雞磷酸化AKT蛋白(P-AKT)ELISA試劑盒
- 產品/服務：雞磷酸化AKT蛋白(P-AKT)ELISA試劑盒
- 型 號：96T/48T
- 品 牌：DECO
- 單 價：面議
- 更新日期：2020-04-21
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：916
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【雞磷酸化AKT蛋白(P-AKT)ELISA試劑盒】產品詳情：
本試劑盒僅供研究使用。
雞磷酸化AKT蛋白(P-AKT)ELISA試劑盒使用目的：
本試劑盒用于測定血清、血漿及相關液體樣本中待測物質的含量。
雞磷酸化AKT蛋白(P-AKT)ELISA試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質水平。用純化的待測物質抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入待測物質，再與HRP標記的待測物質抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中待測物質濃度。
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雞磷酸化AKT蛋白(P-AKT)ELISA試劑盒操作步驟：用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法：
1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg／ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔O·D值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
雞磷酸化AKT蛋白(P-AKT)ELISA試劑盒試劑盒組成：
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試劑盒組成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
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說明書 |
1份 |
1份 |
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封板膜 |
2片（48） |
2片（96） |
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密封袋 |
1個 |
1個 |
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酶標包被板 |
1×48 |
1×96 |
2-8℃保存 |
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陰性對照 |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
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陽性對照 |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
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酶標試劑 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
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樣品稀釋液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
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顯色劑A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
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顯色劑B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
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終止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
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濃縮洗滌液 |
（20ml×20倍）×1瓶 |
（20ml×30倍）×1瓶 |
2-8℃保存 |
雞磷酸化AKT蛋白(P-AKT)ELISA試劑盒操作程序：
1． 棄去液體，甩干，每孔加滿稀釋后洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。如此重復5次，拍干。
2． 每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.。
3． 取出酶標板，每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
4．測定：以空白孔調零，在450nm波長下測量各孔的吸光度值（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
5．根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種應用軟件來計算。應記住由于樣品稀釋了的，其實際濃度應該乘以總稀釋倍數。
我們用更專業、更的實驗數據，來驗證ELISA實驗的嚴謹性，科學來不得半點假，一組實驗數據的作假，就會導致實驗研究的徹底作廢，沒人會相信了，這樣的損失往往是可悲、可恨的，雞磷酸化AKT蛋白(P-AKT)ELISA試劑盒浪費錢不說，時間跟人力也是一種大大的浪費，所以，每一個實驗人都應該恪守實驗的嚴謹性和真實性。選擇上海素爾，您正確的選擇??！
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免責聲明：
1、試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。
2、嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
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