NK-92細胞，ATCC細胞，培養技術
- 產品/服務：NK-92細胞，ATCC細胞，培養技術
- 型 號：株
- 品 牌：ATCC
- 單 價：面議
- 更新日期：2020-04-21
- 有效期至：長期有效
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NK-92細胞，ATCC細胞，培養技術；NK-92懸浮細胞 在培養的過程中會聚團 有少量貼壁 但是貼壁很輕微 不需要胰酶消化只要槍頭輕輕吹打即可以從壁上下來。慧穎細胞庫引進ATCC細胞庫，狀態良好，傳代次數少，提醒各...
NK-92細胞，ATCC細胞，培養技術
一．產品簡介
1、產品名稱：NK-92
2、產品規格：25cm2培養瓶
3、培養基信息：
完全培養基：
75%α-MEM( 成分：無核糖核苷、去脫氧核糖核苷， Gbico 貨號：12561-056）+12.5%熱滅活馬血清+12.5%進口FBS+1%P/S+0.2mM 肌醇+0.02mM 葉酸+0.1mM β-Mer+100-200U/ml IL-2
4、 培養條件： 37℃，5%CO2細胞培養箱中培養
5、凍存條件：α-MEM+40% FBS+10%DMSO
二． 使用方法
1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：
取出25cm2培養瓶，75%酒精擦拭培養瓶，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中靜置4-6小時或隔夜，以穩定細胞狀態。然后，用75%酒精擦拭培養瓶，拆下封口膜，收集瓶內液體于50ml離心管中，1000rpm離心5min，棄上清，用6ml完全培養基重懸，全部接種到25cm2培養瓶中，再放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養。如果離心后細胞量很多，可以直接1:2分瓶培養。
2、細胞傳代：
細胞生長至覆蓋培養瓶的85%及以上面積時，收集瓶內液體于15ml離心管中，1000rpm離5min，棄上清，用12ml完全培養基重懸細胞，按1:2的比例進行接種傳代，接種到25cm2培養瓶中，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養，2-3天更換培養液。換液的步驟同細胞 NK-92細胞，ATCC細胞，培養技術傳代步驟。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的85%及以上面積時，收集瓶內液體于15ml離心管中，1000rpm離心5min，棄上清，用適當量的凍存液（基礎培養基：FBS：DMSO=5:4:1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
2）先將細胞凍存管放置于4℃ 0.5h，再放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃隔夜，24h后可轉入液氮中進行長期保存。
4、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至含有5ml完全培養液的15ml離心管中，然后1000rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細胞用6ml完全培養基重懸，接種到培養瓶中，后放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）第二天，換用新鮮完全培養基繼續培養。
三． 注意事項
1、培養基于4℃條件下可保存3-6個月；
2、在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作；
3、傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態；
4、如果您的實驗時間較長， 請在收到細胞后傳代時，按細胞量分種2瓶，使用其中的一瓶細胞實驗，其余的細胞先凍存起來。下次實驗需要時，再復蘇；
5、該 NK-92細胞，ATCC細胞，培養技術只可用于科研。
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