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古朵技術分享：免疫組化和免疫熒光的區別
發布時間：2023-07-13瀏覽次數：869返回列表
古朵技術分享：免疫組化和免疫熒光的區別
免疫組化和免疫熒光都經過免疫原，原理相似，只是顯色劑不同，免疫熒光是免疫組化技術之一。
1、免疫組化是應用免疫學的基本原理，即抗原和抗體特異性結合的原理，通過化學反應確定組織細胞中的抗原，使標記有抗體的顯色試劑顯色，并對其進行定位、定性和相對定量研究。在免疫組化過程中，常用的顯示劑包括熒光素、酶、金屬離子或同位素。
2、免疫熒光是一種不會影響抗原和抗體活性的熒光色素，被標記在抗體或抗原上，然后與其對應的抗原或抗體結合，在熒光顯微鏡下呈現特異性的熒光反應。免疫熒光是免疫組化技術之一，具有特異性強、靈敏度高、速度快的特點。但相對結果判斷的客觀性不足，技術程序復雜。
免疫組化與免疫熒光的真正目的均為明確病理診斷，以便患者獲得治療。
請問你曾經被IHC、ICC和IF所困擾過嗎?
在實驗中，有沒有一種感覺，就是對免疫組化(IHC)，免疫細胞(ICC)，以及免疫熒光(IF)傻傻分不清，那么今天我們就來討論一下這三者的區別，先貼圖上來以便有個大致的區分。
從圖中我們可以看出，免疫檢測技術可以根據報告標簽的不同，分為免疫化學和免疫熒光兩類，而根據樣品類型不同，可以分為組織和細胞檢測技術。因此，才會延伸出三個相近的概念。
為了好的區分這三個概念，我們還可以根據他們的英文詞根來分析一下，他們的英文名分別是免疫組織化學Immunohistochemistry (IHC)，免疫細胞化學Immunocytochemistry
(ICC)，免疫熒光 Immunofluorescence (IF)。
詞根分析：
Immuno-指的是免疫技術(例如，抗體和抗原的結合)
Histo-指的是組織(細胞以及它周圍的細胞外基質)
Cyto-指的是細胞(不包含細胞外的基質)
Chemistry-在這里指的是化學檢測方法(例如，顏色的變化)
Fluorescence-對被激發的熒光團的檢測
通過對詞根的解釋，相信你在心中不再迷茫了吧。
這三個應用技術都屬于免疫技術，都是將抗原與抗體的結合可視化，即通過一定的方法可以直接看到實驗結果。而常用的方法就是化學顯色和熒光顯色。如果報告標簽是酶促的，就是免疫化學，如果是熒光的，就是免疫熒光。
其實我們糾結免疫熒光的一個原因還在于免疫熒光的英文名字Immunofluorescence (IF)，但若是寫成免疫組織熒光(IHF)或是免疫細胞熒光(ICF)，那我們是不是就豁然開朗了。雖然這兩個詞匯在英文文獻中應用的還不是很廣泛，但不是我自己杜撰的哦，已經有些學者在使用了，規范化應該也只是時間的問題。
可能文字描述還是有些晦澀難懂，那我們就直接上圖吧。先不看下面答案，僅從幾張圖片，你能明白哪張圖代表哪種應用嗎?
A免疫組織化學：兔EGFR單克隆抗體(10001-R043-50)—人胎盤
B 免疫細胞化學：兔α微管蛋白單克隆抗體抗—MEF1細胞
C免疫熒光組織：兔Cdk5單克隆抗體—雞腦組織
D免疫熒光細胞：兔JNK2/MAPK9(10745-R004-50)單克隆抗體—人Hela細胞
A圖和B圖是免疫化學(Immunochemistry)，這種應用是抗體檢測目標蛋白，發生了化學反應，然后顯色，根據樣本類型的不同，又可以分為免疫組織化學(A)和免疫細胞化學(B)。
C圖和D圖是免疫熒光(Immunofluorescence)，這種應用根據抗體檢測目標蛋白然后通過偶聯熒光基團來顯色。根據樣本類型的不同可以分為免疫熒光組織(C)和免疫熒光細胞(D)。
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