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價格:電議
所在地:北京
型號:HR0241-50T
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更新時間:2023-05-31
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公司地址:北京市海淀區紫雀路33號院3號樓
使用注意事項:
● 預實驗很重要。必須要做預實驗,在正式實驗之前取少量樣本優化實驗條件,并像正式樣本一樣認真進行,看實驗結果是否可行,實驗條件是否適合自己的樣本。由于生物樣本的多樣性,不同贗本的實驗條件通常差異較大,同種細胞的不同模型下需要的實驗條件也可能不同,為了避免浪費正式樣本和試劑,一定要提前預實驗優化實驗條件。
● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
● 實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
● 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
● 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
使用方法:
1、取5-10×106個細胞,在4℃,500×g條件下離心3分鐘,小心吸取培養基,盡可能吸干,收集細胞。
2、用冷PBS洗滌細胞兩次,每次洗滌后盡可能吸干上清。
【注】:
● 在4℃,500×g條件下離心5分鐘。
3、在細胞沉淀中加入400μL冷的提取液A,渦旋振蕩混勻或吹打混勻,置冰上振蕩20-30分鐘。
● 使用振蕩器/搖床的較低轉速,提取液能輕微晃動即可。
● 如果沒有振蕩條件,也可冰上靜置,稍微延長處理時間,中間每隔5分鐘渦旋振蕩或移液器吹打混勻。
● 細胞數量根據實驗情況調整,每次的提取液用量并不是一定的,大約為細胞體積的5-10倍即可,請根據實際情況調整。
● 可以根據自己實驗需要在每400μL提取液A中加入2μL蛋白酶抑制劑。
4、在4℃,1200×g條件下離心5分鐘。
5、將上清吸入另一預冷的干凈離心管,即得到胞漿組分,請置冰箱保存備用或直接用于下游實驗。
6、沉淀用PBS重懸,然后在4℃,2000×g 條件下離心5分鐘,棄上清。
7、沉淀為細胞核組分,將沉淀用200μL保存液B 重懸后保存備用或直接用于下游實驗。
免責聲明:以上所展示的[HR0241-50T 細胞漿/胞核分離試劑盒]信息由會員[北京百奧萊博科技有限公司]自行提供,內容的真實性、準確性和合法性由發布會員負責。