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古朵生物：PBS和D-PBS緩沖溶液怎么配制?
發(fā)布時間：2023-02-22瀏覽次數(shù)：908返回列表
古朵生物：PBS和D-PBS緩沖溶液怎么配制?
磷酸鹽緩沖液(簡稱PBS)的是生物化學中常用的一種阻礙溶液pH變化的緩沖溶液，這種由鹽溶液中含有氯化鈉，磷酸鹽，磷酸鹽，氯化鉀和磷酸鉀組成。組份濃度：137 mM 氯化鈉，2.7 mM 氯化鉀，10 mM 磷酸二氫鈉，2 mM 磷酸二氫鉀。本文總結了PBS和D-PBS溶液的配制方法。
1. 常規(guī)PBS磷酸鹽緩沖液
組成成份：
磷酸二氫鉀 34 g
1 mol/L氫氧化鈉溶液 175 ml
蒸餾水 825 ml
PH 7.2
配制：
先將磷酸鹽溶解于500 mL蒸餾水中，用1 mol/L氫氧化鈉溶液校正pH后，再用蒸餾水稀釋至1000 mL。
稀釋液：
取儲存液1.25 mL，用蒸餾水稀釋至1000 mL。分裝每瓶100 mL或每管10 mL，121 ℃高壓滅菌15 min。
用途：主要用于一些化學實驗中不影響實驗反應的情況下調節(jié)pH值，以便讓實驗的化學反應在佳條件下進行。部分用于食品或是飼料行業(yè)加工，如食品或者飼料真菌毒素檢驗中Elisa方法的洗板應用或者食品微生物檢驗中的稀釋緩沖液。
2. PBS Buffer的配制具體步驟
組份濃度：
137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4
配制量：1 L
配制方法：
(1)稱量下列試劑，置于1 L燒杯中。
NaCl 8 g
KCl 0.2 g
Na2HPO4 1.42 g
KH2PO4 0.27 g
(2)向燒杯中加入約800 ml的去離子水，充分攪拌溶解。
(3)滴加濃鹽酸將pH值調節(jié)至7.4，然后加入去離子水將溶液定容至1 L。
(4)高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：
上述PBS Buffer中無二價陽離子，如需要，可在配方中補充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
3. D-PBS是杜氏磷酸緩沖液
全稱為：Dulbecco's Phosphate Buffered Saline
組分 分子量 濃度 (gm/L) 摩爾濃度 (mM)
氯化鉀 (KCl) 75 0.20 2.67
磷酸二氫鉀 (KH2PO4) 136 0.20 1.47
氯化鈉 (NaCl) 58 8.00 138.00
磷酸氫二鈉 (Na2HPO4) 142 1.15 8.10
pH值為7.4。
(1)杜氏磷酸鹽緩沖液(Dulbecco's Phosphate Buffered Saline，D-PBS)也是一種磷酸鹽緩沖液，與常規(guī)PBS的不同之處在于磷酸鹽的含量稍低些，并含有鈣鎂離子。D-PBS主要用于胚胎學方面的研究，多用于胚胎的沖洗液、凍存液和培養(yǎng)液。
(2)D-PBS配方：氯化鈉8 g，氯化鉀0.2 g，磷酸氫二鈉1.15 g，磷酸二氫鉀0.2 g，氯化鈣0.1 g，含6個結晶水的氯化鎂0.1 g溶于1 L ddH2O中。
(3)以上配方為含有鈣鎂離子的D-PBS，如不加氯化鈣和氯化鎂，即為無鈣鎂的D-PBS。
(4)在以上配方的基礎上，還可以加入葡萄糖、丙酮酸鈉等，以利于培養(yǎng)物的生長。
D-PBS是杜氏磷酸緩沖液，也是一種磷酸鹽緩沖液，與常規(guī)磷酸緩沖液大的不同點在于磷酸鹽的含量稍低些，根據(jù)是否含鈣鎂分為兩種即D-PBS w/鈣 & 鎂和D-PBS w/o 鈣
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