當前位置：給覽網(wǎng) » 公司 » 上海古朵生物科技有限公司
在線溝通：
公司名稱：上海古朵生物科技有限公司
聯(lián)系人：洛辰
電話：18321664727
手機：13621980056
郵件：2712232205@qq.com
地址：上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號
Elisa方法：四種常見的ELISA方法
發(fā)布時間：2023-06-16瀏覽次數(shù)：853返回列表
四種常見的ELISA方法
1.直接ELISA
將抗原固定于ELISA板上，然后用酶標抗體直檢測抗原。
相較于其它類型的ELISA實驗，直接ELISA實驗步驟少，檢測速度快，不需要用到二抗，避免了交叉反應，測定結果不容易出錯。但是由于直接ELISA的抗原不是特異性固定的，樣本中的靶蛋白及其他雜質蛋白都會與ELISA板結合，實驗背景會比較高。而且直接ELISA每種靶蛋白都需要準備能夠與其特異性結合的一抗，實驗不太靈活。另外由于沒有使用二抗，信號沒有被放大，降低了測定的靈敏度。
2.間接ELISA
先將抗原結合到ELISA板上，隨后分兩步進行檢測：首先加入檢測抗體與抗原特異性結合，隨后加入酶標二抗檢測并利用底物顯色。
與直接ELISA相比，間接ELISA用到酶標二抗，具有高的靈敏度，也需要少的標記抗體，經(jīng)濟。間接ELISA還提供了大的靈活性，因為不同的一抗能夠與單一標記的二抗一同使用。間接ELISA實驗的缺點是存在交叉反應的可能性(酶標二抗直接與抗原結合)，可能會增加背景，同時與直接ELISA相比，間接ELISA實驗多了二抗孵育的步驟，實驗周期延長。
3.夾心ELISA
先將捕獲抗體固定于ELISA板孔中，然后加入樣品，接著加入檢測抗體。如果檢測抗體是酶標抗體，則可稱為直接夾心ELISA;如果檢測抗體不帶有標記，則還需要使用酶標二抗與檢測抗體結合，這種稱為間接夾心ELISA。
夾心ELISA的靈敏度高，它比直接或間接ELISA敏感2-5倍;同時夾心ELISA使用兩種特異性抗體與抗原結合，擁有很高的特異性。另外夾心ELISA能夠通過直接或間接的方式進行檢測，靈活性較高。夾心ELISA的缺點是對配對抗體要求很高，如果沒有標準化的試劑盒或者已經(jīng)通過測試的配對抗體，則需要進行配對抗體定制并進行優(yōu)化，因為降低捕獲抗體與檢測抗體之間的交叉反應是非常重要的。
4.競爭ELISA法
預先將抗原包被在固相載體上，并加入酶標記的特異性抗體。實驗時，加入待檢抗原(或抗體)，如果待檢物是抗原，則待檢抗原與預先包被在固相載體上的抗原競爭結合酶標抗體;如果待檢測物是抗體，則待檢抗體就與系統(tǒng)中原有的酶標抗體競爭結合包被在固相載體上的抗原。通過洗滌洗掉被競爭結合的酶標抗體，后加底物顯色。需要注意的是顯色結果與待檢抗原(或抗體)的量成反比。
ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發(fā)高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。
