯
◆ 操作簡便
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基因編輯效率高
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jetCRISPR?專為轉染RNP(gRNA和Cas9蛋白復合物)而開發，可在多種類型細胞中進行多靶點的Cas9基因編輯。(圖1和圖2)
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圖1: 使用jetCRISPR?，在HeLa細胞中進行基因編輯。
在96孔板中進行HeLa細胞RNP轉染，每孔0.3 μl的jetCRISPR?試劑和幾種濃度的Cas9蛋白和HPRT1 SgRNA或陰性對照。轉染48h后，T7消化產物經2%瓊脂糖凝膠電泳分析并用BET染色，用G:Box紫外成像儀(Syngene®)進行成像。圖像經Genesnap軟件(Syngene®)采集，INDEL%使用Genetools軟件(Syngene®)確定。
1: 完整的1083bp片段, 2: 827bp長片段, 3: 256bp短片段.
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圖2: jetCRISPR?基因編輯效率優于同類型產品
在96孔板培養的A549和HEK-293細胞中轉染RNP，每孔0.3 μl的jetCRISPR?或Lipofectamine® CRISPRMAX?，30 nM RNP(Cas9蛋白和HPRT1 sgRNA)。轉染48h后，采用T7核酸內切酶方法計算INDEL%，評估基因編輯效率，INDEL%使用Genetools軟件(Syngene®)確定。
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佳的細胞活性
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Polyplus的轉染試劑對細胞其柔和，細胞因此能在整個轉染過程中保持佳的活性和狀態。jetCRISPR?兼容血清和抗生素，因此RNP轉染可在利于細胞活性的優化培養條件下進行。
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圖3: jetCRISPR?轉染48h后，佳的細胞活性和狀態
在96孔板中用30nm RNP(Cas9蛋白和HPRT1 sgRNA)和0.3 μl的jetCRISPR?轉染HEK-293和A549細胞，轉染48h后，使用phase contrast ZOE Fluorescent Cell Imager (BIORAD®)觀察細胞狀態。
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快速可靠的基因編輯
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轉染Cas9蛋白比轉染質粒， 可以更快的進行基因編輯。使用jetCRISPR?轉染Cas9蛋白和gRNA可進行快速可靠的基因編輯(圖4)。此外，Cas9蛋白可以比質粒更快從細胞中被清除，從而減少了脫靶效應，可以更特異的進行基因編輯 (Kim S, et al; Genome Research 2014; 24:1012–1019)。
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圖4: 在HEK-293細胞中，使用jetCRISPR?進行快速可靠的基因編輯
在HEK-293細胞中進行RNP轉染，96孔板每孔30nM RNP(Cas9蛋白和HPRT1 sgRNA)和0.3 μl的jetCRISPR?或0.3 μl的Lipofectamine® CRISPRMAX?。轉染48h后，采用T7核酸內切酶方法計算INDEL%，評估基因編輯效率，INDEL%使用Genetools軟件(Syngene®)確定。
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操作簡便
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jetCRISPR?為即用型溶液。RNP轉染過程簡便：RNP復合體形成、加入轉染試劑、再加到孔中。jetCRISPR?適用于正向轉染和反向轉染，因此可以很方便的根據細胞調整實驗操作，以獲得效果。使用反向轉染操作比正向轉染提前一天獲得實驗結果(圖5)。
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圖5: jetCRISPR?正向轉染和反向轉染操作步驟
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產品信息
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產品名稱
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貨號
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試劑規格
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jetCRISPR?
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PT-502-01
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0.1 mL
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PT-502-07
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0.75 mL
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PT-502-15
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1.5 mL
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應用
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gRNA和Cas9成功進入目標細胞，是基因編輯必不可少的部分。然而，使用無DNA的方案，即Cas9以蛋白/gRNA復合物方式導入細胞，更有吸引力。因為它克服了DNA入核的主要屏障，同時避免不必要的DNA整合。此外，導入Cas9蛋白更容易調控Cas9的表達，從而減少了Cas9核酸酶的脫靶活性。這是為什么科學家們需要可靠的轉染試劑，來實現這個應用。
我們為CRISPR實驗提供了全套解決方案 (表1和圖6):
?jetCRISPR?轉染RNP –蛋白和gRNA共轉染
?jePRIME®用于CRISPR DNA質粒方案
?jetMESSENGER?用于RNA轉染(gRNA和mRNA共轉染)
?in vivo-jetPEI®用于DNA活體轉染(Zuckermann et al. (2015) Nat Commun6, 7391; He et al. (2016) PLoSPathog 12. E1005743)
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表1:專為CRISPR實驗設計的轉染試劑
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圖6：為CRISPR實驗設計的體外轉染試劑
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