一步式PAGE染液說明書
產品編號：BTN61204
規格：10T
產品及特點：
本產品原名叫一步式PAGE 染色，是目前zui簡單、zui靈敏的基于考馬斯亮藍的PAGE 膠蛋白質染色產品，完全可以取代zui常用的Coomassie Brilliant Blue G-250 PAGE 染色。它具有下列特點:
1. 一步式操作。將漂洗后的PAGE 膠放入染色液中后即可不管，無固定和脫色步驟，zui快10 分鐘即可見條帶（對ng 級別的樣品需要過夜）。
2. 高靈敏度。靈敏度跟銀染，SYPRO Ruby 和Deep Purple 等相當，達到納克水平。
3. 肉眼即可觀察結果，而SYPRO Ruby 和Deep Purple 等納克級染料需要貴重的檢測儀器。
4. 與質譜等后續分析方法兼容。
5. 健康環保。不使用乙酸和甲醇等有刺激性和毒性的試劑。
6. 可以用于任何PAGE 膠的蛋白檢測，包括SDS-PAGE 和2D膠。
7. 即開即用，足夠至少10次minigel 染色。
規格及成分：
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成分 |
規格 |
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綠如藍一步式蛋白PAGE染液 |
250ml |
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說明書 |
1份 |
保存條件：
常溫運輸和保存、有效期半年。
自備試劑：
Milli-Q水
使用方法：
一: 洗滌(此步十分重要，否則PAGE 膠中殘留的SDS 等物質會嚴重干擾后續染色)
如果蛋白質不用于后續的質譜分析，可以采用下面的快速漂洗法
1. 電泳結束后，小心將PAGE 膠轉移到裝有100 mL Milli-Q 水的容器中。
2. 微波30 秒鐘左右（到還沒沸騰為止）。
3. 在臺式脫色搖床上室溫搖晃3-5分鐘后倒掉Milli-Q 水。
4. 再重復第1-3 步兩次后直接進入第8 步操作。
如果蛋白質要用于后續的質譜分析，可以采用下面的溫和漂洗法
5. 電泳結束后，小心將膠轉移到裝有100 mL Milli-Q 水的容器中。
6. 在臺式脫色搖床上室溫搖晃10 分鐘后倒掉Milli-Q 水(不能縮短時間)。
7. 再重復上面的漂洗步驟兩次后進入第8 步操作。
二：染色
8. 加入足夠的本產品到裝有PAGE 膠的容器中，加入得量以覆蓋PAGE 膠為zui低要求，一塊minigel 一般需要10-20 mL 本產品。注意：本產品用前需要充分搖晃半分鐘，其正常顏色為深藍綠色，含顆粒狀物。
9. 在臺式脫色搖床上室溫搖晃染色直到PAGE 膠上出現滿意條帶為止。對ug 級的蛋白樣品(注:此處指每條帶的量，不是總蛋白量。下同)，一般10分鐘即可見到條帶，2 小時染色即可完成；但對ng 級的蛋白樣品，一般需要進行過夜染色。
10. 本方法染色背景很低，可以不需要脫色，直接用Milli-Q 水漂洗PAGE膠2 次，每次3 分鐘。洗滌可以使背景變得更干凈，也可以洗去PAGE膠表面的顆粒狀物。但如果需要背景更干凈，用戶也可以用自備的脫色液脫色10-60 分鐘。配制20 mL 脫色液的方法是：將2 mL 無水乙醇，0.5 mL 磷酸（濃度為85%左右）和17.5 mL Milli-Q 水混勻后即可。
11. 拍照保留染色結果，其余后續處理按相關操作進行。
12. 一般不建議重復使用用過的本產品。但如果短期內重復使用2-3次，靈敏度也比常規的考染高，只是染色到滿意條帶出現需要更長的時間。
