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如何快速測定ELISA試劑盒，試劑盒清洗試驗原理有哪些?
發布時間：2023-02-06瀏覽次數：903返回列表
如何快速測定ELISA試劑盒，試劑盒清洗試驗原理有哪些?
如何快速檢測ELISA試劑盒：
ELISA試劑盒由于各種抗原成份，包括小分子的半抗原，ELISA試劑盒均可用以制備特異性的抗血清或單克隆抗體，利用此抗體作為試劑就可檢測標本中相應的抗原，因而免疫測定的使用規模極廣，在臨床查驗中可用于測定：
1) 體液中的各種蛋白質，包括含量很少的蛋白質如甲胎蛋白等。
2) 激素，包括小分子量的甾體激素等。
3) 抗生素和藥物。
4) 病原體抗原，HBsAg、HBeAg等。
5) 另外，也可利用純化的抗原檢測標本中的抗體，例如抗-HBs等。
5.符號的免疫測定
ELISA試劑盒如上所述，免疫測定是一種很敏感的測定辦法，抗原抗體反響后直接測定構成的沉積或濁度，敏感度可達5~10μg/ml，但在臨床查驗中，某些待測物在標本中的含量遠低于這一水平，因而要尋覓增加敏感度的辦法。符號的免疫測定是將檢測試劑中的抗原或抗體用可微量測定的物質加以符號，經過測定符號物來進步敏感度。在放射免疫測定和中，ELISA試劑盒符號物分別為放射性核素和酶，zui后用測定放射性和酶生機來計算待檢物的量，敏感度可比直接測定沉積物進步數百至數千倍。在符號免疫測定中，一般參加過量的符號試劑以確保與待測物*反響。以符號抗體(Ab ※)檢測抗原(Ag)為例，反響式如下：
Ag+ Ab※ →AgAb※+Ab※
在反響產品中有與Ag結合的Ab※和游離和Ab※ ，如不將兩者別離而測定符號物，測得的成果將為兩者之和。因而，游離符號物與結合符號物的別離是符號免疫測定中的重要進程。可采用多種手段，固相載體是其中之一。如將抗原或抗體包被在固相載體上，然后再與符號的抗原或抗體直接反響，結合的符號物被固定在載體上，而游離的符號物留于溶液中。這樣能夠經過洗刷將游離的Ab※除掉，結合符號物的測定可在固相上進行。IgM抗體一般為保護性抗體具有免疫性。因而IgM抗體的測定，對某些流行癥如甲型肝炎有較高的臨床確診價值。
1.3 抗原抗體反響
1.3.1 可逆性
抗原與抗體結合構成抗原抗體復合物的進程是一種動態平衡，其反響式為：
Ag+Ab→Ag·Ab
抗體的親和力(affinity)是抗原抗體間的固有結合力，能夠用平衡常數K表明：
K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab]
ELISA試劑盒高親和力抗體的抗原結合點與抗原的決定簇在空間構型上十分適合，兩者結合結實，不易解離。解離后的抗原或抗體均能堅持原有的結構和活性，ELISA試劑盒因而可用親和層析法來提純抗原或抗體。在抗血清中，特異性的IgG抗體僅占總IgG中的極小部分。用親和層析法提取的特異性抗體，稱為親和層析純抗體，使用于免疫測定中可得到好的效果。試劑盒清洗試驗原理：
古朵生物 ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將生物su標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。
自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
ELISA試劑盒操作注意事項
1. 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7. 底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8. 加入ELISA試劑盒的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。
