多參數(shù)水質(zhì)分析儀的參數(shù)設(shè)置技巧
發(fā)布時間：2019-01-04瀏覽次數(shù)：1611返回列表
使用多參數(shù)水質(zhì)分析儀時，掌握其參數(shù)設(shè)置技巧是非常重要，因為這直接關(guān)系著其分析結(jié)果的準(zhǔn)確與否。
多參數(shù)水質(zhì)分析儀的參數(shù)設(shè)置技巧如下：
1、測定溫度一般全自動生化儀都是37℃ ，而半自動生化儀有室溫、25~C、30cc、37~C等，終點法由于反應(yīng)在機(jī)外進(jìn)行，選擇室溫可以減少儀器溫度調(diào)整時間，提高工作效率，而速率法和兩點法都選擇37℃比較合適。
2、樣本體積分?jǐn)?shù)樣品體積分?jǐn)?shù)即樣品體積與反應(yīng)液總體積的比值(sv／TV)。酶活力測定中，樣品在總體積中的比例應(yīng)在10％以下。一般來說，待測物質(zhì)在樣品中含量低的、生理波動范圍大的，樣品用量較大。如Trinder反應(yīng)測定血清葡萄糖、膽固醇等，樣品試劑比例多為1：100，測定血尿酸或高密度脂蛋白膽固醇，常增加為1：50；AIJT和AST的樣品試劑比例多為1：10至1：20。方法靈敏、吸光度高的實驗方法，樣品試劑比例小，如白蛋白BCG法，樣品試劑比例常為1：200。肌酐Jaffe氏法監(jiān)測時間短、吸光度值較低，樣品試劑比例多為l：10。一般應(yīng)以試劑說明為準(zhǔn)，不宜輕易改動。可根據(jù)zui終反應(yīng)液的量來計算樣本量和試劑量。
3、吸液量主要是針對流動比色的全自動或半自動儀器的參數(shù)，原則是吸人量不得大于或等于反應(yīng)液總體積，否則會導(dǎo)致吸空形成比色池氣泡，zui好留100～200ul的余地。
4、標(biāo)準(zhǔn)液濃度終點法和兩點法必須設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)，選擇合格的標(biāo)準(zhǔn)品很重要。有些試劑盒配有標(biāo)準(zhǔn)液，但是部分項目標(biāo)準(zhǔn)液定標(biāo)偏差太大，我們使用的是干粉復(fù)合羅氏校準(zhǔn)液，復(fù)溶后分裝冷凍保存，只要復(fù)溶的水質(zhì)保證，避免反復(fù)凍融，校準(zhǔn)的結(jié)果還是很滿意的。注意校準(zhǔn)液靶值獲得的方法學(xué)，方法不同耙值是有差異的，比較典型的是ALP測定有IFCC和DGKC法，差異比較大，不可簡單套用。
5、方法類型可根據(jù)試劑盒要求或反應(yīng)原理來設(shè)置。對于半自動生化分析儀終點法只是一點終點法，全自動生化儀單試劑選擇一點終點法，而雙試劑選擇兩點終點法。大多數(shù)酶學(xué)測定使用速率法，尿素氮、肌酐測定等用兩點法。
6、監(jiān)測時間 酶促反應(yīng)延遲期后，在過量底物的存在下，反應(yīng)速率加快并達(dá)到一個反應(yīng)速率穩(wěn)定的階段，即酶促反應(yīng)以恒定的速率進(jìn)行，不受底物濃度的影響，這段時間稱為線性反應(yīng)期或零級反應(yīng)期，自動化生化分析儀的監(jiān)測時間即為此期。測酶的連續(xù)監(jiān)測法至少90—120s或至少4點(3個AA)，少于3個△A不能稱為連續(xù)監(jiān)測法，因為不能計算線性度。監(jiān)測時間過長則容易發(fā)生底物耗盡，可測范圍變窄。
7、測定波長測定波長選擇有三個主要條件：(1)待測物質(zhì)在該波長下的光吸收zui大。(2)其吸收峰宜較寬而鈍，(3)常見干擾物在該波長下的光吸收zui小。試劑盒說明一般已提供波長參數(shù)。有些儀器波長選擇受濾光片數(shù)量限制，應(yīng)該就近選擇為原則。
8、試劑吸光度上下限有的生化儀要求設(shè)置試劑吸光度上下限，主要是用來監(jiān)測試劑的質(zhì)量的，但是試劑吸光度上限和下限不是試劑質(zhì)量的指針。因此，一定的校準(zhǔn)頻率和室內(nèi)質(zhì)控是質(zhì)量保證的必需手段。我們在實際工作中就遇到酶活力測定的試劑空白數(shù)據(jù)在規(guī)定限值內(nèi)，但質(zhì)控物測定結(jié)果連續(xù)偏低，病人結(jié)果因每天標(biāo)本少而難以判斷，zui后發(fā)現(xiàn)是試劑質(zhì)量下降。
9、延遲時間，延遲時間指試劑與樣品混合后到監(jiān)測開始之間的時間。延遲時間的選擇取決于被測物質(zhì)的濃度(酶的活性)大小、反應(yīng)速度的快慢、酶促反應(yīng)的級數(shù)、樣品中干擾物消除所需的時間等。比如：CHE活性高僅需20— 30秒，LDH一級反應(yīng)需30～40秒，AIJT需40～6O秒，AST需60～75秒，CK需90～120秒。半自動生化儀上酶活性連續(xù)監(jiān)測法的延遲時間設(shè)定，由于只能單份樣品逐一測定，若延遲時問全部設(shè)置在儀器內(nèi)，每個延遲時間加監(jiān)測時間至少1分鐘以上，守候時間較長。工作量大時，可以根據(jù)儀器控溫、加樣及讀數(shù)和試劑特點，以及室溫情況，將延遲時問挪一部分到機(jī)外，套式操作，但要確保機(jī)內(nèi)延遲時間不要進(jìn)入線性反應(yīng)期。兼顧延遲時間和監(jiān)測時間反應(yīng)時間是有限制的。在速率法和兩點法中，延長延遲時間必然縮短線性監(jiān)測期，減少測定的線性范圍，也易發(fā)生底物耗盡。
多參數(shù)水質(zhì)分析儀的參數(shù)設(shè)置技巧如下：
1、測定溫度一般全自動生化儀都是37℃ ，而半自動生化儀有室溫、25~C、30cc、37~C等，終點法由于反應(yīng)在機(jī)外進(jìn)行，選擇室溫可以減少儀器溫度調(diào)整時間，提高工作效率，而速率法和兩點法都選擇37℃比較合適。
2、樣本體積分?jǐn)?shù)樣品體積分?jǐn)?shù)即樣品體積與反應(yīng)液總體積的比值(sv／TV)。酶活力測定中，樣品在總體積中的比例應(yīng)在10％以下。一般來說，待測物質(zhì)在樣品中含量低的、生理波動范圍大的，樣品用量較大。如Trinder反應(yīng)測定血清葡萄糖、膽固醇等，樣品試劑比例多為1：100，測定血尿酸或高密度脂蛋白膽固醇，常增加為1：50；AIJT和AST的樣品試劑比例多為1：10至1：20。方法靈敏、吸光度高的實驗方法，樣品試劑比例小，如白蛋白BCG法，樣品試劑比例常為1：200。肌酐Jaffe氏法監(jiān)測時間短、吸光度值較低，樣品試劑比例多為l：10。一般應(yīng)以試劑說明為準(zhǔn)，不宜輕易改動。可根據(jù)zui終反應(yīng)液的量來計算樣本量和試劑量。
3、吸液量主要是針對流動比色的全自動或半自動儀器的參數(shù)，原則是吸人量不得大于或等于反應(yīng)液總體積，否則會導(dǎo)致吸空形成比色池氣泡，zui好留100～200ul的余地。
4、標(biāo)準(zhǔn)液濃度終點法和兩點法必須設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)，選擇合格的標(biāo)準(zhǔn)品很重要。有些試劑盒配有標(biāo)準(zhǔn)液，但是部分項目標(biāo)準(zhǔn)液定標(biāo)偏差太大，我們使用的是干粉復(fù)合羅氏校準(zhǔn)液，復(fù)溶后分裝冷凍保存，只要復(fù)溶的水質(zhì)保證，避免反復(fù)凍融，校準(zhǔn)的結(jié)果還是很滿意的。注意校準(zhǔn)液靶值獲得的方法學(xué)，方法不同耙值是有差異的，比較典型的是ALP測定有IFCC和DGKC法，差異比較大，不可簡單套用。
5、方法類型可根據(jù)試劑盒要求或反應(yīng)原理來設(shè)置。對于半自動生化分析儀終點法只是一點終點法，全自動生化儀單試劑選擇一點終點法，而雙試劑選擇兩點終點法。大多數(shù)酶學(xué)測定使用速率法，尿素氮、肌酐測定等用兩點法。
6、監(jiān)測時間 酶促反應(yīng)延遲期后，在過量底物的存在下，反應(yīng)速率加快并達(dá)到一個反應(yīng)速率穩(wěn)定的階段，即酶促反應(yīng)以恒定的速率進(jìn)行，不受底物濃度的影響，這段時間稱為線性反應(yīng)期或零級反應(yīng)期，自動化生化分析儀的監(jiān)測時間即為此期。測酶的連續(xù)監(jiān)測法至少90—120s或至少4點(3個AA)，少于3個△A不能稱為連續(xù)監(jiān)測法，因為不能計算線性度。監(jiān)測時間過長則容易發(fā)生底物耗盡，可測范圍變窄。
7、測定波長測定波長選擇有三個主要條件：(1)待測物質(zhì)在該波長下的光吸收zui大。(2)其吸收峰宜較寬而鈍，(3)常見干擾物在該波長下的光吸收zui小。試劑盒說明一般已提供波長參數(shù)。有些儀器波長選擇受濾光片數(shù)量限制，應(yīng)該就近選擇為原則。
8、試劑吸光度上下限有的生化儀要求設(shè)置試劑吸光度上下限，主要是用來監(jiān)測試劑的質(zhì)量的，但是試劑吸光度上限和下限不是試劑質(zhì)量的指針。因此，一定的校準(zhǔn)頻率和室內(nèi)質(zhì)控是質(zhì)量保證的必需手段。我們在實際工作中就遇到酶活力測定的試劑空白數(shù)據(jù)在規(guī)定限值內(nèi)，但質(zhì)控物測定結(jié)果連續(xù)偏低，病人結(jié)果因每天標(biāo)本少而難以判斷，zui后發(fā)現(xiàn)是試劑質(zhì)量下降。
9、延遲時間，延遲時間指試劑與樣品混合后到監(jiān)測開始之間的時間。延遲時間的選擇取決于被測物質(zhì)的濃度(酶的活性)大小、反應(yīng)速度的快慢、酶促反應(yīng)的級數(shù)、樣品中干擾物消除所需的時間等。比如：CHE活性高僅需20— 30秒，LDH一級反應(yīng)需30～40秒，AIJT需40～6O秒，AST需60～75秒，CK需90～120秒。半自動生化儀上酶活性連續(xù)監(jiān)測法的延遲時間設(shè)定，由于只能單份樣品逐一測定，若延遲時問全部設(shè)置在儀器內(nèi)，每個延遲時間加監(jiān)測時間至少1分鐘以上，守候時間較長。工作量大時，可以根據(jù)儀器控溫、加樣及讀數(shù)和試劑特點，以及室溫情況，將延遲時問挪一部分到機(jī)外，套式操作，但要確保機(jī)內(nèi)延遲時間不要進(jìn)入線性反應(yīng)期。兼顧延遲時間和監(jiān)測時間反應(yīng)時間是有限制的。在速率法和兩點法中，延長延遲時間必然縮短線性監(jiān)測期，減少測定的線性范圍，也易發(fā)生底物耗盡。
