人支氣管上皮樣細(xì)胞，HBE細(xì)胞 素爾細(xì)胞庫提供遺傳變異細(xì)胞系、正常組織來源細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、工程細(xì)胞系、干細(xì)胞系，涉及人類，大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。...

素爾細(xì)胞庫提供遺傳變異細(xì)胞系、正常組織來源細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、工程細(xì)胞系、干細(xì)胞系，涉及人類，大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。

人支氣管上皮樣細(xì)胞，HBE細(xì)胞 

動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)

一節(jié) 大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用簡介

通過大規(guī)模體外培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)哺乳類動(dòng)物細(xì)胞是生產(chǎn)生物制品的有效方法。2060-70年代，就已創(chuàng)立了可用于大規(guī)模培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的微載體培養(yǎng)系統(tǒng)和中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。近十?dāng)?shù)年來，由于人類對(duì)生長激素、干擾素、單克隆抗體、疫苗及白細(xì)胞介素等生物制品的需求猛增，以傳統(tǒng)的生物化學(xué)技術(shù)從動(dòng)物組織獲取生物制品已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足這一需求。隨著細(xì)胞培養(yǎng)的原理與方法日臻完善，動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)趨于成熟。

所謂動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)（large-scale culture technology）是指在人工條件下（設(shè)定ph、溫度、溶氧等），在細(xì)胞生物反應(yīng)器（bioreactor）中高密度大量培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞用于生產(chǎn)生物制品的技術(shù)。目前可大規(guī)模培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞有雞胚、豬腎、猴腎、地鼠腎等多種原代細(xì)胞及人二倍體細(xì)胞、cho（中華倉鼠卵巢）細(xì)胞、BHK-21(倉鼠腎細(xì)胞)、Vero細(xì)胞(非洲綠猴腎傳代細(xì)胞，是貼壁依賴的成纖維細(xì)胞)等，并已成功生產(chǎn)了包括狂犬病疫苗、口蹄疫疫苗、甲型肝炎疫苗、乙型肝炎疫苗、紅細(xì)胞生成素、單克隆抗體等產(chǎn)品。

在過去幾十年來，該技術(shù)經(jīng)有了很大發(fā)展，從使用轉(zhuǎn)瓶(roller bottle) 、CellCube等貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，發(fā)展為生物反應(yīng)器（Bioreactor）進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。一代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)核心問題是難以產(chǎn)業(yè)化或者說是規(guī)?；a(chǎn)：一是在工藝生產(chǎn)時(shí)不能大規(guī)模制備產(chǎn)品；二是非批量生產(chǎn)容易導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量的不均一性；三是難以對(duì)同批生產(chǎn)進(jìn)行生產(chǎn)和質(zhì)量控制。

人支氣管上皮樣細(xì)胞，HBE細(xì)胞 

SUER0511(XR)     HES細(xì)胞，人胚皮膚成纖維樣細(xì)胞

SUER0512(XR)     AD293 細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0513(XR)     CRL-11268細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0514(XR)     HEK293-L細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0515(XR)     HEK293-T細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0516(XR)     GP2-293細(xì)胞，人胚腎上皮包裝細(xì)胞

SUER0517(XR)     GP2-293Luc細(xì)胞，人胚腎上皮包裝細(xì)胞

SUER0518(XR)     HEK-293細(xì)胞，人胚腎上皮細(xì)胞

SUER0519(XR)     細(xì)胞，人胚腎上皮細(xì)胞

SUER0520(XR)     KiMA細(xì)胞，人胚腎上皮細(xì)胞

SUER0521(XR)     HEK-293-6e細(xì)胞，人胚腎上皮(轉(zhuǎn)染用）細(xì)胞

SUER0522(XR)     293(HEK-293)細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0523(XR)     293A 細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0524(XR)     293F細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0525(XR)     293FT細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0526(XR)     293H細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0527(XR)     293-L.P.細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0528(XR)     293-mTLR5 細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0529(XR)     293T細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0530(XR)     293T/17細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0531(XR)     293XL-hTLR7細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0532(XR)     293XL-hTLR9細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0533(XR)     2V6.11細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0534(XR)     AAV-293細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0535(XR)     GP-293細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞

SUER0536(XR)     Phix-293T細(xì)胞，人胚腎(Ad5DNA化)細(xì)胞

SUER0537(XR)     293E細(xì)胞，人胚腎（EBNA1基因修飾）細(xì)胞

SUER0538(XR)     293ET細(xì)胞，人胚腎（SV40T和EBNA1基因修飾）細(xì)胞

SUER0539(XR)     H2EL細(xì)胞，人胚胎成纖維細(xì)胞

SUER0540(XR)     M-20細(xì)胞，人胚胎成纖維細(xì)胞

SUER0541(XR)     M-22細(xì)胞，人胚胎成纖維細(xì)胞

SUER0542(XR)     M-7細(xì)胞，人胚胎成纖維細(xì)胞

SUER0543(XR)     HEL細(xì)胞，人胚胎肺成纖維細(xì)胞

SUER0544(XR)     FC33細(xì)胞，人胚胎腎（Asp-2基因修飾）細(xì)胞

SUER0545(XR)     HEH細(xì)胞，人胚胎心臟組織來源細(xì)胞

SUER0546(XR)     HFSF細(xì)胞，人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞

SUER0547(XR)     CRL-7601細(xì)胞，人皮膚成纖維細(xì)胞

SUER0548(XR)     HSF細(xì)胞，人皮膚成纖維細(xì)胞

SUER0549(XR)     ECV-304細(xì)胞，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

SUER0550(XR)     HUVE-12細(xì)胞，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

SUER0551(XR)     CRL-2922細(xì)胞，人臍靜脈融合細(xì)胞

SUER0552(XR)     EA.hy926細(xì)胞，人臍靜脈融合細(xì)胞

SUER0553(XR)     HUVEC(HUV-EC-C)細(xì)胞，人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞

SUER0554(XR)     HUVEC細(xì)胞，人臍靜脈血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

SUER0555(XR)     P69細(xì)胞，人前列腺上皮細(xì)胞

SUER0556(XR)     RWPE-1細(xì)胞，人前列腺上皮細(xì)胞

SUER0557(XR)     RWPE-2細(xì)胞，人前列腺正常細(xì)胞

SUER0558(XR)     HFF-P8細(xì)胞，人前皮膚成纖維細(xì)胞

SUER0559(XR)     HFF-P9細(xì)胞，人前皮膚成纖維細(xì)胞

SUER0560(XR)     CRL-2713細(xì)胞，人乳腺細(xì)胞

SUER0561(XR)     MDA-kb2細(xì)胞，人乳腺細(xì)胞

SUER0562(XR)     CRL-2190細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞

SUER0563(XR)     HK2細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞

SUER0564(XR)     HMC細(xì)胞，人腎小球系膜細(xì)胞

SUER0565(XR)     HEF 細(xì)胞，人食道組織來源細(xì)胞

SUER0566(XR)     RPE細(xì)胞，人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

SUER0567(XR)     D407細(xì)胞，人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

SUER0568(XR)     RPE細(xì)胞，人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

SUER0569(XR)     ARPE-19細(xì)胞，人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞

SUER0570(XR)      HPT-8 細(xì)胞，人飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞

SUER0571(XR)     HFT-8810細(xì)胞，人胎兒胸腺株細(xì)胞

人支氣管上皮樣細(xì)胞，HBE細(xì)胞 

隨著生物技術(shù)的發(fā)展，迫切需要大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)，特別是培養(yǎng)表達(dá)特異性蛋白的哺乳動(dòng)物細(xì)胞，以便獲得大量有用的細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物。采用玻璃瓶靜置或旋轉(zhuǎn)瓶的培養(yǎng)方法，已不能滿足所需細(xì)胞數(shù)量及其分泌產(chǎn)物。因而必須為工業(yè)化生產(chǎn)一種新的技術(shù)方法。自70年代以來，細(xì)胞培養(yǎng)用生物反應(yīng)器有很大的發(fā)展，種類越來越多，規(guī)模越來越大，較常見的細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器有空氣提升反應(yīng)器，中空纖維管反應(yīng)器，無泡攪拌反應(yīng)器及籃式生物反應(yīng)器等。八十年代以來，人們逐漸開始以生物反應(yīng)器培養(yǎng)代替鼠腹水的方法獲得單克隆抗體。

動(dòng)物細(xì)胞是一種無細(xì)胞壁的真核細(xì)胞，生長緩慢，對(duì)培養(yǎng)環(huán)境十分敏感。采用傳統(tǒng)的生物化工技術(shù)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞大量培養(yǎng)，除了要滿足培養(yǎng)過程必需的營養(yǎng)要求外，有必要建立合理的控制模型，進(jìn)行pH和溶氧（DO）的控制。細(xì)胞生物反應(yīng)器可通過微機(jī)有序地定量地控制加入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)罐內(nèi)的空氣、氧氣、氮?dú)夂投趸妓姆N氣體的流量，使其保持的比例來控制細(xì)胞培養(yǎng)液中的pH值和溶氧水平，使系統(tǒng)始終處于狀態(tài)，以滿足動(dòng)物細(xì)胞的生長對(duì)pH值和溶解氧的需要。如為提高或達(dá)到一定的溶氧水平可改變通入培養(yǎng)罐內(nèi)氣體中氧氣和氮?dú)獾谋壤齺韺?shí)現(xiàn)控制DO值的目的。采用二氧化碳/碳酸氫鈉（CO2/NaHCO3）緩沖液系統(tǒng)來控制培養(yǎng)液的pH值是一種較好的方法。

現(xiàn)在，由于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在規(guī)模和可靠性方面都不斷發(fā)展，且從中得到的蛋白質(zhì)也被證明是安全有效的，因此人們對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的態(tài)度已經(jīng)發(fā)生了改變。許多人用和獸用的重要蛋白質(zhì)藥物和疫苗，尤其是那些相對(duì)較大、較復(fù)雜或糖基化（glycosylated）的蛋白質(zhì)來說，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是的生產(chǎn)方式。60年代初，英國AVRI研究所在貼壁細(xì)胞系BHK21中將口蹄疫病毒培養(yǎng)成功后，從初的200ml和800ml玻璃容器開始，很快就放大到30L和100L不銹鋼罐的培養(yǎng)規(guī)模。使用的是基于Eagle's配方的培養(yǎng)基，補(bǔ)充5%成年牛血清和蛋白胨。1967年以后，Wellcome（現(xiàn)為Cooper動(dòng)物保?。┘瘓F(tuán)分布于歐洲、非洲和南美洲8個(gè)的生產(chǎn)廠商，應(yīng)用此項(xiàng)技術(shù)工業(yè)規(guī)?；a(chǎn)口蹄疫疫苗和獸用狂犬疫苗，已掌握了5000L的細(xì)胞罐大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)。

目前已實(shí)現(xiàn)商業(yè)化的產(chǎn)品有：口蹄疫疫苗、狂犬病疫苗、牛白血病病毒疫苗、脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗、乙型肝炎疫苗、皰瘡病毒疫苗、巨細(xì)胞病毒疫苗、α及β干擾素、血纖維蛋白溶酶原激活劑、凝血因子Ⅷ和Ⅸ、促紅細(xì)胞素、松弛素、生長激素、蛋白C、免疫球蛋白、尿激酶、激肽釋放酶及200種單克隆抗體等。其中，口蹄疫疫苗是動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)方法生產(chǎn)的主要產(chǎn)品之一。1983年，英國Wellcome公司就已能夠利用動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)口蹄疫疫苗。美國Genentech公司應(yīng)用SV40為載體，將乙型肝炎病毒表面抗原基因插入哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行表達(dá)，已生產(chǎn)出乙型肝炎疫苗。英國Wellcome公司采用8000L Namalwa細(xì)胞生產(chǎn)α干擾素。英國Celltech公司用氣升式生物反應(yīng)器生α、β和γ干擾素；用無血清培養(yǎng)液在10000L氣升式生物反應(yīng)器中培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體。美國Endotronic公司用中空纖維生物反應(yīng)器大規(guī)模培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞生產(chǎn)出免疫球蛋白G、A、M和尿激酶、人生長激素等

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