非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀檢測過程中需注意的事項

發布時間：2019-03-06瀏覽次數：1892返回列表

非洲豬瘟是由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起豬的一種急性、熱性、高度接觸性動物傳染病，臨床上以高熱、網狀內皮系統出血和高死亡率為特征，易感豬群的病死率高達。動物衛生組織（OIE）將其列為法定報告動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。而且，非洲豬瘟病毒也是《禁止生物武器公約》清單中列入的核查動物病原體。目前，針對非洲豬瘟防控，尚無有效的商品化疫苗，防控重點是做好生物安全管理和早期診斷撲殺凈化。非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀在整個檢測過程中發揮著重要的作用。
為了確保結果準確性，儀器的使用方法一定要正確。所用到的試劑盒的操作，也是不能馬虎的，下面，我們來看看非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀檢測過程中需注意的事項。
整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器、耗材應使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
每次實驗應該設置陰、陽性對照。
試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
試劑盒內所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。