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霉菌平板計數法的樣品稀釋流程
發布時間：2021-07-16瀏覽次數：1265返回列表
霉菌平板計數法的樣品稀釋分為固體，半固體，液體樣品三種狀態，稀釋流程如下：
1.固體和半固體樣品：稱取25g樣品，加入225ml無菌稀釋液(蒸餾水或生理鹽水或磷酸鹽緩沖液)，充分振搖，或用拍擊式均質器拍打1min~2min，制成1∶10的樣品勻液。
2.液體樣品：以無菌吸管吸取25mL樣品至盛有225mL無菌稀釋液(蒸餾水或生理鹽水或磷酸鹽緩沖液)的適宜容器內(可在瓶內預置適當數量的無菌玻璃珠)或無菌均質袋中，充分振搖或用拍擊式均質器拍打lmin~2min，制成1∶10的樣品勻液。
3.取1mL，1∶10樣品勻液注入含有9mL無菌稀釋液的試管中，另換一支1mI無菌吸管反復吹吸，或在旋渦混合器上混勻，此液為1∶100的樣品勻液。
4.按3操作，制備10倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1支lmL無菌吸管。
5.根據對樣品污染狀況的估計，選擇2個~3個適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)，在進行10倍遞增稀釋的同時，每個稀釋度分別吸取1mL樣品勻液于2個無菌平皿內。同時分別取lmL無菌稀釋液加入2個無菌平皿作空白對照。
6.及時將20mL~25mL冷卻至46℃的馬鈴薯葡萄糖瓊脂或孟加拉紅瓊脂(可放置于46℃±1℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿，并轉動平皿使其混合均勻。置水平臺面待培養基完全凝固。
稀釋以后，開始培養瓊脂凝固后，正置平板，置28℃±1℃培養箱中培養，觀察并記錄培養至第5d的結果
