BEL-7402細(xì)胞|素爾|科研用人肝癌細(xì)胞株

BEL-7402細(xì)胞|素爾|科研用人肝癌細(xì)胞株;;@素爾細(xì)胞庫(kù),供應(yīng)ATCC細(xì)胞,傳代細(xì)胞,癌細(xì)胞,細(xì)胞染色,細(xì)胞增殖,卵巢癌細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,肺癌細(xì)胞,黑色素瘤細(xì)胞,結(jié)腸癌細(xì)胞,原代細(xì)胞等,價(jià)格優(yōu)惠!...
BEL-7402細(xì)胞|素爾|科研用人肝癌細(xì)胞株,一時(shí)間要鏡檢:觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常,對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好 ,觀察細(xì)胞密度,有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化,很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時(shí)貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會(huì)發(fā)生大片的脫落,細(xì)胞聚集在一起,但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。
BEL-7402細(xì)胞|素爾|科研用人肝癌細(xì)胞株 當(dāng)通過上一步的觀察,細(xì)胞初步?jīng)]有任何問題時(shí),進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí),則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下,會(huì)調(diào)整為靜止期,或者慢速生長(zhǎng)期,必須恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右,才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài),在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率,和細(xì)胞的存活率。
BEL-7402細(xì)胞|素爾|科研用人肝癌細(xì)胞株 如果經(jīng)一步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí),則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶;對(duì)于生長(zhǎng)較慢,細(xì)胞比較薄,狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型,一次少傳些,保證每瓶細(xì)胞密度大些,便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞,一次處理也可以依照第二種情況。
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胰酶消化的程度是一個(gè)關(guān)鍵:消化過度則對(duì)細(xì)胞的活性影響較大,并有部分細(xì)胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細(xì)胞難于從瓶壁上吹下,反復(fù)吹打同樣也會(huì)損傷細(xì)胞活性。影響消化速度的因素較多,主要有胰酶溶液的活性(配制條件、凍存或4℃保存時(shí)間長(zhǎng)短、是否反復(fù)凍融、解凍后存放時(shí)間及溫度等)、消化時(shí)的溫度(氣溫、細(xì)胞培養(yǎng)瓶及胰酶溶液的溫度)以及所加胰酶溶液的多少等。含有EDTA的胰酶會(huì)比不含的消化能力強(qiáng)很多,不同細(xì)胞對(duì)消化液的敏感性也不同,BEL-7402細(xì)胞|素爾|科研用人肝癌細(xì)胞株 ,消化時(shí)間仔細(xì)去摸索一下,每過2分鐘鏡下觀察細(xì)胞是否變圓,記錄消化時(shí)間,下一次操作參考之前的記錄來(lái)控制時(shí)間即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞換液時(shí)只需要補(bǔ)液就行。
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