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價(jià)格：電議
所在地：北京
型號(hào)：HR8820-100T
手機(jī)：18518407031(微信同步）
電話：18518407031
更新時(shí)間：2023-05-31
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公司地址：北京市海淀區(qū)紫雀路33號(hào)院3號(hào)樓
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王欣(女士) （來電時(shí)請(qǐng)說是從給覽網(wǎng)看到我的)
產(chǎn)品特點(diǎn)：
● 使用方便：可用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)；
● 背景低，靈敏度高；
● 線性范圍寬，使用方便。
試劑盒以外自備儀器和試劑耗材：
● 熒光光度計(jì)或熒光酶標(biāo)儀,激發(fā)波長488nm,發(fā)射波長526±10nm,或者按照FITC熒光檢測(cè)條件檢測(cè)
● 離心機(jī) ● 移液器 ● PBS 緩沖液 ● 或者HBSS（無酚紅） ● 熒光專用黑色96孔板
使用注意事項(xiàng)：
● 螺旋蓋微量管裝試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底，避免開蓋時(shí)液體灑落。
● O12染色液為DMSO溶液，冬季氣溫較低時(shí)在室溫時(shí)為凝固狀態(tài)，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱溶解，吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱，否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。
● 使用前，先將本品取出回溫至室溫，并對(duì)其進(jìn)行簡(jiǎn)短離心使DMSO溶液集中于管底。
● 盡量縮短探針標(biāo)記后到測(cè)定所用的時(shí)間，以減少各種可能的誤差。
● 必須使用熒光檢測(cè)專用的黑色96孔板。
使用方法：
試劑準(zhǔn)備：
根據(jù)樣本數(shù)量，用純水將O12探針10倍稀釋。充分混勻，備用。
【注】：
● 不可以一次性將探針全部稀釋。
● 現(xiàn)配現(xiàn)用。
樣本處理：
1、剛?cè)〉玫男迈r組織樣本用PBS洗凈。
2、準(zhǔn)確稱取50mg貨100mg組織樣本，加入500μL-1mL勻漿緩沖液A，用玻璃勻漿器充分勻漿。
3、在1000×g，4℃離心10分鐘，棄沉淀，取上清。
樣本檢測(cè)：
1、在96孔板中加入190μL勻漿上清液、10μL O12探針，用移液器吹打，使之充分混勻。
【注】：
● 不同樣本的活性氧差異較大，需要根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果調(diào)整探針用量。一般加入2-10μL探針，染色總濃度按試劑盒探針母液的200-1000倍稀釋，200倍稀釋適合大多數(shù)樣本。
● 如果熒光強(qiáng)度太強(qiáng)，超過了檢測(cè)儀器的量程，可以減少探針用量。保證所有樣本探針用量一致即可。
● 以酶標(biāo)儀檢測(cè)為例，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)，根據(jù)所使用儀器決定勻漿液體積和染色容器。
2、在37℃避光孵育20-30分鐘。
3、置于酶標(biāo)儀中，后于激發(fā)波長為488nm、發(fā)射波長526nm檢測(cè)熒光強(qiáng)度。
【注】：
● 或使用熒光光度計(jì)等其他熒光檢測(cè)設(shè)備。
● 必須使用熒光檢測(cè)專用的黑色96孔板。
● 如果熒光強(qiáng)度太強(qiáng)，超過了檢測(cè)儀器的量程，可以將孵育后的勻漿上清液用純水稀釋后再檢測(cè)。一般稀釋5-50倍。保證所有樣本稀釋倍數(shù)一致即可。
蛋白定量：
1、另取50μL上清勻漿液，用PBS大約稀釋20-30倍。
2、取100μL進(jìn)行蛋白定量，測(cè)定蛋白濃度（mg/ml）。
結(jié)果處理：
以熒光強(qiáng)度（RFU）/蛋白濃度（毫克蛋白）表示組織活性氧強(qiáng)度。
【注】：
● 數(shù)據(jù)與蛋白濃度的單位無關(guān)。
● 此處以蛋白濃度數(shù)據(jù)作為校正系數(shù)，對(duì)不同樣品進(jìn)行均一化。
● 熒光強(qiáng)度強(qiáng)則活性氧含量高。
● 可以用實(shí)驗(yàn)中對(duì)照樣本的熒光強(qiáng)度值為基準(zhǔn)，待測(cè)組樣本的熒光強(qiáng)度值占對(duì)照樣本的百分比來比較活性氧程度差異。
免責(zé)聲明：以上所展示的[HR8820-100T 組織活性氧(ROS)檢測(cè)試劑盒(O12)]信息由會(huì)員[北京百奧萊博科技有限公司]自行提供，內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由發(fā)布會(huì)員負(fù)責(zé)。
