核酸印跡膜染液說明書
產品編號:BTN70104
規格:100ml
產品及特點:
本產品可以對已經轉移到印跡膜上的DNA 和RNA 進行快速染色,在不需要UV 等儀器條件下確認轉膜效果。可以用于Southern、Nothern 和堿變性膠印跡膜。它具有下列特點:
1. 環保,來于一種常用的滅菌劑。
2. 快速方便,5-10 染色即可直接照相保存或掃描保存。
3. 可逆,可被預雜交液中的SDS 洗脫,不影響后續雜交反應。
4. 靈敏度為20 ng/條帶(包括DNA 和RNA),跟EB 相當。
5. 跟各種印跡膜兼容,可用于Gene-Screen、BioTrace RP、Zeta-Probe、Nytran、Hybond、Duralon 等尼龍膜,也可用于PVDF 膜和硝酸素膜時背景稍高)。
6. 可以反復使用。
規格及成分:
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成分 |
規格 |
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核酸印跡膜染液 |
100ml |
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說明書 |
1份 |
保存條件:
常溫運輸和保存,有效期一年。
自備試劑:
去離子水、1×SSPE 或1×SSC 溶液。
使用方法:
1. 按常用的印跡法、電轉法等方法將電泳膠中的DNA 或RNA 轉移到印跡膜上并根據印跡膜的性質進行UV 交聯或加熱烘烤,將核酸固定。
2. 如果是RNA 甲醛變性膠的印跡膜,zui好用去離子水洗滌印跡膜30秒鐘以除去甲醛(甲醛會干擾染色)
3. 將濕潤的印跡膜浸入到裝有足夠印跡膜染液(本產品)的容器中。如果印跡膜很干,則需要先用1×SSPE 或1×SSC 溶液濕潤。
4. 室溫下輕柔搖晃染色5-10分鐘。印跡膜上DNA或RNA量大時染色時間可能不需要5分鐘,染色時間過長背景會增加。
5. 將染液倒回到試劑瓶中以備下次使用。
6. 用自備的去離子水清洗印跡膜三次,每次5-10秒。DNA 或RNA 條帶將呈現藍色,背景將呈現淡藍色。注意:洗滌時間不要太長,否則固定在印跡膜上的核酸在低鹽條件下(在去離子水中)容易脫落。
7. 用濾紙吸去多余的水份,此時可以用鉛筆在印跡膜上作標記(Southern雜交膜可以標記DNA 分子量標準的位置,Northern 雜交膜可以標記18S 和28S RNA 的位置,它們分別對應于2 Kb 和5 Kb 的大小),也可以將印跡膜放在白色背景下照相(zui好使用黃色濾光片)或者掃描以保存實驗結果。
8. 如果預雜交液中有SDS,則印跡膜不需要脫色,可以直接用于預雜交。
如果預雜交液中不含SDS,需將染色后的印跡膜浸入到含1% SDS 的1×SSPE 或1×SSC 溶液中在室溫下搖晃直到顏色脫去,一般需要15分鐘。
使用效果:
圖注:3μg總RNA 和0.24-9.5Kb RNAladder(左)轉移到Nytran膜上面后用本產品染色的效果圖。






