人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒
規(guī) 格:48T/96T
品牌:美國R&D,clound-clone,RB,TSZ,immonoway,sciencell,德國IBL,齊一生物QYBIO!
產(chǎn)品的用途:僅供科研究使用!
特點:靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好、吸附性能強、價格優(yōu)惠
種屬: 人(human)、大鼠(Rat)、小鼠(mouse)、兔子(rabbit)、綿羊(sheep)、牛(Bovine)、豬(Porcine )、植物(Plant )、魚(Fish)、馬(Equine)、駱駝Camel 、猴子Monkey 、鴨Duck、雞Chicken 、山羊goat等等
反應(yīng)時間: 1-5h
所需樣本體積: 50-100ul
檢測波長: 450 nm
樣本:血清,血漿,細胞培養(yǎng)上清,組織勻漿,腦脊液,尿液、胸腹水、其它生物液體
服務(wù):齊一生物所有的elisa試劑盒均代測,您只需要將您準備好的樣本郵寄到我告訴即可!本地也可以上門收取樣本!全程Elisa實驗技術(shù)指導(dǎo),代做實驗。老客戶可享受優(yōu)惠折扣服務(wù)!
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咨詢: 田經(jīng)理
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人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒
用于免疫測定方法建立的抗原
在目前通常所用的免疫測定試劑盒中所用的抗原一般有三大類,即純化抗原、合成抗原和基因工程抗原。
純化抗原系指從人體液、組織或病原體培養(yǎng)物中采用物理化學(xué)方法如超速離心、過濾層析、電泳分離等所分離得到的目的抗原,如從HAg高滴度攜帶者外周血中分離純化的HAg,從胎血中分離純化的甲胎蛋白(a-fetoprotein),從HIV培養(yǎng)液中裂解純化的HIV抗原等。純化抗原的共同特點是,其完全保留了天然抗原所具備的抗體結(jié)合特性,所有的決定簇包括立體構(gòu)型決定簇都不會受到破壞。但純化抗原的純度對相應(yīng)的免疫測定方法的特異性有較大影響。
合成抗原一般均是多肽抗原,如HCV和HIV結(jié)構(gòu)和非結(jié)構(gòu)區(qū)的合成多肽抗原,這類抗原因其為多肽片段,缺乏完整抗原所具有的立體構(gòu)型決定簇,用于相應(yīng)的抗HCV和抗HIV抗體的檢測有可能導(dǎo)致結(jié)合這種立體構(gòu)型決定簇的抗體漏檢。
基因重組抗原是在已知目的抗原的核苷酸序列的基礎(chǔ)上,采用基因工程技術(shù)得到的表達抗原,如乙型肝炎核心抗原(HBcAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、梅毒螺旋體、弓形體、巨細胞病毒(CMV)、HCV和HIV的基因重組抗原等。
在目前的商品ELISA試劑盒中基本上都已使用這些重組抗原。由于基因重組抗原通常為病原體的部分抗原,如梅毒螺旋體的Tl5,Tl7和T47,HCV的核心區(qū)及3,4和5,HIV的gp41和gpl20等,因此,用此類重組抗原建立免疫方法來測定相應(yīng)抗體,難免在測定相應(yīng)病原體感染的敏感性上有缺陷。
近,美國Chiron公司為改善抗HCV測定的敏感性,將組成HCV的7個功能區(qū)即核心及E1,E2/l,2,3,4和5區(qū)中的除2以外的6個表達成一個融合蛋白“MEFA-6”,以這種融合蛋白建立的免疫測定方法的測定敏感性較使用3—4—核心(C25)區(qū)融合蛋白的免疫測定方法高2~4倍。
基因重組抗原不但對原抗原的生物學(xué)和免疫學(xué)特性能zui大程度地保留,而且可工業(yè)化大量生產(chǎn),同時沒有從生物體液中提純抗原所存在的傳染危險性。
生物素標記抗體的稀釋原則:
臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則:
臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒
操作步驟
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
注:
1. 用戶在初次使用試劑盒時,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
2. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。
5. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準確性。
人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒
anti-chorionic gonadotropin-antibody AhCGAb 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
aryl hydrocarbon receptor,AhR ELISA Kit AhR 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
Anti-keratin antibody,AKA ELISA Kit AKA 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
A kinase PRKA anchor protein-gravin 12 AKap12 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
aldosterone,ALD ELISA Kit ALD 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
Aldehyde Dehydrogenase ALDH 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
Aldehyde Dehydrogenase 18 Family, Member A1 ALDH18A1 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
Aldehyde Dehydrogenase 2 ALDH2 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
Anapastic lymphoma kinase ALK 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
Activin Receptor Like Kinase 1 ALK1 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
Arachidonate 5-lipoxygenase ALOX-5 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
Bone-specific Alkphase B ALP-B 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
Alternative macrophage activation-assodiated CC chemokine 1 AMAC-1 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
alpha-1-microglobulin bikunin precursor,AMBP ELISA Kit AMBP 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
Amebiasis ELISA kit Amebiasis 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
α-Amylase AMS/AMY 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
Amylin Amylin 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
Anti-nuclear Antibody ANA 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
atrial natriuretic factor ANF 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
angiotension Ⅰ Ang-Ⅰ 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
anti-neutrophil granules antibody ANGA 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
angiotension II ANG-II 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
ankyrin B,Ank-B ELISA Kit Ank-B 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
anti-cytomegalovirus lgMantibody Anti-AMW IgM 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
anti-hepatitis A virus IgM antibody,anti-HAV Elisa Kit Anti-HAV 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
anti-Q fever antibody,anti-Q-Ab ELISA Kit Anti-Q-Ab 96 Tests/kit 1box 齊一QYBIO
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