SY0044 脫氧鳥苷三磷酸溶液

北京百奧萊博科技有限公司

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價格：電議

所在地：北京

型號：SY0044

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更新時間：2023-05-25

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產品簡介

脫氧鳥苷三磷酸溶液是高品質的核酸擴增(PCR)產品，由北京百奧萊博供應，本產品用于生化實驗研究等領域，脫氧鳥苷三磷酸溶液是我司眾多優質核酸擴增(PCR)之一，質量堪比同類進口產品，價格非常優惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。

公司簡介

北京百奧萊博科技有限公司是一家專業的生物試劑銷售公司。公司主要經營血清、抗原、抗體等生物試劑產品，可以為您提供專業的技術服務，以優良的價格、優質的服務、優先的理念，滿足客戶的各方面的需求，與國內多家企業、單位建立了良好的長期合作關系，擁有較好的企業信譽和品牌形象。主營產品:血清、抗體、抗原、核酸提取、核酸純化等生化試劑

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產品說明

特別提示：包括脫氧鳥苷三磷酸溶液(100 mM)(dGTP)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：脫氧鳥苷三磷酸溶液(100 mM)(dGTP)
英文名稱：dGTP Solution(100 mM)
產品貨號：SY0044
產品規格：400μL

dGTP即2’-deoxyguanosine 5’-triphosphate，中文名為脫氧鳥苷三磷酸，常用于PCR、real-time PCR、RT-PCR、cDNA合成、引物延伸反應、DNA測序、DNA標記等各種常規分子生物學反應。

本產品為溶液鈉鹽形式，用超純水配制，并用高純度NaOH溶液調節pH值至7.0，濃度為100mM。

經檢測，dGTP純度大于99%（HPLC），且無DNase和RNase污染。本產品為即用型，可以直接用于PCR等各種常規分子生物學反應。

注意事項
1)可以室溫溶解，溶解后宜存放于冰盒內或冰浴上，使用完畢后宜立即置于-20℃保存。
2)為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

儲存條件：-20℃，避免反復凍融。

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名稱：DNA Shuffling試劑盒
貨號：BTN131178
規格：10次
DNA Shuffling即DNA分子的體外同源重組，它是一種分子水平上的定向進化(directed evolution)技術，它以一個或多個基因為起始材料，通過先隨機斷裂成小片段，再進行互為模板和引物的PCR(無外加引物)，zuì后再進行常規PCR(外加引物)等處理，zuì后得到含有大量DNA重組突變的PCR產物。其原理示意圖如下：
DNA Shuffling試劑盒原理示意圖

產品特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板，無需單獨準備各成分。
2.操作手冊經過優化，1-2天即可完成，節省大量優化時間。
3.本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

試劑盒組成：

成分	規格
PCR Mix 3.0，2×	1.5mL
DNase I溶液(1U/μL)	10μl
溶液A，10×	60μl
溶液B，10×	60μl
超純水	1mL
說明書	1份

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。

使用方法：
1.待突變基因片段的制備：待突變基因片段可以用含此基因的質粒為模板、用PCR法或酶切法制備。制備時需保證含此基因(或此基因的一部分)的DNA片段總長度不要超過1kb，同時比DNA shuffling終產物(第二輪PCR產物)長200-400bp。每次DNA Shuffling實驗至少需要2μg起始DNA片段(如果含幾個基因片段，則彼此的比例為1:1)，并且必須通過膠回收的方法回收，以便徹底去除殘留的質粒模板、引物和非特異擴增產物等。zuì后需用分光光度法準確定量。
2.提前準備37℃和75℃水浴，同時新鮮配制0.1U/μL的DNase工作液放冰上待用(必須在用時才配制，方法是將1μl 本試劑盒提供的1U/μL的DNase I溶液和1μl溶液A和8μl超純水混合)。此溶液需在24小時內使用。
3.在一個離心管中，按順序加入下列成分：

成分	用量
待突變基因片段(第1步制備)	2μg
溶液A	5μl
溶液B	5μL
DNase I工作液(第2步制備)	2μL
超純水	36μL

4.充分輕柔吹打混勻后37℃水浴8分鐘，然后立即放75℃水浴處理10分鐘以滅活DNase I。
5.在2-3%瓊脂糖凝膠上電泳，用常規的膠回收法回收25-150bp范圍的所有片段待用。注意：一定要加合適的DNA marker以便確定片段范圍，zuì好使用本公司生產的綠如藍核酸染料(可見光型)作為電泳染料以避免用UV照射DNA，否則UV使DNA發生的交聯將大降低后續擴增效果。
6.分光光度法測定回收片段的濃度。
7.在PCR管中按順序加入0.5μg上步回收得到的回收片段、50μl 2×PCR Mix、加超純水到100μl。
8.按下面的PCR反應參數進行輪無引物PCR：

過程	溫度	時間
PCR前變性	94℃	150s
PCR反應(40循環)	94℃	30s
	47.5℃	45s
	72℃	10s，每次循環后增加5s
PCR后延伸	72℃	10min

9.取5-10μl進行電泳檢測，然后進行PCR回收，得到輪PCR產物。
10.將回收的輪PCR產物1μl原液作為模板設置3管第二輪PCR反應。

成分	用量
回收的輪PCR產物	1μL
PCR Mix 3.0，2×	50μL
自備DNA Shuffling引物	各1μM
超純水	加水到100μL

11.按下列PCR參數進行第二輪PCR。

過程	溫度	時間
活化	94℃	150s
PCR反應(25次循環)	94℃	30s
	47.5℃	45s
	72℃	60s，每次循環后增加5s
PCR后延伸	72℃	10min

12.電泳檢測，回收預期大小的PCR產物，用于后續的構建克隆文庫實驗(略)。

疑難解答：
Q：易錯PCR和DNA Shuffling有何區別？
A：前者引入的是點突變，后者引入的是重組突變。示意圖如下：
者引入的是點突變，后者引入的是重組突變。示意圖如下

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貨號	名稱	規格
BTN61203	PCR級高GC的DNA清除劑	1.5mL
BTN90408	即用型熒光定量PCR試劑盒	1mL
BTN130911	miRNA cDNA鏈合成試劑盒	25次
BTN100814	Oligo dT12-18引物(0.5μg/μL)	5μg
YT379	PCR試劑盒(含Taq酶，Buffer，dNTP，上樣液)	400次\|2000次
YT388	dTTP溶液(100mM)	250μl