非酶DNA清除劑-2說明書
產品編號：BTN70801
規格：15T
產品及特點：
用Trizol等方法提取的總RNA樣品中經常會含有基因組DNA污染，這些污染會影響下游的RT-PCR和Northern雜交等實驗。目前zui常用的RNase-free DNase處理方法因DNase中所含殘留的RNase能破壞RNA完整性而具有很大缺陷。我司基因開發的非酶DNA清除劑-2不但徹底避免了RNase-free DNase的這一缺陷，同時還具有操作快速，穩定性好和高等諸多優點，完全可以替代價格昂貴的RNase-free DNase。
1. ，能使總RNA中的基因組DNA污染降上百倍(根據PCR檢測)而RNA分子完整性不會受到任何影響。
2. 本身不含RNase污染，因為本產品為非酶產品；而在制備RNase-free DNase時，為避免DNase失活，處理條件往往比較溫和，所以終產品中往往殘留有RNase污染。
3. 快速，只需要十多分鐘。
4. 穩定，本產品為非酶產品，可以常溫運輸和4℃長期保存；而RNase-free DNase的運輸和長期保存必須在低溫進行。
5. 高，單位成本遠低于RNase-free DNase。
6. 能用于小RNA 中DNA污染的去除。
規格及成分：
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成分 |
規格 |
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溶液A |
1.5ml |
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溶液B |
3ml |
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說明書 |
1份 |
保存條件：
常溫運輸、4℃保存,有效期一年。
自備試劑：
氯fang、75%乙醇
使用方法：
1. 將總RNA 溶液與溶液A 按1：1的比例混合（即100 μL RNA 溶液需加100μL DNA Erasol-2），充分震蕩半分鐘。注意：RNA溶液中鹽（如鈉離子）的濃度不能高于0.2 M，如果RNA 溶液的量不足100μL，zui好加無RNase水補足到100μL以便后續操作，如果體積大于100μL，試劑的用量也需要按比例增加。
2. 加入相當于RNA 溶液和DNA Erasol-2 混合液總體積1/2 的自備氯fang，充分震蕩半分鐘。
3. 12000-15000 g 室溫或4℃離心1-3 分鐘。
4. 轉移上清到一個RNase-free 的塑料離心管中，加2 倍體積的溶液B（用前搖勻），充分震蕩半分鐘。
5. 12000-15000 g 室溫或4℃離心10 分鐘后，小心棄上清。如果處理的樣品中含有小RNA，zui好使用30 分鐘的離心時間。
6. 加1 mL 自備75%乙醇，充分震蕩半分鐘。
7. 12000-15000 g 室溫或4℃離心5 分鐘后小心棄上清。
8. 短暫快速離心，小心吸棄余液。
9. 加入自備RNase-free 水溶解RNA 沉淀后立即使用或放-80℃長期保存。
疑難解答：
Q：能否用本產品對同一樣品進行反復處理？
A：可以。
Q：為何處理后的RNA 還有DNA 條帶？
A：有些時候（尤其是使用非變性電泳檢測時）RNA 會形成聚合物，電泳很慢，人們會誤以為是DNA，可以加少量無DNase 的RNase 處理樣品，確認就是DNA。
如果是，可能是樣品中鹽濃度過高使DNA 去除效率降低，可以預先用乙醇沉淀法去掉鹽離子。
Q：本產品跟DNA Erasol(BTN60201) 有何區別？
A：前者可以用于小RNA（長度小于200nt）的RNA 樣品而后者不能。
