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反相色譜柱ODS柱使用注意事項
發布時間：2017-07-20瀏覽次數：3389返回列表
ODS柱是一種常用的反相色譜柱，也叫C18柱；由于它是長鏈烷基鍵合相，有較高的碳含量和更好的疏水性，對各種類型的生物大分子有更強的適應能力，因此在生物化學分析工作中應用的為廣泛。反相色譜柱ODS柱使用注意事項如下：
1、使用預柱保護分析柱（硅膠在性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度）；
2、將樣品溶解在流動相或性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫，則需要將樣品溶解在初始流動相或性相近的溶劑中。樣品溶液不應含有任何顆粒物，使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用強溶劑（例如，流動相為水，樣品溶劑為甲醇），為達到較好峰形，需要降低進樣量（以250x4.6mm規格為例，小于10μL）；
3、在進行分析之前，請使用至少20倍柱體積的流動相沖洗色譜柱，以使色譜柱達到平衡；
4、所有硅膠基質色譜柱使用溫度應低于60℃；
5、流動相使用前必須經脫氣和過濾處理；
6、反相色譜柱ODS柱，保存溶劑通常是含至少30% 有機相的水溶液，也可在常規清洗后直接保存在有機相中；
如果需要長時間儲藏，則需要使用較高比例的有機相（有機相比例至少大于50%）；
7、大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2－7.5，盡量不超過該色譜柱的pH范圍；
8、避免流動相組成及性的劇烈變化；
9、所有流動相，特別是含有緩沖鹽的流動相，當日實驗當日配制；如果使用了前日配制的流動相，請確保流動相pH值沒有變化，并確保流動相沒有長菌。 流動相的pH值取決于您的應用和色譜柱填料類型。我們建議在所有的色譜柱盡量在pH2~8范圍內使用。請盡量避免在常規流動相中使用很高比例的水（>95%）作為流動相，可能會造成保留時間的不穩定或者色譜柱鍵合相的損害；
10、如果使用性或離子性的緩沖溶液作流動相，應在實驗完畢柱子沖洗干凈，并保存于甲醇或乙腈中；
11、氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性，故使用時要注意，柱及連接管內不能長時間存留此類溶劑，以避免腐蝕。
12、在條件允許情況下，使用前按照說明書方法進行柱效測試。以確保色譜柱的正常。
13、在儲存反相色譜柱ODS柱之前，請使用至少20倍柱體積的不帶緩沖鹽的流動相沖洗色譜柱（去除緩沖鹽），再用更強的溶劑沖洗色譜柱（去除強保留成分，反相色譜通常使用甲醇或乙腈），然后使用合適的溶劑儲存色譜柱。
