豬瘦素，LEP，檢測試劑盒
- 產品/服務：豬瘦素，LEP，檢測試劑盒
- 單 價：面議
- 更新日期：2020-04-10
- 有效期至：長期有效
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豬瘦素，LEP，檢測試劑盒說明書Elisa檢測試劑盒專業售后服務提供代測：規格：96T/48T試劑盒說明書：48孔配置一份/96孔配置一...
豬瘦素，LEP，檢測試劑盒說明書Elisa檢測試劑盒專業售后服務提供代測：
規格：96T/48T
試劑盒說明書：48孔配置一份/96孔配置一份
種屬:人、大鼠、小鼠、兔、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等,多年專業酶免服務，質量保證，提供代測服務
豬瘦素，LEP，檢測試劑盒Elisa試劑盒操作步驟
實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制)，37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl，37℃，60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色(30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
豬瘦素，LEP，檢測試劑盒包裝規格：
| 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 | |
| 說明書 | 1份 | 1份 | |
| 封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
| 密封袋 | 1個 | 1個 | |
| 酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃低溫保存 |
| 標準品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃低溫保存 |
| 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃低溫保存 |
| 酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃低溫保存 |
| 樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃低溫保存 |
| 顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃低溫保存 |
| 顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃低溫保存 |
| 終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃低溫保存 |
| 濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃低溫保存 |
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細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
培養細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
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