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產(chǎn)品詳情

NCI-H460細(xì)胞形態(tài),細(xì)胞培養(yǎng)

  • 產(chǎn)品/服務(wù):NCI-H460細(xì)胞形態(tài),細(xì)胞培養(yǎng)
  • 型 號(hào):NCI-H4601
  • 品 牌:ATCC
  • 單 價(jià):面議 
  • 更新日期:2020-04-21
  • 有效期至:長(zhǎng)期有效
  • 瀏覽次數(shù):3447
產(chǎn)品簡(jiǎn)介

NCI-H460細(xì)胞形態(tài),細(xì)胞培養(yǎng),素爾生物細(xì)胞庫(kù)攜手知名單位,為您提供上萬種類凍存細(xì)胞|復(fù)蘇細(xì)胞|ATCC 細(xì)胞|細(xì)胞系|細(xì)胞株|腫瘤細(xì)胞|細(xì)胞|貼壁細(xì)胞|懸浮細(xì)胞|,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)...

產(chǎn)品詳細(xì)介紹
NCI-H460細(xì)胞形態(tài),細(xì)胞培養(yǎng),素爾生物細(xì)胞庫(kù)攜手知名單位,為您提供上萬種類凍存細(xì)胞|復(fù)蘇細(xì)胞|ATCC 細(xì)胞|細(xì)胞系|細(xì)胞株|腫瘤細(xì)胞|細(xì)胞|貼壁細(xì)胞|懸浮細(xì)胞|,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和優(yōu)培養(yǎng)條件。

公司明星產(chǎn)品主要有:DC2.4細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞、COV434細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞、A2780細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞、HEK-293-6e細(xì)胞、FRO細(xì)胞、HEPG2.2.15細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞、L-02細(xì)胞、M-ICC12細(xì)胞、143B細(xì)胞、HOS細(xì)胞、M4e細(xì)胞、M2e細(xì)胞、TU686細(xì)胞、TU212細(xì)胞、vero細(xì)胞、SW48細(xì)胞、SW480細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞、HK-1細(xì)胞、Hep2細(xì)胞、C666-1細(xì)胞、HNE1細(xì)胞、HNE1/DDP細(xì)胞、capan-1細(xì)胞、vero e6細(xì)胞、A375細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞、HSC-LX-2細(xì)胞、LOVO細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞、RL952細(xì)胞、Hela細(xì)胞、A549細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞、H1993細(xì)胞、H1993細(xì)胞、Hep-2細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞、LS174T細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、capan-1細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、SW116細(xì)胞等。

NCI-H460細(xì)胞形態(tài),細(xì)胞培養(yǎng) 之角膜緣干細(xì)胞(原代培養(yǎng)):

吸棄培養(yǎng)液

少量pbs將細(xì)胞洗一遍

棄之

0.1%姨酶:0.02%EDTA(1:1)混合液1ml將細(xì)胞表面過一遍,棄之

0.1%姨酶:0.02%EDTA(1:1)混合液1ml加入培養(yǎng)瓶,置培養(yǎng)箱3~5分鐘,看胞體變圓,用彎頭吸管吹打瓶壁黏附的細(xì)胞

DMEM+20%FBS混合液1ml終止消化

800轉(zhuǎn)/ 離心 5分鐘

棄上清

離心管中加入1mlPBS,將細(xì)胞吹打起來

800轉(zhuǎn)/ 離心 5分鐘

棄上清

加入DMEM+20%FBS混合液1ml將細(xì)胞吹打起來

細(xì)胞懸液裝入培養(yǎng)瓶

置培養(yǎng)箱20分鐘

倒置顯微鏡下可見部分干擾的成纖維細(xì)胞貼壁

吸出細(xì)胞懸液12分裝新的培養(yǎng)瓶

注:加帶血清的培養(yǎng)基終止消化后再吹打容易起泡沫,影響操作,因此選擇邊消化邊吹打。消化完畢后,本人用胎盤蘭染色證實(shí)90%細(xì)胞存活,說明此操作合適。

有的客戶收到SERANA南美源胎牛血清問為什么血清那么紅,南美血清本身是很紅很紅,血一樣紅,我見過很多公司的南美血清是很紅,南美除了阿根廷之外,都是很紅的,并且血紅素也并不影響血清的質(zhì)量。但是市面上有很多種仿貨并不紅,這就有問題了。如果一個(gè)客戶現(xiàn)在還說,南美血清為何這么紅的話,那老師有可能沒買過的南美血清國(guó)產(chǎn)血清是蠟黃色。北美血清的顏色就沒有這么紅,顏色很淡,淡黃至微紅。澳洲血清的血清介于南美和北美之間。更多血清小知識(shí)可以聯(lián)系我們公司張老師:

ATCC細(xì)胞|細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)|癌細(xì)胞|傳代細(xì)胞|復(fù)蘇細(xì)胞|國(guó)產(chǎn)細(xì)胞|進(jìn)口細(xì)胞|人細(xì)胞株|凍存細(xì)胞|耐藥株NCI-H460細(xì)胞形態(tài),細(xì)胞培養(yǎng)

抗原抗體|動(dòng)物疫病診斷試劑盒|酶免Elisa試劑盒

進(jìn)口胎牛血清|Gibco血清|BOVOGEN血清|SERANA血清

ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:①標(biāo)本因素;②試劑因素;③操作因素。下面就一些常見ELISA操作過程中的問題一一分析。

1.樣品稀釋

酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),如果血清不稀釋,不可避免會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽(yáng)性。因此,國(guó)外檢測(cè)血清抗體的試劑盒,均規(guī)定將血清稀釋至適當(dāng)?shù)谋稊?shù),以降低非特異性反應(yīng),使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過大量試驗(yàn)確定,以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性。但是,有些用戶未能嚴(yán)格按使用說明書操作,如某些產(chǎn)品應(yīng)取10μl樣品進(jìn)行稀釋,個(gè)別用戶取5μl甚至1μl樣品進(jìn)行稀釋,由于吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠,因此造成樣品稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)確,檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)問題。

2.試劑盒平衡

試劑盒中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗(yàn)前平衡至室溫(25),一般需在室溫放置2030分鐘以上。平衡時(shí)間太短會(huì)造成試劑混勻不夠,樣品孵育時(shí)間相對(duì)縮短,ELISA反應(yīng)不夠充分。冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。

3.樣品和試劑的混勻

稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗(yàn)的均一性。

4.加樣

在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關(guān)鍵點(diǎn)是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以,有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性,下次測(cè)定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。

5.溫育

溫育是ELISA測(cè)定中影響測(cè)定成敗為關(guān)鍵的一個(gè)因素。ELISA作為一種固相免疫測(cè)定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時(shí)間。溫育所需時(shí)間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時(shí)間相對(duì)較短。為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和28℃。一些操作者,擅自改變說明書操作,使用自己喜歡的溫育時(shí)間和溫育溫度,這樣造成一些不必要的麻煩。因?yàn)椋煌噭┖杏胁煌臏赜龝r(shí)間和溫育溫度的選擇,隨意更改溫育時(shí)間或者溫育溫度將導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)偏差。

6.洗板

固相免疫測(cè)定技術(shù)是一種非均相免疫測(cè)定技術(shù),需以洗滌操作將特異結(jié)合于固相的抗原或抗體與反應(yīng)溫育過程中吸附的非特異成份分離開來,以保證ELISA測(cè)定的特異性。洗板對(duì)于ELISA測(cè)定來說,也是其關(guān)鍵的一步。洗液盡量不要溢出孔外;加洗液后要靜置1分鐘,甩去板孔中洗液后,一定要大力拍干;及時(shí)更換吸水紙,尤其是拍過酶標(biāo)記物的吸水紙一定要棄去,否則可能影響試驗(yàn)結(jié)果。

7.邊緣效應(yīng)

使用96孔板的ELISA測(cè)定中,常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)”,即外周孔顯色較中心孔深。經(jīng)研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體,在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測(cè)定中,將板從室溫(通常在25℃左右)置于37℃溫箱,板也升溫時(shí),在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時(shí),將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)”,并且可提高測(cè)定的重復(fù)性。

8.顯色

顯色一定要控制時(shí)間,根據(jù)試劑盒說明操作即可。一般來說,顯色時(shí)間過短,結(jié)果偏低;顯色時(shí)間過長(zhǎng),空白增高或者非特異性顯色增加。

9.比色

比色要注意波長(zhǎng)的選擇。以TMB為底物和以OPD為底物的試劑盒均有使用,而前者比色波長(zhǎng)為450nm,后者為492nm,濾光片需根據(jù)要求隨時(shí)更換。因此,容易出現(xiàn)濾光片錯(cuò)用的問題。

其次,單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng)比色選擇的問題。所謂的單波長(zhǎng)比色即是通常的以對(duì)顯色具有zui大吸收的波長(zhǎng)如450nm492nm進(jìn)行比色測(cè)定;而雙波長(zhǎng)雙色則酶標(biāo)儀在敏感波長(zhǎng)如450nm和非敏感波長(zhǎng)如630nm下各測(cè)定一次,敏感波上下的吸光度測(cè)定值為樣本測(cè)定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度與板孔上指紋、刮痕、灰塵等臟物所致的吸光度之和;非敏感波長(zhǎng)下測(cè)定即改變波長(zhǎng)至一定值,使得樣本測(cè)定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度值為零,此時(shí)測(cè)得的吸光度即為臟物的吸光度值。后酶標(biāo)儀給出的數(shù)值為敏感波長(zhǎng)下的吸光度值與非常感波長(zhǎng)下的吸光度值的差。因此,雙波長(zhǎng)比色測(cè)定具有能排除由微滴板本身、板孔內(nèi)標(biāo)本的非特異吸收、指紋、刮痕、灰塵等對(duì)特異顯色測(cè)定吸光度的影響的優(yōu)點(diǎn)。由于ELISA測(cè)定中單個(gè)空白孔的非特異吸收上有一定程度的不確定性,也就是說每次測(cè)定或同次測(cè)定空白孔位置的不同均有可能得到不同吸光度測(cè)定值,故而在ELISA測(cè)定比色時(shí),是使用雙波長(zhǎng)比色。

suer 35.1雜交瘤細(xì)胞抗CD2

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suer 2T3小鼠成骨細(xì)胞

suer 2V6.11人胚腎細(xì)胞

suer 3T3-L1小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

suer 3T3-Swiss鼠胚胎成纖維細(xì)胞

suer 3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

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suer 95-D 人高轉(zhuǎn)移肺癌

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suer A9小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞

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suer ACC-3人腺樣囊性癌

suer ACHN人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞

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suer BGC-823低分化胃腺癌

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suer BT-20人乳癌

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suer BT474人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

suer BT-549人乳腺管癌細(xì)胞

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suer C127小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞

suer C200人卵巢癌

suer C26小鼠結(jié)腸癌

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suer C6大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

suer Ca Ski人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞

suer Caco-2人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

suer CaKi-1人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞

suer CaKi-2人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞

suer CAL-27人舌鱗癌細(xì)胞

suer Calu-1人肺癌細(xì)胞

suer Calu-3人肺腺癌 (胸水)

suer Calu-6人退行性癌細(xì)胞

suer CaOV3人卵巢癌細(xì)胞

suer Capan1人胰腺癌細(xì)胞

suer Capan2人胰腺癌細(xì)胞

suer CaSki人宮頸腸轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞

suer CBRH-7919大鼠肝癌細(xì)胞

suer CCD-1095Sk人乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞

suer CCRF-CEM人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞

suer CEM/C1人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞

suer CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞

suer Chang liver人張氏肝細(xì)胞

suer CHL倉(cāng)鼠肺細(xì)胞

suer CHO倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞

suer CHO/dhFr倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,二氫葉酸還原酶缺陷

suer CHO-K1倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株

suer CL1人前列腺癌

suer CCRF-CEM人鼻咽癌細(xì)胞

suer CNE-2人鼻咽癌細(xì)胞

suer COLO 205人結(jié)腸癌細(xì)胞

suer COLO 320DM人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

suer COLO-704人卵巢癌細(xì)胞

suer COLO720E人卵巢癌細(xì)胞

suer COS-1非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞

suer COS-7非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞

suer COV362人卵巢癌細(xì)胞

suer COV434人卵巢癌細(xì)胞

suer COV504人卵巢癌細(xì)胞

suer COV644人卵巢癌細(xì)胞

suer CRFK貓腎細(xì)胞

suer CRL-9444人膜間皮細(xì)胞

suer CT-26小鼠結(jié)腸腺癌細(xì)胞

suer CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞

suer CTLA4 Ig-24倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞

suer CTLL-2細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞

suer CV-1 非洲綠猴腎細(xì)胞

suer CW-2人結(jié)腸腺癌細(xì)胞

suer D407人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

suer D6人肺腺癌

suer Dami人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞

suer DaudiBurkitt's淋巴瘤細(xì)胞

suer DC2.4小鼠樹突狀細(xì)胞

suer DH82狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞

suer DLD-1人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞

suer DU145人前列腺癌

suer EA.hy926人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞

suer EBTr (NBL-4)牛胚氣管細(xì)胞

suer EC18人食管癌細(xì)胞

suer EC-9706人食管癌細(xì)胞

suer ECA小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞

suer ECA-109人食管癌細(xì)胞

suer ECV304人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

suer ED-25人肝靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

suer EFO-21人卵巢癌細(xì)胞

suer EFO-27人卵巢癌細(xì)胞

suer EJ人膀胱癌細(xì)胞

suer EOMA小鼠血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞

suer ES-2人卵巢透明細(xì)胞癌

suer F81貓腎細(xì)胞

suer F9小鼠畸胎瘤細(xì)胞

suer FaDu人咽鱗癌細(xì)胞

suer FO小鼠骨髓瘤細(xì)胞

suer FRhK-4恒河猴胚腎細(xì)胞

suer GBC-SD人膽囊癌細(xì)胞

suer GES-1人胃黏膜上皮細(xì)胞

suer GLC82人低分化肺腺癌細(xì)胞

suer GRC-1人腎癌細(xì)胞

suer H128人小細(xì)胞肺癌

suer H1299人非小細(xì)胞肺癌

suer H22小鼠肝癌細(xì)胞

suer H292人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)

suer H460人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞

suer H466人小細(xì)胞肺癌

suer H69人小細(xì)胞肺癌

suer H9c2(2-1)大鼠心肌細(xì)胞

suer Hacat人正常皮膚細(xì)胞

suer HBL-100人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞

suer HBZY-1大鼠腎小球系膜細(xì)胞

suer HCC94人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化)

suer HCC1937人乳腺癌細(xì)胞

suer HCC827人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

suer HCCC-9810人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞

suer HCCLM3人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞

suer HCCLMS人肝轉(zhuǎn)移癌

suer Hce-8693人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化)

suer HCE-8962人盲腸未分化癌

suer HCT 116人結(jié)腸癌細(xì)胞

suer HCT-15人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

suer HCT-8人回盲腸腺癌細(xì)胞

suer HEB人腦膠質(zhì)細(xì)胞株

suer HEC-1-A人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞

suer HEC-1-B人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞

suer HEEC人食道上皮細(xì)胞

suer HEK293-L人胚腎細(xì)胞

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