A-204細胞，細胞株培養
發布時間：2016-05-04瀏覽次數：1045返回列表
1. 收到細胞株包裹時， 請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形， 若有請立即通知。細胞株請盡速開始培養， 或立即冷凍保存(置于–70 °C， 隔夜后， 移到liq N2)。
細胞復蘇的原則－快速融化：
必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶，對細胞造成損害。
A-204細胞，細胞株培養，如需要訂購，請提供貴單位名稱、發票抬頭、收貨地址、正確郵編號，聯系方式： QQ： 張昕
具體操作
一. 實驗前準備：
1.將水浴鍋預熱至37℃
2.用75％酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養瓶等等。
二．取出凍存管：
1.根據細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。
2.從液氮罐中取出細胞盒，取出所需的細胞，同時核對管外的編號。
三．迅速解凍：
1.迅速將凍存管投入到已經預熱的水浴鍋中迅速解凍，并要不斷的搖動，使管中的液體迅速融化。
2.約1-2min后凍存管內液體完全溶解，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁，再拿入超凈臺內。
四.平衡離心：用架盤天平平衡后，放入離心機中3000r/min 離心3min
五.制備細胞懸液：
1.吸棄上清液。
2.向離心管內加入10ml培養液，吹打制成細胞懸液。
六.細胞計數：細胞濃度以5×105/ml為宜。
七.培養細胞將復合細胞計數要求的細胞懸液分裝入培養瓶內，將培養瓶放入37℃和5％CO2的培養箱內2-4小時（或者24-48小時）后換液繼續培養培養，換液的時間由細胞情況而定。
初學者易犯錯誤：
1水浴鍋未預熱或者未預熱到37℃。
2.水浴鍋內凍存管太多，導致傳熱不佳，使融化時間延長。
3.離心前忘記平衡，導致離心機損壞和細胞丟失。
4.一次復蘇細胞過多，忘記更換吸頭和吸管，導致細胞交叉污染。
（另：冷凍細胞解凍程序）
2.1. 依據細胞株數據單之基礎培養基種類、血清種類和其它之成份和比例， 制備培養基。大多數之細胞均無法立即適應不同之基礎培養基或不同之血清種類， 若因實驗需要， 必須有所不同時， 務必以緩慢比例漸次改變培養基組成， 確定細胞適應后， 方進行所需之實驗。
2.2. FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清)，對細胞而言差異大，請務必依據細胞株資料單之血清種類培養之。
2.3. 將培養基置于 37 °C水槽中回溫，回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之， 移入無菌操作臺內。取出冷凍管， 立即放入37 °C 水槽中快速解凍， 水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿， 否則易發生污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化后， 以70 % ethanol 擦拭冷凍管外部， 移入無菌操作臺內。
2.4. 依據細胞種類和濃度，于無菌操作臺內取 10 ml培養基加至 T25或 T75 flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T25 或T75 flask 內之培養基， 混 合均勻，放入37 °C，5 % CO2 培養箱培養。
2.5. 對大多數細胞而言，1 % 以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。唯對少數因對DMSO 敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO 者， 則可將解凍后之細胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養基中,離心300 xg (約1000 rpm)，5 分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養基，將細胞均勻混合后， 轉移至培養瓶中， 再放入37 °C， 5 % CO2 培養箱培養。收到T25 flask 細胞時， 處理方式為︰
1. 于寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T25 flask 均加滿培養基。請檢查flask 外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現象，若有任何問題， 不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。
2. 將原封之T25 flask 靜置于37 °C， 5 % CO2 培養箱中，使細胞回溫至37 °C， 并讓運送過程中少數脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內取出flask內之培養基，(取出之培養基可以再使用)，僅留約5-10ml 培養基于flask 內，依 一般培養方式再將細胞置入培養箱中或細胞已長滿盤， 則將細胞做傳代培養。
|
697細胞，細胞株培養 |
|
23132/87細胞，細胞株培養 |
|
23132/87細胞，細胞株培養 |
|
23132/87細胞，細胞株培養 |
|
23132/87細胞，細胞株培養 |
|
23132/87細胞，細胞株培養 |
|
253J細胞，細胞株培養 |
|
253J-BV細胞，細胞株培養 |
|
42-MG-BA細胞，細胞株培養 |
|
59M細胞，細胞株培養 |
|
639-V細胞，細胞株培養 |
|
647-V細胞，細胞株培養 |
|
769-P細胞，細胞株培養 |
|
786-O細胞，細胞株培養 |
|
8305C細胞，細胞株培養 |
|
8505C細胞，細胞株培養 |
|
8-MG-BA細胞，細胞株培養 |
|
A101D細胞，細胞株培養 |
|
A1207細胞，細胞株培養 |
|
A172細胞，細胞株培養 |
|
A-204細胞，細胞株培養 |
|
A2058細胞，細胞株培養 |
|
A-253細胞，細胞株培養 |
|
A2780細胞，細胞株培養 |
|
A3/KAW細胞，細胞株培養 |
|
A-375細胞，細胞株培養 |
|
A4/Fuk細胞，細胞株培養 |
|
A-498細胞，細胞株培養 |
|
A549細胞，細胞株培養 |
|
A-673細胞，細胞株培養 |
|
A-704細胞，細胞株培養 |
|
ABC-1細胞，細胞株培養 |
|
ACC-MESO-1細胞，細胞株培養 |
|
ACHN細胞，細胞株培養 |
|
AGS細胞，細胞株培養 |
|
Alexander cells細胞，細胞株培養 |
|
ALL-SIL細胞，細胞株培養 |
|
AM-38細胞，細胞株培養 |
|
AML-193細胞，細胞株培養 |
|
AMO-1細胞，細胞株培養 |
|
AN3 CA細胞，細胞株培養 |
|
AsPC-1細胞，細胞株培養 |
|
AU565細胞，細胞株培養 |
|
AZ-521細胞，細胞株培養 |
|
BC-3C細胞，細胞株培養 |
|
BCP-1細胞，細胞株培養 |
|
B-CPAP細胞，細胞株培養 |
|
BDCM細胞，細胞株培養 |
|
Becker細胞，細胞株培養 |
|
BEN細胞，細胞株培養 |
|
BFTC-905細胞，細胞株培養 |
|
BFTC-909細胞，細胞株培養 |
|
BHT-101細胞，細胞株培養 |
|
BHY細胞，細胞株培養 |
|
BICR 16細胞，細胞株培養 |
|
BICR 18細胞，細胞株培養 |
|
BICR 22細胞，細胞株培養 |
|
BICR 31細胞，細胞株培養 |
|
BICR 56細胞，細胞株培養 |
|
BICR 6細胞，細胞株培養 |
|
BJ hTERT細胞，細胞株培養 |
|
BL-41細胞，細胞株培養 |
|
BL-70細胞，細胞株培養 |
|
BT-20細胞，細胞株培養 |
|
BT-474細胞，細胞株培養 |
|
BT-483細胞，細胞株培養 |
|
BT-549細胞，細胞株培養 |
|
BV-173細胞，細胞株培養 |
|
BxPC-3細胞，細胞株培養 |
|
C2BBe1細胞，細胞株培養 |
|
C32細胞，細胞株培養 |
|
C3A細胞，細胞株培養 |
|
CA46細胞，細胞株培養 |
|
CADO-ES1細胞，細胞株培養 |
|
Caki-1細胞，細胞株培養 |
|
Caki-2細胞，細胞株培養 |
|
CAL 27細胞，細胞株培養 |
|
CAL-120細胞，細胞株培養 |
|
CAL-12T細胞，細胞株培養 |
|
CAL-148細胞，細胞株培養 |
|
CAL-29細胞，細胞株培養 |
|
CAL-33細胞，細胞株培養 |
|
CAL-51細胞，細胞株培養 |
|
CAL-54細胞，細胞株培養 |
|
CAL-62細胞，細胞株培養 |
|
CAL-78細胞，細胞株培養 |
|
CAL-85-1細胞，細胞株培養 |
|
Calu-1細胞，細胞株培養 |
|
Calu-3細胞，細胞株培養 |
|
Calu-6細胞，細胞株培養 |
|
CAMA-1細胞，細胞株培養 |
|
Caov-3細胞，細胞株培養 |
|
Caov-4細胞，細胞株培養 |
|
Capan-1細胞，細胞株培養 |
|
Capan-2細胞，細胞株培養 |
|
CAS-1細胞，細胞株培養 |
|
CCF-STTG1細胞，細胞株培養 |
|
CCK-81細胞，細胞株培養 |
|
Cell.line.primary.name細胞，細胞株培養 |
|
CFPAC-1細胞，細胞株培養 |
|
CGTH-W-1細胞，細胞株培養 |
|
CH-157MN細胞，細胞株培養 |
|
ChaGo-K-1細胞，細胞株培養 |
|
CHL-1細胞，細胞株培養 |
|
CHP-126細胞，細胞株培養 |
|
CHP-212細胞，細胞株培養 |
|
CI-1細胞，細胞株培養 |
|
CJM細胞，細胞株培養 |
|
CL-11細胞，細胞株培養 |
|
CL-14細胞，細胞株培養 |
|
CL-34細胞，細胞株培養 |
|
CL-40細胞，細胞株培養 |
|
CMK細胞，細胞株培養 |
|
CMK-11-5細胞，細胞株培養 |
|
CMK-86細胞，細胞株培養 |
|
CML-T1細胞，細胞株培養 |
|
COLO 201細胞，細胞株培養 |
|
COLO 205細胞，細胞株培養 |
|
COLO 668細胞，細胞株培養 |
|
COLO 684細胞，細胞株培養 |
|
COLO 741細胞，細胞株培養 |
|
COLO 775細胞，細胞株培養 |
|
COLO 792細胞，細胞株培養 |
|
COLO 829細胞，細胞株培養 |
|
COLO-320細胞，細胞株培養 |
|
COLO-677細胞，細胞株培養 |
|
COLO-678細胞，細胞株培養 |
|
COLO-679細胞，細胞株培養 |
|
COLO-680N細胞，細胞株培養 |
|
COLO-704細胞，細胞株培養 |
|
COLO-783細胞，細胞株培養 |
|
COLO-800細胞，細胞株培養 |
|
COLO-818細胞，細胞株培養 |
|
COLO-849細胞，細胞株培養 |
|
COR-L105細胞，細胞株培養 |
|
COR-L23細胞，細胞株培養 |
|
COR-L24細胞，細胞株培養 |
|
COR-L279細胞，細胞株培養 |
|
COR-L311細胞，細胞株培養 |
|
COR-L47細胞，細胞株培養 |
|
COR-L51細胞，細胞株培養 |
|
COR-L88細胞，細胞株培養 |
|
COR-L95細胞，細胞株培養 |
|
COV318細胞，細胞株培養 |
|
COV362細胞，細胞株培養 |
|
COV434細胞，細胞株培養 |
|
COV504細胞，細胞株培養 |
|
COV644細胞，細胞株培養 |
|
CPC-N細胞，細胞株培養 |
