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1）素爾生物專業(yè)細(xì)胞株細(xì)胞系，細(xì)胞透亮，光滑，飽滿，有光澤，傳代次數(shù)少，值得信賴，歡迎您致電咨詢 A3/KAW細(xì)胞株生長狀態(tài)|細(xì)胞形態(tài)|來源背景|蛋白表達(dá)|生長條件|傳代周期|貨期|價(jià)格|說明書等詳細(xì)信息，更多好禮相送，敬請期待！

大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞,RS1細(xì)胞  

大規(guī)模培養(yǎng)常用方法

根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞的類型，可采用貼壁培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)和固定化培養(yǎng)等三種培養(yǎng)方法進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)。

一、動(dòng)物細(xì)胞生長特性及培養(yǎng)溫度

1、細(xì)胞生長緩慢，易污染，培養(yǎng)需用抗生素

2、細(xì)胞大，無細(xì)胞壁，機(jī)械強(qiáng)度低，環(huán)境適應(yīng)性差

3、需氧少，不耐受強(qiáng)力通風(fēng)與攪拌

4、群體生長效應(yīng)，貼壁生長（錨地依賴性）

5、培養(yǎng)過程產(chǎn)品分布細(xì)胞內(nèi)外，成本高

6、原代培養(yǎng)細(xì)胞一般繁殖50代即退化死亡

依據(jù)在體外培養(yǎng)時(shí)對生長基質(zhì)依賴性差異，動(dòng)物細(xì)胞可分為兩類：

貼壁依賴型細(xì)胞：需要附著于帶適量電荷的固體或半固體表面才能生長，大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞，包括非淋巴組織細(xì)胞和許多異倍體細(xì)胞均屬于這一類。

非貼壁依賴型細(xì)胞：無需附著于固相表面即可生長，包括血液、淋巴組織細(xì)胞、許多腫瘤細(xì)胞及某些轉(zhuǎn)化細(xì)胞。

培養(yǎng)細(xì)胞的適溫度相當(dāng)于各種細(xì)胞或組織取材機(jī)體的正常溫度。人和哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適溫度為35~37℃。偏離這一溫度，細(xì)胞正常的代謝和生長將會受到影響，甚至死亡。總的來說，培養(yǎng)細(xì)胞對低溫的耐力比高溫高。溫度不超過39℃時(shí)，細(xì)胞代謝強(qiáng)度與溫度成正比；細(xì)胞培養(yǎng)置于39~40℃環(huán)境中1h，即受到一定損傷，但仍能恢復(fù)；當(dāng)溫度達(dá)43℃以上時(shí)，許多細(xì)胞將死亡。當(dāng)溫度下降到30~20℃時(shí)，細(xì)胞代謝降低，因而與培養(yǎng)基之間物質(zhì)交換減少。先看到的是細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變以及細(xì)胞從基質(zhì)上脫落下來。當(dāng)培養(yǎng)物恢復(fù)到初始的培養(yǎng)溫度時(shí)，它們原有的形態(tài)和代謝也隨之恢復(fù)到原有水平。

大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞,RS1細(xì)胞

SUER0597(XR)    T2細(xì)胞，人轉(zhuǎn)HLA-2基因B細(xì)胞

SUER0598(XR)    HPT-8細(xì)胞，人滋養(yǎng)層上皮細(xì)胞

SUER0599(XR)    WPMY-1細(xì)胞，人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞

SUER0600(XR)    RWPE-1細(xì)胞，人正常前列腺上皮細(xì)胞

SUER0601(XR)    MCF 10A細(xì)胞，人正常乳腺上皮細(xì)胞

SUER0602(XR)    ?PT67細(xì)胞，鼠逆轉(zhuǎn)錄酶病毒包裝細(xì)胞

SUER0603(XR)    LLC細(xì)胞，小鼠Lewis肺癌細(xì)胞

SUER0604(XR)    MEL細(xì)胞，小鼠紅白血病細(xì)胞

SUER0605(XR)    ?Neuro-2a細(xì)胞，小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞

SUER0606(XR)    B95-8細(xì)胞，EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞

SUER0607(XR)    U14-GFP細(xì)胞，GFP標(biāo)記的小鼠子宮頸癌細(xì)胞

SUER0608(XR)    FAT細(xì)胞，大鼠鼻咽癌細(xì)胞

SUER0609(XR)    GH3細(xì)胞，大鼠垂體瘤細(xì)胞

SUER0610(XR)    MMQ細(xì)胞，大鼠垂體瘤細(xì)胞

SUER0611(XR)    NR8383細(xì)胞，大鼠肺泡巨噬細(xì)胞

SUER0612(XR)    LLC-WRC 256細(xì)胞，大鼠腹水癌細(xì)胞

SUER0613(XR)    Walker256細(xì)胞，大鼠腹水癌細(xì)胞

SUER0614(XR)    CBRH-7919?細(xì)胞，大鼠肝癌細(xì)胞

SUER0615(XR)    CRL-1600細(xì)胞，大鼠肝癌細(xì)胞

SUER0616(XR)    R15細(xì)胞，大鼠肝癌細(xì)胞

SUER0617(XR)    RH-35細(xì)胞，大鼠肝癌細(xì)胞

SUER0618(XR)    H4-II-E-C3細(xì)胞，大鼠肝癌細(xì)胞

SUER0619(XR)    H-4-II-E細(xì)胞，大鼠肝癌細(xì)胞

SUER0620(XR)    UMR-106細(xì)胞，大鼠骨肉瘤細(xì)胞

SUER0621(XR)    IR983F細(xì)胞，大鼠骨髓瘤細(xì)胞

SUER0622(XR)    Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞，大鼠骨髓瘤細(xì)胞

SUER0623(XR)    C6細(xì)胞，大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

SUER0624(XR)    F98細(xì)胞，大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

SUER0625(XR)    MADB106細(xì)胞，大鼠乳腺癌細(xì)胞

SUER0626(XR)    SHZ-88細(xì)胞，大鼠乳腺癌細(xì)胞

SUER0627(XR)    PC-12細(xì)胞，大鼠腎上腺嗜鉻瘤細(xì)胞

SUER0628(XR)    PC-12(低分化)細(xì)胞，大鼠腎上腺嗜鉻瘤(低分化)細(xì)胞

SUER0629(XR)    PC-12(高分化)細(xì)胞，大鼠腎上腺嗜鉻瘤(高分化)細(xì)胞

SUER0630(XR)    RBL-2H3細(xì)胞，大鼠嗜堿性白血病

SUER0631(XR)    RBL-1細(xì)胞，大鼠嗜堿性粒性白血病

SUER0632(XR)    RIN-m5f細(xì)胞，大鼠胰島β瘤細(xì)胞

SUER0633(XR)    INS-1細(xì)胞，大鼠胰島瘤細(xì)胞

SUER0634(XR)    TMNE細(xì)胞，化學(xué)轉(zhuǎn)化小鼠鼻咽上皮細(xì)胞

SUER0635(XR)    DT40細(xì)胞，雞淋巴瘤細(xì)胞

SUER0636(XR)    DH82細(xì)胞，犬巨噬(狗腎惡性組織增生癥)細(xì)胞

SUER0637(XR)    P815*細(xì)胞，鼠肥大瘤細(xì)胞

SUER0638(XR)    MCA-RH7777細(xì)胞，鼠肝癌細(xì)胞

SUER0639(XR)    J558L細(xì)胞，鼠骨髓瘤細(xì)胞

SUER0640(XR)    CMT93細(xì)胞，鼠結(jié)腸癌細(xì)胞

SUER0641(XR)    WEHI 164細(xì)胞，鼠纖維肉瘤細(xì)胞

SUER0642(XR)    ?SH-2，3,4?細(xì)胞，鼠雜交瘤細(xì)胞

SUER0643(XR)    W6/32細(xì)胞，小鼠B雜交瘤細(xì)胞

SUER0644(XR)    LM9細(xì)胞，小鼠HGPRT基因缺陷型骨肉瘤細(xì)胞

SUER0645(XR)    LLC1[LL/2]細(xì)胞，小鼠Lewis肺癌細(xì)胞

SUER0646(XR)    LLC-RFP-puro細(xì)胞，小鼠Lewis肺癌細(xì)胞

SUER0647(XR)    E.G7-OVA細(xì)胞，小鼠T淋巴瘤細(xì)胞

SUER0648(XR)    PK136細(xì)胞，小鼠X小鼠細(xì)胞

SUER0649(XR)    EAC 細(xì)胞，小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞

SUER0650(XR)    L1210細(xì)胞，小鼠白血病細(xì)胞

SUER0651(XR)    M1細(xì)胞，小鼠白血病細(xì)胞

SUER0652(XR)    P388細(xì)胞，小鼠白血病細(xì)胞

SUER0653(XR)    L6565細(xì)胞，小鼠白血病克隆系細(xì)胞

SUER0654(XR)    AtT-20細(xì)胞，小鼠垂體瘤細(xì)胞

SUER0655(XR)    Raw-Blue細(xì)胞，小鼠單核白血病細(xì)胞

SUER0656(XR)    J774A.1細(xì)胞，小鼠單核巨噬細(xì)胞

SUER0657(XR)    RAW 264.7細(xì)胞，小鼠單核巨噬白血病細(xì)胞

SUER0658(XR)    P815細(xì)胞，小鼠肥大瘤細(xì)胞

SUER0659(XR)    LA795細(xì)胞，小鼠肺腺癌細(xì)胞

SUER0660(XR)    S-180細(xì)胞，小鼠腹水瘤/小鼠肉瘤細(xì)胞

SUER0661(XR)    H22細(xì)胞，小鼠肝癌細(xì)胞

SUER0662(XR)    Hepa 1-6細(xì)胞，小鼠肝癌細(xì)胞

SUER0663(XR)    MH134細(xì)胞，小鼠肝癌細(xì)胞

SUER0664(XR)    MLTC-1細(xì)胞，小鼠睪丸間質(zhì)瘤細(xì)胞

SUER0665(XR)    CRL-2836細(xì)胞，小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞

SUER0666(XR)    K7M2 wt細(xì)胞，小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞

SUER0667(XR)    FO細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞

SUER0668(XR)    P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞

SUER0669(XR)    P3X63Ag8細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞

SUER0670(XR)    P3X63Ag8.653細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞

SUER0671(XR)    SP2/0細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞

SUER0672(XR)    Sp2/0-Ag14細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞

SUER0673(XR)    B16細(xì)胞，小鼠黑色素瘤細(xì)胞

SUER0674(XR)    B16/??CRL-6323細(xì)胞，小鼠黑色素瘤細(xì)胞

SUER0675(XR)    B16-F0細(xì)胞，小鼠黑色素瘤細(xì)胞

SUER0676(XR)    B16-F1細(xì)胞，小鼠黑色素瘤細(xì)胞

SUER0677(XR)    Yac-1細(xì)胞，小鼠紅白血病細(xì)胞

SUER0678(XR)    F9細(xì)胞，小鼠畸胎瘤細(xì)胞

SUER0679(XR)    P19細(xì)胞，小鼠畸胎瘤細(xì)胞

SUER0680(XR)    F9細(xì)胞，小鼠畸胎瘤/小鼠胚胎癌細(xì)胞

大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞,RS1細(xì)胞   

二、貼壁培養(yǎng)（attachment culture）是指細(xì)胞貼附在一定的固相表面進(jìn)行的培養(yǎng)。

1、生長特性：貼壁依賴型細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)要貼附于培養(yǎng)（瓶）器皿壁上，細(xì)胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展，然后開始有絲分裂，并很快進(jìn)入對數(shù)生長期。一般數(shù)天后就鋪滿培養(yǎng)表面，并形成致密的細(xì)胞單層。

2、貼壁培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

容易更換培養(yǎng)液；細(xì)胞緊密黏附于固相表面，可直接傾去舊培養(yǎng)液，清洗后直接加入新培養(yǎng)液。

容易采用灌注培養(yǎng)，從而達(dá)到提高細(xì)胞密度的目的；因細(xì)胞固定表面，不需過濾系統(tǒng)。

當(dāng)細(xì)胞貼壁于生長基質(zhì)時(shí)，很多細(xì)胞將更有效的表達(dá)一種產(chǎn)品。

同一設(shè)備可采用不同的培養(yǎng)液/細(xì)胞的比例。

適用于所有類型細(xì)胞。

3、貼壁培養(yǎng)的缺點(diǎn)：與懸浮培養(yǎng)法相比

擴(kuò)大培養(yǎng)比較困難，投資大；

占地面積大；

不能有效監(jiān)測細(xì)胞的生長；

4、細(xì)胞貼壁的表面：要求具有凈陽電荷和高度表面活性。對微載體而言還要求具一定電荷密度；若為有機(jī)物表面，必須具有親水性，并帶陽電荷。

5、貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)：主要有轉(zhuǎn)瓶、中空纖維（后面專題介紹）、玻璃珠、微載體系統(tǒng)（后面介紹）等。

轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)系統(tǒng)：培養(yǎng)貼壁依賴型細(xì)胞初采用轉(zhuǎn)瓶系統(tǒng)培養(yǎng)。轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)一般用于小量培養(yǎng)到大規(guī)模培養(yǎng)的過渡階段，或作為生物反應(yīng)器接種細(xì)胞準(zhǔn)備的一條途徑。細(xì)胞接種在旋轉(zhuǎn)的圓筒形培養(yǎng)器-轉(zhuǎn)瓶中，培養(yǎng)過程中轉(zhuǎn)瓶不斷旋轉(zhuǎn)，使細(xì)胞交替接觸培養(yǎng)液和空氣，從而提供較好的傳質(zhì)和傳熱條件。

轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)具有結(jié)構(gòu)簡單，投資少，技術(shù)成熟，重復(fù)性好，放大只需簡單的增加轉(zhuǎn)瓶數(shù)量等優(yōu)點(diǎn)。 但也有其缺點(diǎn)：勞動(dòng)強(qiáng)度大，占地空間大，單位體積提供細(xì)胞生長的表面積小，細(xì)胞生長密度低，培養(yǎng)時(shí)監(jiān)測和控制環(huán)境條件受到限制等。 現(xiàn)在使用的轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)系統(tǒng)包括二氧化碳培養(yǎng)箱和轉(zhuǎn)瓶機(jī)兩類。

反應(yīng)器貼壁培養(yǎng) 此種培養(yǎng)方式中，細(xì)胞貼附于固定的表面生長，不因?yàn)閿嚢瓒S培養(yǎng)液一起流動(dòng)，因此比較容易更換培養(yǎng)液，不需要特殊的分離細(xì)胞和培養(yǎng)液的設(shè)備，可以采用灌流培養(yǎng)獲得高細(xì)胞密度，能有效地獲得一種產(chǎn)品；但擴(kuò)大規(guī)模較難，不能直接監(jiān)控細(xì)胞的生長情況，故多用于制備用量較小、價(jià)值高的生物藥品。

CelliGen、CelliGen PlusTM和Bioflo3000反應(yīng)器是常用的貼壁培養(yǎng)式生物反應(yīng)器，用于細(xì)胞貼壁培養(yǎng)時(shí)可用籃式攪拌系統(tǒng)和圓盤狀載體。此載體是直徑6毫米無紡聚酯纖維圓片，具很高表面積與體積比（1200cm2/g），利于獲得高細(xì)胞密度。籃式攪拌系統(tǒng)和載體培養(yǎng)是目前貼壁細(xì)胞培養(yǎng)使用多方式，用于雜交瘤細(xì)胞、Hela細(xì)胞、293細(xì)胞、CHO細(xì)胞及其它細(xì)胞培養(yǎng)。此種方式培養(yǎng)細(xì)胞，細(xì)胞接種后貼壁快。

大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞,RS1細(xì)胞