中文簡稱:人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒
英文簡稱:IL-2sRα/CD25)ELISA KIT
特異性:Hu IL-2sRa;
檢測范圍:62.5pg/ml~4000pg/ml;
靈敏度:30pg/ml;標(biāo)本用量:100ul/well;
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法的原理制備,適用于體外定量檢測人血清、血漿、組織、體液或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的天然和重組的IL-2sRa濃度。
白介素2(IL-2)是通過結(jié)合多分子細(xì)胞受體復(fù)合物發(fā)揮生物活力的。多年來,這個受體復(fù)合物被認(rèn)為是由IL-2Rα與IL-2β兩個糖蛋白鏈組成的,兩個亞基相互結(jié)合在一起形成一個高親和力受體來傳遞IL-2信號的。IL-2Rα(也稱為Tac抗原或CD25),是一個分子量為55kD跨膜糖蛋白,有351個氨基酸組成。IL-2β在1989年被克隆出來,它是個由575個氨基酸組成的跨膜糖蛋白,分子量為75kD,其中有286個氨基酸位于胞漿內(nèi),顯著地參與了細(xì)胞信號傳導(dǎo)作用。常認(rèn)為它是IL-2一種弱抑制劑。在任何情況下,體液中增高的可溶性IL-2Rα常伴隨這T細(xì)胞與B細(xì)胞的增加與免疫系統(tǒng)的激活。
ELISA實(shí)驗(yàn)原理
人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人白介素2可溶性受體α鏈(以下簡稱“A物質(zhì)”)水平。用純化的A物質(zhì)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入A物質(zhì)再與HRP標(biāo)記的A物質(zhì)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的A物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中A物質(zhì)含量。
ELISA試劑盒組成
人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒包括:
(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);
(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(6)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(7)酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。
結(jié)果判定方法
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。





