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細菌的培養和生長現象的觀察
發布時間：2013-07-29瀏覽次數：1733返回列表
一、實驗目的
1.了解常用培養基的種類。
2.掌握無菌操作，建立無菌觀念。
3.初步掌握細菌接種技術。
4.學會觀察細菌在常用培養基上的生長現象。
二、實驗材料
1.菌種葡萄球菌、大腸埃希菌。
2.培養基普通瓊脂平板、斜面培養基、半固體培養基、液體培養基。
3.器材接種環、接種針、酒精燈、培養箱、試管架等。
三、實驗內容
(一)細菌的接種方法
平板劃線接種法分離培養法)
【實驗原理】
通過在平板上劃線，將混雜的細菌在瓊脂平板表面充分的散開，使單個細菌能固定在一點生長形成單個菌落，以達到分離純種的目的。若需從平板上獲取純種，則挑取一個菌落做純培養。
【操作方法】(分段劃線法)
1.右手拿接種環，燒灼冷卻后，以無菌操作方法蘸取細菌標本少許。
2.左手持瓊脂平板，以左手拇指和食指將平板蓋啟開，右手將取了菌液的接種環伸人平板，將已葫菌的接種環在瓊脂表面密集而不重疊地來回劃線，面積約占整個平板的1/6- 1/5，此為區劃線。
3.將接種環置于火焰上滅菌，冷卻后(可接觸平板試之，如不融化瓊脂，即已冷卻)，開始第二區來回劃線，且在開始劃線時與區的劃線相交數次(2-3次為宜)，以后劃線不再相交。
4.后用同樣方法進行第三區，必要時也可繼續第四區、第五區劃線(圖5-1)
【注意事項】
1.嚴格無菌操作，避免空氣及呼吸道中的細菌落人培養墓內。
2.劃線接種時，角度、力度要掌握好，接種環與瓊脂成30°~40°角輕輕接觸，利用腕力滑動，切忌劃破瓊脂，并充分利用平板的表面積，以達到分離的目的。
