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價格：電議
所在地：上海
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更新時間：2019-01-08
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公司地址：上海市楊浦區(qū)鐵嶺路32號1519-10室
霍經(jīng)理(先生) 經(jīng)理
人腸病毒ELISA檢測試劑盒實驗方法實驗室專用
1）代測收費情況？幫忙處理標本收費嗎？
答：客戶購買我們的試劑盒的前提下，代測是。
2）收集樣本，一般都收集哪些？
答：客戶從種屬身上提取的，包括血液，血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿，唾液等標本，植物的，組織，葉，汁，根，糞便，牛奶等
答：標準孔是復(fù)孔：更好的檢驗樣本接近的值，避免假陽性。測復(fù)孔可以取兩個結(jié)果的平均值，結(jié)果更穩(wěn)定。
4）用什么儀器來檢測？
答：采用酶免儀器來檢測，所有酶標儀的標長都是450nm.
一、樣本
樣本處理原則：所有的樣本，用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），如果以后碰到其他的樣本，也按這個，納入?yún)R總表。
1、：用無菌管收集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清，保存中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2、：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清，保存中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3、：用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
4、胸腹水：用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清，保存中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5、腦脊液：用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清，保存中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
6、唾液：用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清，保存中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
7、細胞上清：檢測性的成份時，用無菌管收集。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清，保存中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
8、牛奶：用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清，保存中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
9、蜂蜜：用無菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清，保存中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
10、全血：用含有抗凝劑的無菌管收集，立即輕輕搖動，來回輕輕顛倒數(shù)次，使血液和抗凝劑混勻，以防血液凝固。
二、固體樣本
固體樣本處理原則：稱取1g的固體樣本，用9g的緩沖液溶解，蛋白可以直接離心取上清檢測，細胞內(nèi)的蛋白，要先收集細胞，再用破碎，離心取上清。
1、組織標本：切割標本后，稱取1g組織，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清。分裝一份待檢測，其余冷凍備用，保存中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。對于植物組織，不好勻漿的話，就在液氮中充分研磨；
2、細胞內(nèi)蛋白樣本
許多待測蛋白不是蛋白，而是存在于細胞內(nèi)的蛋白，這個時候，要先收集細胞，洗滌干凈，再破碎細胞，離心取上清。
（1）的細胞
A、動物細胞：用PH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液，使細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融（如果反復(fù)凍融，破碎效果不好，就采用超聲波破碎），以使細胞并放出細胞內(nèi)成份。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清，保存中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
B、植物細胞：用PH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液，使細胞濃度達到100萬/ml左右，置于冰盒上，用超聲破碎儀，設(shè)置破碎2s，冷卻30s的，充分破碎細胞，以使細胞并放出細胞內(nèi)成份。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清，保存中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）組織的細胞
切割標本后，稱取1g組織，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），去除上清，再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗滌沉淀的細胞三遍。再用上述的細胞破碎破碎細胞。
3、土壤：稱取1g土壤，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工將標本充分混勻。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清。分裝一份待檢測，其余冷凍備用，保存中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。如果是測蛋白，直接取上清檢測，細胞內(nèi)蛋白，要破碎細胞。
4、咽拭子：加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS，溶解咽拭子頭部，搖勻，用鑷子取出咽拭子并擠干，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清。分裝一份待檢測，其余冷凍備用，保存中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。如果是測蛋白，直接取上清檢測，細胞內(nèi)蛋白，要破碎細胞。
5.植物標本中相關(guān)酶或蛋白的測定：（粗提取）
1、新鮮植物組織請在液氮中充分研磨；
2、加入樣品體積9倍的提取液（pH?7.4?PBS緩沖液）,3、?請于4度，8000rpm，離心30分鐘，取上清并暫時保存于4度待用。
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