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瓷珠菌種保存法了解一下！@古朵生物
發布時間：2020-12-22瀏覽次數：1263返回列表
傳統的菌種保存方式簡介
斜面保存法：微生物保存zui基本的方法，可廣泛用于細菌、真菌等，保存期限非常短，斜面容易干裂。
液體石蠟保存法：可用于保存霉菌、酵母菌、放線菌及需氧菌，方法簡便，可防止斜面干燥和氧氣進入，但一些固氮菌、分枝桿菌、毛霉、厭氧菌等不適宜用此法。
甘油冷凍保存法：用于一般細菌的保存，需使甘油終濃度為20%左右，然后-20℃或-70℃以下保存。融化時需要水浴溶化。
真空冷凍保存法：具有低溫、干燥、無氧的保存條件，適用于98%以上菌種的保存，但操作復雜，一般實驗室難以使用。
液氮保存法：基本所有微生物均可保存，并且保存時間長，但操作較為復雜而且需要設備，不適用于一般實驗室保存菌種。
沙土保存法
半固體保存法
瓷珠菌種保存法的原理
瓷珠菌種保存管是實驗室保存菌種的容器，管內有表面凹孔小瓷珠用于細菌的吸附和保存，放置于-20℃或-80℃下便可創造干燥、低溫、缺營養的環境，使菌株處于“休眠” 狀態，方可長期保存（視不同菌種與保存溫度，一般可保存3-10 年）, 同時菌種保存管的取用和保存較為便利（取用復蘇及保存菌種僅需1分鐘）。
用途：菌種保存、復蘇和運輸。
優點：操作簡單方便、菌種保存快速、包裝物體積小、菌種保存時間長。
操作簡單方便：挑取細菌新鮮純培養物，接入菌種保存管。
菌種保存快速：混勻后，吸出冷凍保存液。
包裝物體積小：1.8ml冷凍管。
菌種保存時間長：2-8℃可保存6個月；-20℃可保存12個月；-80℃可保存24個月。
瓷珠菌種保存管的使用方法
1.從培養18h以上的平板上刮去新鮮純培養物于菌種保存管中，配成大約3-4麥氏比濁度的菌懸液。
2.擰緊保存管，來回顛倒幾次使細菌乳化，不能旋搖。
3.用無菌移液器將菌種保存管內的液體吸取干凈，妥善放置被吸出的液體。
4.擰緊保存管，迅速將其置于-20℃或-70℃冰箱中。
使用時的注意事項
被保存的菌種要求是經過純化后培養 18-24h 內的新鮮菌種（細菌18-24h，酵母菌需3 天，形成孢子的微生物保存孢子，而放線菌和絲狀真菌需培養7 天后保存），不宜使用老化或未經鑒定的菌種。
菌種保存濃度必須要做3-4 麥氏比濁度，如接種濃度過低將會降低復蘇效果。
待保存于菌種保存管中的菌種完全乳化均勻吸附在多孔小瓷珠后，要將多余的菌種保存液吸取出來并棄之，否則在復蘇時的凍融過程中會損傷菌株活性。
做厭氧菌保存時，應提供厭氧的環境，如厭氧箱、厭氧袋，菌種保存管中可通入氮氣來驅除保存菌種時所引入的氧氣。菌種復蘇時，也要創造厭氧的環境。
菌種復蘇完成后，對使用菌株需要進行再次純化，以保證菌株的單一性
