ELISA曲線擬合技巧指導(dǎo)
發(fā)布時間：2023-07-03瀏覽次數(shù)：837返回列表
產(chǎn)品說明書都會推薦用戶擬合標(biāo)曲方法，可以用軟件繪制也可以通過excel進(jìn)行制作。按照科學(xué)分析方法，如果存在奇異點(diǎn)或者污點(diǎn)，直接采用線性分析不是很好，要對擬合曲線的幾個點(diǎn)進(jìn)行取舍，同時也可以改用雙對數(shù)直線擬合或者四參數(shù)曲線擬合。
那么常用的曲線擬合回歸方程主要為以下幾種：
種是直線回歸：直線回歸是簡單的回歸模型,也是基本的曲線擬合回歸分析方法，將所有的測試點(diǎn)擬合為一條直線，其擬合函數(shù)方程式為：y=a+bx。但是因?yàn)閷?shí)際實(shí)驗(yàn)中線性的情況下可能直線回歸可以獲得較為理想的R2值。那么如果直線線性不理想的情況下如何擬合？
作為擁有十多年ELISA產(chǎn)品生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)的企業(yè)，我們會推薦用戶進(jìn)行多項(xiàng)式擬合來改善直線回歸線性不理想的問題。
二次多項(xiàng)式擬合回歸方程：二次多項(xiàng)式成拋物線狀，開口向下或者向上，在很多ELISA實(shí)驗(yàn)中，擬合近似于二次多項(xiàng)式的升段或者降段，所以使用二次多項(xiàng)式擬合時，好保證取值的范圍都落在曲線的升段或者降段。其擬合函數(shù)方程式為：y=ax2+bx+c
說到雙抗夾心，我們還有對應(yīng)的競爭抑制ELISA產(chǎn)品，它的曲線擬合也要給您介紹下。
對數(shù)擬合回歸方程：我們將標(biāo)準(zhǔn)品的O.D測值設(shè)為x軸，標(biāo)準(zhǔn)品濃度的對數(shù)作為y軸，濃度是自變量，O.D.值是因變量進(jìn)行曲線擬合。
后一種是四參數(shù)擬合回歸方程：競爭法和夾心法都可以用到。它的形狀,根據(jù)情況,可能是一個單調(diào)上升的類似指數(shù),對數(shù),或雙曲線的曲線,也可能是一個單調(diào)下降的上述曲線,還可以是一條S形曲線。它要求X值不能小于0(因?yàn)橹笖?shù)是實(shí)數(shù),故有此要求)。在很多情況下它都可以擬合ELISA的反應(yīng)曲線,所以它也成了ELISA中應(yīng)用廣的模型之一。
曲線擬合方法雖多，要根據(jù)不同類型ELISA本身的特點(diǎn)，選擇適合的曲線擬合模型，才能得到合理的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。一般情況下，需要綜合考慮標(biāo)準(zhǔn)曲線的趨勢走向以及R值的大小以及樣本落值情況。
