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牛血清使用所產生的問題，如何合理熱滅活?
發布時間：2022-11-25瀏覽次數：909返回列表
牛血清使用所產生的問題，如何合理熱滅活?
由于牛血清營養豐富，貯存條件特殊，因此在貯存和使用過程中容易產生以下問題：
1、改變培養液的pH值
牛血清的pH理論值為7.0～8.0，培養基在加入規定量的碳酸氫鈉后(即達到細胞生長所需要的滲透壓)，再加入10%的牛血清，一般會使培養液的pH值發生改變。因此在使用過程中應注意pH的變化，如有必要可用1mol/L NaOH或1mol/L HCl調pH到所需值。
2、由于血清的營養成分豐富，非常適合細菌、真菌和支原體等生長，所以血清很容易受到污染。
3、血清在貯存解凍過程中會產生沉淀，這是由于血清中含有大量脂蛋白、纖維蛋白及多肽類物質，在-15℃冷凍保存解凍后就會自然形成沉淀，隨著保存時間的延長，沉淀量會增加。因此在融化血清時一般應先在4℃放置使之解凍，然后放在室溫使血清完全融化，以避免沉淀的增加。添加血清時應避免把沉淀加入培養液，否則由于沉淀的存在會使得所培養的細胞產生大量黑點，或者細胞表面將會覆蓋一層油狀物質，影響細胞的正常生長。為減少血清的損失，可以把有沉淀的血清收集起來進行離心處理，將上清液加入培養液使用。
如何合理熱滅活
必須要滅活，根據血清廠家多年來總結的經驗，常規解凍后，40℃水浴加熱20分鐘即可，能夠大程度地保留營養成分。
另外，還有三個細節需要注意：
1、將血清用三步法徹底解凍后再進行熱滅活。
2、為盡可能減輕熱滅活對血清品質的影響，一次滅活的血清體積不宜過大。
3、溫度需有對照
好準備同樣的容器裝相等體積的水(初始溫度與血清相同溫度)，滅活時將裝有血清和水的容器同時放入40℃水浴，在裝水的容器中放置溫度計，加熱過程中不時地輕輕旋轉混勻血清，當溫度計顯示達到40℃左右，開始計時。
胎牛血清注意事項：
水面沒過血清液面且管底不接觸水浴鍋底面。
溫度計需時不時晃動，且不接觸管壁。
初始溫度應相同。
兩容器材質相同。
液體體積相同。
裝水容器口用封口膜或保鮮膜封住，只露出溫度計即可。
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