產(chǎn)品名稱：中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色液(NAP)
產(chǎn)品規(guī)格：3×10ml
產(chǎn)品用途：專門用于血液或骨髓細(xì)胞涂片的中性粒細(xì)胞的堿性磷酸酶染色,又稱同時偶聯(lián)法。
注意事項：堿性磷酸酶活性部位呈藍(lán)色,位于胞槳中。油鏡下計數(shù)101個中性粒細(xì)胞,求出百分比和積分。非特異性反應(yīng)少,結(jié)果可靠。
儲存條件：4℃,避光,6個月
簡介：堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase，簡稱ALP或AKP)為一類磷酸酯酶，廣泛分布于哺乳動物組織內(nèi)，其活性所需適pH 9.2~9.8。中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色液(NAP)不是采用金屬沉淀法來顯示堿性磷酸酶活性，而是采用偶氮偶聯(lián)法(又稱同時偶聯(lián)法)，其原理是在pH9.2～9.8的堿性條件下，細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶可使AB-BI磷酸鹽水解，釋放出磷酸與萘酚，后者與偶聯(lián)重氮鹽生成有色產(chǎn)物，定位于細(xì)胞質(zhì)中。該染液專門用于血液或骨髓細(xì)胞涂片的中性粒細(xì)胞的堿性磷酸酶染色,堿性磷酸酶活性部位呈藍(lán)色，位于胞槳，結(jié)果較金屬鹽沉淀法可靠。
操作步驟(僅供參考)：
(一)、涂片
1、制備新鮮血液或骨髓細(xì)胞涂片，NAP固定液固定，充分水洗。
2、滴加配制好的NAP孵育液孵育，水洗。
3、滴加核固紅染色液或甲基綠染色液復(fù)染。水洗、晾干、鏡檢。
(二) 貼壁培養(yǎng)細(xì)胞
1、取6孔板或其他容器培養(yǎng)的細(xì)胞，棄液，PBS清洗干凈。
2、加入NAP固定液固定30～60s或4%多聚甲醛固定，PBS清洗。
3、滴加配制好的NAP孵育液，放入濕盒中，避光孵育，PBS清洗。
4、入核固紅染色液或甲基綠染色液復(fù)染。PBS清洗、鏡檢。
臨床意義：
1、類白血病反應(yīng)積分明顯增高，未經(jīng)治療的慢性粒細(xì)胞白血病積分明顯減低。
2、急性細(xì)菌性感染積分明顯增高，病毒性感染積分多正常或減低。
3、再生障礙性貧血積分常增高，PNH、MDS積分常減低。
注意事項：
1、血液或骨髓細(xì)胞涂片應(yīng)新鮮，薄厚適宜，及時固定，否則會影響酶的活性。
2、培養(yǎng)細(xì)胞染色操作過程中，清洗、染色等步驟都應(yīng)輕微，以免損傷或丟失細(xì)胞。
3、NAP孵育液易失效或降低陽性強度，即配即用，不宜久置。
4、復(fù)染時，核固紅染色液或甲基綠染色液二者取其一。
5、每次染色時，應(yīng)有陽性對照片。
6、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
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