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貓眼綜合征染色體區(qū)候選基因1(CECR1)檢測試劑盒使用說明書

文件類型：圖片文件
文件大小：15.65K

更新日期：2017-03-27 11:09
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詳細(xì)介紹

貓眼綜合征染色體區(qū)候選基因1(CECR1)檢測試劑盒數(shù)據(jù)計算

1.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：各標(biāo)準(zhǔn)品 OD 值減去底色即減去空白孔 OD 值，以 6 個標(biāo)準(zhǔn)品的 OD 值為縱坐標(biāo) y，以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo) x，繪制曲線圖，并計算出回歸方程 y=ax+b。

2.將待測樣品的 OD 值代入方程式，計算各組樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際 IFN-γ濃度。

3.敏感度：1.0ng/L

實驗材料與試劑配制：

1.儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。

2.洗液的配制：按1:30的比例配制洗液備用。

樣品收集、處理及保存

1.細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

2.細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。

3.血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。

4.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

5.體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

6.組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測。

7.樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

8.保存：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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