TOV-112D細胞 神經細胞培養神經細胞（神經元）不易培養，只有在適宜情況下，如接種在膠原底層上，或加入神經生長因子和膠質細胞因子時，可出現一定程度的分化，長出突起等現象，但很難使之增值。而神經膠質細胞是神...

 神經細胞培養

神經細胞（神經元）不易培養，只有在適宜情況下，如接種在膠原底層上，或加入神經生長因子和膠質細胞因子時，可出現一定程度的分化，長出突起等現象，但很難使之增值。而神經膠質細胞是神經組織中比較容易培養的成分。

人、鼠等腦組織即可用于神經膠質細胞培養，不僅能獲得生長的膠質細胞，也可形成能傳代的二倍體細胞系。一般說來，膠質細胞在培養中生長不穩定，不易自發轉化，但對外界因素仍保持很好的敏感性，可用ROUS病毒和SV4等誘發轉化。

一、設備： 無菌操作設備。

二、大型設備CO₂ 培養箱：恒溫5%、10%CO₂維持培養液中pH值。

倒置顯微鏡：用于每天觀察貼壁細胞生長情況。

解剖顯微鏡，用于準確地取材。未分化癌細胞，BHT-101細胞

常溫冰箱：-4℃，用于保存各種培養液，解剖液和鼠尾膠。

低溫冰箱：-20℃--80℃，用于儲存血清酶，貴重物品和試劑。

電熱干烤箱：用于消毒玻璃器皿。

高壓消毒鍋：用于消毒培養皿，手術器械。

過濾器：配制解剖液、培養液，必須過濾后才可使用，以去除細菌。

滲透壓儀，pH劑，天平等。

三、培養器皿及手術器械

1、培養皿：常用35mm塑料及玻璃皿，解剖取材用15mm-90mm直徑。

2、培養板，24-40孔，可用于開放培養。

3、培養瓶：

4、吸管，常用1，5，10ml，均需泡酸、洗滌、滅菌后方可使用。

5、各類培養液貯存器。

6、小型手術器械。

準備：

一、配制培養液

（1）解剖液：以無機鹽（去除Ca²⁺ , Mg²⁺）加葡萄糖配制成PBS緩沖液，保持一定的滲透壓和pH值。

（2）基礎培養基（MEM）：主要為多種氨基酸，加入葡萄糖，雙蒸餾水溶解。

（3）接種培養液：用于胰酶消化后的細胞分散，做成細胞懸液，其成分為MEM含1%谷氨酰胺，另加入10%馬血清，當天配制。

（4）維持培養液：接種后24h，全部換成此液，后每2周換一次，每次換1/2。其成分為MEM中含5%馬血清，1%谷氨酰胺，及適量的支持性營養物質。

二、培養基質 常用鼠尾膠、小牛皮膠，多聚賴氨酸，再涂膠

三、消毒培養皿的備用。所有培養器皿均需清水沖洗2-3d，達兩次ddH₂O，每遍洗刷3-4次，加塞包裝，置于烤箱中干燥消毒，于培養前1天進行。

神經細胞分散培養

（一）選材 常用胚胎動物或新生鼠神經組織。雞胚常用胚齡6-8d，新生鼠或胎鼠（12-14d）或人胚胎。不過也有認為與組織相關。如大白鼠胚胎以19d為宜，小鼠以18d為宜，大鼠紋狀體以10d為宜；若紋狀體與黑質聯合培養的大鼠胚，則黑質以13d，紋狀體18-21d為宜；小腦以20-21d小鼠胚胎，所獲蒲氏細胞成活率高，顆粒細胞正在分化；脊髓與DRG聯合培養，常用4-7d雞胚或12-14d小鼠胚胎，取材易，神經成活率高。

（二）取材。腦則取出相應組織，在解剖液中先剪碎，以使胰酶消化。脊髓則固定于瓊脂板上，用小刀將其要成背腹兩側，分別培養。

（三）細胞分離與接種。神經組織用0.125-0.25%胰蛋白酶在37℃孵育30min，移入接種液，停止消化，并洗去胰蛋白酶液，用細口吸管吹打細胞懸液，使其充分分散，如此多次，待沉淀后吸出上層細胞懸液，計數，預置細胞密度，接種于培養皿（1×10⁶），做電生理應為5×10⁵或更低。TOV-112D細胞

素爾細胞庫提供遺傳變異細胞系、正常組織來源細胞系、腫瘤細胞系、工程細胞系、干細胞系，涉及人類，大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。

TOV-112D細胞

SUER1073(XR)  DU 145細胞

SUER1074(XR)  DU4475細胞導管癌細胞

SUER1075(XR)  DV-90細胞腺癌；惡性腺瘤細胞

SUER1076(XR)  EB1細胞伯基特淋巴瘤細胞

SUER1077(XR)  EB2細胞伯基特淋巴瘤細胞

SUER1078(XR)  EBC-1細胞鱗狀細胞癌扁平上皮癌細胞

SUER1079(XR)  ECC10細胞小細胞腺癌細胞

SUER1080(XR)  ECC12細胞小細胞腺癌細胞

SUER1081(XR)  EC-GI-10細胞

SUER1082(XR)  EFE-184細胞

SUER1083(XR)  EFM-19細胞導管癌細胞

SUER1084(XR)  EFM-192A細胞

SUER1085(XR)  EFO-21細胞漿液性癌細胞

SUER1086(XR)  EFO-27細胞粘液癌膠樣癌細胞

SUER1087(XR)  EHEB細胞慢性淋巴細胞白血病-小淋巴細胞性淋巴瘤細胞

SUER1088(XR)  EJM細胞漿細胞骨髓瘤細胞

SUER1089(XR)  EM-2細胞慢性髓樣白血病爆炸階段細胞

SUER1090(XR)  EN細胞

SUER1091(XR)  EOL-1細胞急性髓性白血病細胞

SUER1092(XR)  EPLC-272H細胞鱗狀細胞癌扁平上皮癌細胞

SUER1093(XR)  ES-2細胞透明細胞癌清晰細胞癌亮細胞癌細胞

SUER1094(XR)  ESS-1細胞中層混合腫瘤細胞

SUER1095(XR)  EVSA-T細胞

SUER1096(XR)  EW8細胞

SUER1097(XR)  EWS502細胞

SUER1098(XR)  F-36P細胞急性髓性白血病細胞

SUER1099(XR)  F5細胞

SUER1100(XR)  FaDu細胞 鱗狀細胞癌扁平上皮癌細胞

SUER1101(XR)  FTC-133細胞濾泡性癌細胞

SUER1102(XR)  FTC-238細胞濾泡性癌細胞

SUER1103(XR)  FU97細胞彌漫性腺癌細胞

SUER1104(XR)  FU-OV-1細胞漿液性癌細胞

SUER1105(XR)  G-292, clone A141B1細胞

SUER1106(XR)  G-361細胞

SUER1107(XR)  G-401細胞

SUER1108(XR)  G-402細胞

SUER1109(XR)  GA-10細胞伯基特淋巴瘤細胞

SUER1110(XR)  GAMG細胞

SUER1111(XR)  GB-1細胞星形細胞瘤分級IV細胞

SUER1112(XR)  GCIY細胞腺癌；惡性腺瘤細胞

SUER1113(XR)  GCT細胞

SUER1114(XR)  GDM-1細胞急性髓性白血病細胞

SUER1115(XR)  GI-1細胞神經膠質肉瘤細胞

SUER1116(XR)  GMS-10細胞星形細胞瘤分級IV細胞

SUER1117(XR)  GOS-3細胞神經膠質肉瘤細胞

SUER1118(XR)  GP2d細胞腺癌細胞

SUER1119(XR)  GRANTA-519細胞套細胞淋巴瘤細胞

SUER1120(XR)  GR-M細胞

SUER1121(XR)  GSS細胞腺癌；惡性腺瘤細胞

SUER1122(XR)  GSU細胞腺癌；惡性腺瘤細胞

SUER1123(XR)  H4細胞

SUER1124(XR)  HARA細胞鱗狀細胞癌扁平上皮癌細胞

SUER1125(XR)  HCC1143細胞導管癌細胞

SUER1126(XR)  HCC-1171細胞非小細胞肺癌細胞

SUER1127(XR)  HCC1187細胞導管癌細胞

SUER1128(XR)  HCC-1195細胞混合腺鱗狀癌細胞

SUER1129(XR)  HCC-1359細胞大細胞癌細胞

SUER1130(XR)  HCC1395細胞導管癌細胞

SUER1131(XR)  HCC1419細胞導管癌細胞

SUER1132(XR)  HCC1428細胞

SUER1133(XR)  HCC-1438細胞大細胞癌細胞

SUER1134(XR)  HCC-15細胞鱗狀細胞癌扁平上皮癌細胞

SUER1135(XR)  HCC1500細胞導管癌細胞

SUER1136(XR)  HCC1569細胞化生性癌細胞

SUER1137(XR)  HCC-1588細胞鱗狀細胞癌扁平上皮癌細胞

SUER1138(XR)  HCC1599細胞導管癌細胞

SUER1139(XR)  HCC1806細胞導管癌細胞

SUER1140(XR)  HCC-1833細胞腺癌；惡性腺瘤細胞

SUER1141(XR)  HCC-1897細胞鱗狀細胞癌扁平上皮癌細胞

SUER1142(XR)  HCC1937細胞導管癌細胞

SUER1143(XR)  HCC1954細胞導管癌細胞

SUER1144(XR)  HCC202細胞導管癌細胞

SUER1145(XR)  HCC-2108細胞腺癌；惡性腺瘤

SUER1146(XR)  HCC2157細胞導管癌細胞

SUER1147(XR)  HCC2218細胞導管癌細胞

SUER1148(XR)  HCC-2279細胞腺癌；惡性腺瘤細胞

SUER1149(XR)  HCC-2814細胞鱗狀細胞癌扁平上皮癌細胞

SUER1150(XR)  HCC2935細胞非小細胞肺癌細胞

SUER1151(XR)  HCC-33細胞小細胞癌細胞

SUER1152(XR)  HCC364細胞腺癌；惡性腺瘤

SUER1153(XR)  HCC-366細胞

SUER1154(XR)  HCC38細胞

SUER1155(XR)  HCC4006細胞

SUER1156(XR)  HCC-44細胞

SUER1157(XR)  HCC-56細胞

SUER1158(XR)  HCC70細胞

SUER1159(XR)  HCC-78細胞

SUER1160(XR)  HCC827細胞

SUER1161(XR)  HCC-827-GR5細胞

SUER1162(XR)  HCC-95細胞

SUER1163(XR)  HCT 116細胞

SUER1164(XR)  HCT-15細胞

SUER1165(XR)  HCT-8細胞

SUER1166(XR)  HDLM-2細胞

SUER1167(XR)  HD-MY-Z細胞

SUER1168(XR)  HDQ-P1細胞

SUER1169(XR)  HEC-108細胞

SUER1170(XR)  HEC-151細胞

SUER1171(XR)  HEC-1-A細胞

SUER1172(XR)  HEC-1-B細胞

SUER1173(XR)  HEC-251細胞

SUER1174(XR)  HEC-265細胞

SUER1175(XR)  HEC-50B細胞

SUER1176(XR)  HEC-59細胞

SUER1177(XR)  HEC-6細胞

SUER1178(XR)  HEK TE細胞

SUER1179(XR)  HEL細胞

SUER1180(XR)  HEL 92.1.7細胞

SUER1181(XR)  Hep 3B2.1-7細胞

SUER1182(XR)  Hep G2細胞

SUER1183(XR)  Hey-A8細胞

SUER1184(XR)  HGC-27細胞

SUER1185(XR)  HH細胞

SUER1186(XR)  HK-2細胞

SUER1187(XR)  HL-60細胞

SUER1188(XR)  HLC-1細胞

SUER1189(XR)  HLE細胞

SUER1190(XR)  HLF細胞

SUER1191(XR)  HLF-a細胞

SUER1192(XR)  HMC-1-8細胞

SUER1193(XR)  HMCB細胞

SUER1194(XR)  HMEL細胞

SUER1195(XR)  HOS細胞

SUER1196(XR)  HPAC細胞

SUER1197(XR)  HPAF-II細胞

SUER1198(XR)  HPB-ALL細胞

SUER1199(XR)  Hs 172.T細胞

SUER1200(XR)  Hs 229.T細胞

SUER1201(XR)  Hs 255.T細胞

SUER1202(XR)  Hs 274.T細胞

SUER1203(XR)  Hs 281.T細胞

SUER1204(XR)  Hs 294T細胞

SUER1205(XR)  Hs 343.T細胞

SUER1206(XR)  Hs 571.T細胞

TOV-112D細胞

（四）抑制膠質細胞生長。培養3-5d后，也有人認為培養7d后，用阿糖胞苷，或5-FU抑制神經膠質細胞的生長。

（五）觀察。接種6-12h，開始貼壁，并有集合現象，細胞生長突起明顯，5-7d膠質細胞增生明顯，7-10d膠質細胞成片于神經細胞下面，形成地毯，2周時神經細胞生長豐滿，四周暈光明顯，一個月后，有些神經細胞開始退化，變形，甚至出現空泡，一般培養2-4周宜。

但神經細胞只能增大，而不能增殖，只能原代，不能傳代，不會有細胞周期，而且隨培養時間的延長，細胞數量在下降，但膠質細胞可以，神經膠質細胞也可以。在培養過程中，早期9-12d時，有較多的神經細胞死亡，這是一次死亡階段，應注意保持條件的恒定。在此之后存活下去的細胞一般突起長而多，且相互形成突觸。

（六）常用培養細胞實驗有：FCM的蛋白總量分析；膜片鉗與離子通道的分析；免疫組化分析；

但免疫組化分析應注意，由于抗體直接作用于活細胞，不易穿透活細胞，故對核內抗原定位時，先考慮膜對抗體的通透性問題。常用化學試劑以增加其通透性或采用冰凍方法解決。

在免疫組化中，或其它組織學染色中，常用不同的染色方法以區分不同細胞，如半乳糖腦苷脂對小樹突膠質細胞標記明顯；GFAP對星形膠質細胞具有特異性染色等。這對研究神經系統中膠質細胞功能具有大的應用價值。神經膠質細胞以往多被忽視，其在腦血管疾?。ㄈ缛毖該p傷）、退行性疾?。ㄈ鏏D、PD）、損傷后膠質細胞的填充等具有不可忽視的作用。它也是神經細胞功能和營養支持的物質基礎。

我們全心全意為您服務，提供優質產品，保障售后服務，真心把客戶奉為上帝，及時處理客戶訂單，全程跟蹤貨源，采用誠信快遞運輸，認真解答客戶疑問，對客戶售后問題，不拖沓，不推卸責任，認真負責的態度。

TOV-112D細胞