藍色瓊脂糖凝膠6FF實驗操作步驟

發布時間：2022-03-25瀏覽次數：1131返回列表

藍色瓊脂糖凝膠6FF簡介：

藍色瓊脂糖凝膠6FF是將藍色染料偶聯到高度偶聯的瓊脂糖凝膠上，具有很化學性質穩定，機械強度高，流速快的特點；主要是通過配基提供電子對作用與疏水作用的綜合作用與目標蛋白結合，一種應用很廣泛的親和色譜材料，適用于白蛋白、干擾素、α-2巨球蛋白、凝血因子以及各種需要NAD+和NADP+的酶的工業化純化使用。

上海遠慕生物詳細介紹藍色瓊脂糖凝膠6FF實驗操作步驟，適用范圍，用途等說明！

中文名：藍色瓊脂糖凝膠6FF
英文名：Blue Sepharose 6FF
供應商：上海遠慕
規格：25ml,100ml
基質：6% 交聯瓊脂糖凝膠
配基：藍色染料
配基密度：10μmol/mL
顆粒大小：45-165μm
大流速：300cm/h
工作PH：3-10
清洗PH：2-13
操作溫度：室溫
保存條件：保存于20%的乙醇于+4-8°C

存儲條件：常溫，陰涼
用途：生化研究。純化各種需要NAD、NADP作為輔酶的的酶類、白蛋白、凝血因子、干擾素等。
保存溫度：2～8℃
性狀：藍色液體，底部為膠體

藍色瓊脂糖凝膠6FF適用范圍：
藍色瓊脂糖凝膠適用可適用于白蛋白、干擾素、α2巨球蛋白、凝血因子及各種需要NAD和NADP的酶的分離純化。

藍色瓊脂糖凝膠6FF實驗操作步驟：
1.藍色瓊脂糖凝膠6FF裝柱，1.6×20cm，柱床體積為15ml；
2.用緩沖液1平衡5-10個床體積，流速為4ml/min；
3.含牛血清白蛋白的樣品離心，用緩沖液1進行1:1稀釋，0.45μm濾膜過濾，上樣。流速為2ml/min；
4.用緩沖液1再洗5-10個床體積，流速為2ml/min；
5.用緩沖液2洗脫，流速為2ml/min，收集洗脫峰；
6.用純水流洗5個柱床體積，再用20%的乙醇流洗5個柱床體積，流速為4ml/min，柱子置于4~8℃環境中保存；
7.將分離純化的BSA進行SDS-PAGE電泳分析。緩沖液組成：緩沖液1：50mMKH2 PO4 ，pH7.0。緩沖液2：50mMKH2 PO4 ，1.5MKCl，pH7.0。

藍色瓊脂糖凝膠6FF實驗操作步驟注意事項：
1.該凝膠從冷室或冰箱中取出后好在室溫下緩慢振搖恢復到室溫，然后再裝柱，以免產生氣泡影響柱效。
2.次使用得先用20%的乙醇洗5個柱床體積，然后再用2MNaCl洗5個柱床體積，洗去殘留的染料，再平衡使用。
3.上樣樣品必須與緩沖液1的pH、電導相同。
4.藍色瓊脂糖凝膠FF親和填料的再生處理方法：用0.5MNaOH含2MNaCl流洗3個床體積，后用20%乙醇洗3個床體積即可。
5.該親和填料保存條件為20%乙醇，4~8℃。

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