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古朵帶您了解凝膠遷移實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題?
發(fā)布時(shí)間：2022-08-19瀏覽次數(shù)：954返回列表
標(biāo)簽：凝膠遷移實(shí)驗(yàn) 古朵生物 凝膠電泳
古朵帶您了解凝膠遷移實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題?
凝膠遷移實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題
1、為什么看不到遷移帶?
1)蛋白樣本提取質(zhì)量不高，蛋白降解或者提取量不足。
2)樣本中沒(méi)有可以與探針結(jié)合的蛋白。
3)探針與蛋白無(wú)特異性的相互作用。
4)轉(zhuǎn)膜效率低，蛋白或者探針未轉(zhuǎn)移到膜上。
5)曝光或者成像時(shí)間過(guò)短。
在Super-Shift EMSA測(cè)定中看不到Super-Shift DNA/蛋白復(fù)合物帶還可能有以下原因：
6)抗體沒(méi)有工作。不是所有的抗體都可以用于Super-Shift EMSA，只有對(duì)非變性蛋白的表面抗原決定簇起反應(yīng)的抗體才能夠用于Super-Shift EMSA。
7)測(cè)定的活化的DNA/蛋白復(fù)合物中沒(méi)有希望檢測(cè)的構(gòu)成成分存在。此時(shí)既看不到Super-Shift的帶，也看不到DNA/蛋白復(fù)合物的量的減少
8)使用的抗體過(guò)度稀釋。一般10-20ul的反應(yīng)液需要使用0.5-1ul原倍的抗體。
9)多抗與DNA/蛋白復(fù)合物形成大的聚集物而不進(jìn)膠。在這種情況下，雖然看不到Super-Shift的帶，但應(yīng)當(dāng)可以看到DAN/蛋白復(fù)合物的電泳帶明顯減少。
古朵帶您了解凝膠遷移實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題?上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹(shù)立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量”的方針。
