BTN60901 可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑
- 產品/服務：BTN60901 可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑
- 型 號：BTN60901
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-02
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：972
產品簡介
可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科研目的，本品質量穩定，價位合理，需要可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑等核酸擴增(PCR)產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。...
產品詳細介紹
特別提示：包括可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑
英文名稱：Taq DNA Polymerase Inhibitor
產品貨號：BTN60901
產品規格：0.3mL
Taq DNA聚合酶是進行PCR的zuì常用工具酶，但是由于它在常溫下還是具有部分活性，所以經常會出現非特異的擴增產物，尤其是當PCR反應體系中有大量非特異DNA存在的時候。目前zuì常見的解決方法是使用抗Taq DNA聚合酶的抗體和使用經過化學修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶(如AmpliTaq Gold)，但前者的缺點是加熱后抗體會不可逆失活，后者的缺點是需要預熱處理使酶激活。
產品特點：
1.可逆抑制Taq DNA聚合酶的活性，即常溫抑制Taq酶活性，在45℃以上抑制功能喪失，當溫度降低到45℃以下后，抑制活性又得以恢復。
2. 耐熱，產品本身為非蛋白質試劑，遠比Anti-Taq抗體穩定，便于保存和運輸。
3. 使用簡單，在加Taq酶前將本產品按PCR反應體積的1/10直接加入即可。
4.適用范圍廣，除Taq DNA聚合酶外，還可用于抑制其他DNA聚合酶的活性，如：Tth pol、Stoffel片段、Tfl pol、Tbr pol等。而一種酶的抗體一般對另一種酶的活性沒有抑制作用。
5.與后續的RT-PCR兼容。
儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
在加入Taq或Tth DNA聚合酶之前，按PCR反應終體積1/10的比例將本產品加入到反應體系中混勻，然后再加入DNA聚合酶，啟動PCR反應。
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名稱：taq酶抗體
貨號：BTN130815
規格：500U
Taq Antibody是Hot Start PCR用抗Taq抗體，其與Taq酶結合后抑制DNA聚合酶活性。使用本制品進行PCR擴增時，高溫變性前抗Taq抗體與Taq酶結合抑制DNA聚合酶活性，能夠在低溫條件下有效抑制引物的非特異性退火及引物二聚體引起的非特異性擴增。抗Taq抗體在PCR反應zuì初的DNA變性步驟中變性，DNA聚合酶活性恢復，達到Hot Start PCR效果。使用本制品無需特殊的抗Taq抗體失活處理，可以在常規PCR反應條件下使用。其工作原理如下：
儲存條件：低溫運輸，-20℃保存、有效期一年。
活性定義：Taq Antibody與Taq DNA Polymerase混合，25℃，10 min溫浴后，在55℃，10 min條件下抑制90％以上的1U的Taq DNA Polymerase活性的Taq Antibody量定義為1U。
純度：
1. 10 U的Taq Antibody和1μg的λDNA-Hind III在37℃或70℃下反應1小時，DNA的電泳譜帶不發生變化。
2. 10 U的Taq Antibody和1μg的Supercoiled pBR322 DNA在37℃或70℃下反應1小時，DNA的電泳譜帶不發生變化。
3. 10 U的Taq Antibody和1μg的λDNA在37℃或70℃下反應1小時，DNA的電泳譜帶不發生變化。
4. 10 U的Taq Antibody和1μg的16S，23S rRNA在37℃或70℃下反應1小時，RNA的電泳譜帶不發生變化。
5. 35Cycles的PCR反應條件下，無Mouse Genomic DNA的污染。
名稱：miRNA cDNA鏈合成試劑盒
貨號：BTN130911
規格：25次
本試劑盒采用在miRNA 3′末端加多聚A 尾的方法來使miRNA 具有Poly(A)尾，之后再使用Oligo(dT)-Tag引物進行逆轉錄反應，zuì終合成miRNA 對應的鏈cDNA。其反應流程如下：
產品特點：
1. 兩步式操作，行Poly(A)加尾，再進行逆轉錄反應。
2. 只需要1μg的total RNA。
3. 所得cDNA可用于檢測多種miRNA，不僅減少了誤差、節約了樣品，同時還實現了檢測的高通量。
4.與miRNA熒光定量PCR 檢測試劑盒兼容。
5.特異性好，獨特的miRNA引物及反應體系避免了Pre-miRNA的非特異擴增。
試劑盒組成：
| 成分 | 規格 |
| E.coli Poly(A)聚合酶(5U/μL) | 10μl |
| 10×Poly(A)聚合酶反應液 | 50μl |
| ATP溶液，1mM | 50μl |
| Oligo(dT)-Tag引物(0.5ug/μL) | 25μl |
| MMLV 逆轉錄(含RI) | 50μl |
| 4×RT Buffer(含dNTP) | 125μl |
| RNase-free 水 | 1ml |
儲存條件：低溫運輸，-20℃保存。
使用方法：
一、對miRNA 3′末端進行加Poly(A)處理
1.在冰上預冷RNase-Free的反應管內加入以下試劑至總體積20μL。注意需要zuì后加入E.coli Poly(A)聚合酶。
| 試劑組份 | 體積 |
| 自備的Total RNA(見注) | 1μg |
| 10× Poly(A)聚合酶反應液 | 2μl |
| ATP溶液，1mM | 2μl |
| RNase-Free水 | 補水至20μL |
| E.coli Poly(A)聚合酶(5U/μL) | 0.4μL(2U) |
注：在反應中使用的Total RNA必須含有miRNA。也可以直接使用miRNA(建議加入量為2–5μL，需根據目的miRNA的豐度決定)。
2. 移液器輕輕混勻上述配制的反應液，短暫離心后在37℃反應60 min。所得的反應液可以直接進行下游實驗(注意：只能把2μL 直接用于后續的RT反應，多于2μL 則需要先乙醇-乙酸鈉沉淀，再將加尾后的miRNA 溶于水，然后再取所需量用于RT。如果不經過沉淀，帶入的殘留的poly(A)聚合酶反應液將會干擾RT反應)，也可以放置-20℃短暫保存。如需長期保存建議存放于-80℃。
二、對帶Poly(A)尾巴的miRNA進行逆轉錄反應
3. 按照下表設置20μL體系的RT反應：
| 成分 | 體積 |
| Poly(A)反應產物(來于上步) | 2μl |
| RNase-Free水 | 10μl |
| Oligo(dT)-Tag引物 | 1μl |
| 4×RT Buffer(含dNTP) | 5μl |
| MMLV 逆轉錄酶(含RI) | 2μl |
4. 移液器輕輕混勻上述配制的反應液，短暫離心后在42℃反應60 min。
5. 70℃保溫10 min 終止反應。
6. 合成的cDNA反應液可放置于-20℃保存；也可以暫時冰上放置，立即用于后續的熒光PCR 定量檢測，不需要純化。
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