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為什么要用瓊脂糖凝膠做電泳載體？
發布時間：2020-09-11瀏覽次數：1443返回列表
常用的電泳實驗載體：
1、醋酸纖維素薄膜電泳 ：醋酸纖維素薄膜電泳是以醋酸纖維素薄膜為支持物，它是纖維素的醋酸酯，由纖維素的羥基經乙酰化而制成。
2、 瓊脂糖凝膠電泳 ：瓊脂糖凝膠電泳是一種以瓊脂糖凝膠為支持物的凝膠電泳。
3、聚丙烯-酰胺凝膠電泳 ：聚丙烯-酰胺凝膠是由單體丙烯-酰胺和交聯劑又稱為共聚體的N,N’-甲叉雙丙烯-酰胺（簡稱Bis）在加速劑和催化劑的作用下聚合交聯成三維網狀結構的凝膠，以此凝膠為支持物的電泳稱為聚丙烯-酰胺凝膠電泳(簡稱PAGE)。
4、等電聚焦電泳 ：等電聚焦電泳是利用具有pH梯度的電泳介質來分離等電點(pI)不同的蛋白質的電泳技術。
瓊脂糖凝膠電泳其分析原理與其它支持物電泳的zui主要區別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網絡結構，直接參與帶電顆粒的分離過程，在電泳中，物質分子通過空隙時會受到阻力，大分子物質在泳動時受到的阻力比小分子大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅依賴于凈電荷的性質和數量，而且還取決于分子大小，這就大大地提高了分辨能力。瓊脂糖系天然的瓊脂加工制得，天然瓊脂是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（約占80%）及瓊脂膠組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷。而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象。所以常用于血清蛋白、血紅蛋白、脂蛋白、糖蛋白、乳酸脫氫酶、堿性磷酸酶等同工酶的分離和鑒定，為臨床某些疾病的鑒別診斷提供了可靠的依據。與免疫化學反應相結合發展成為免疫電泳技術，用于分離和檢測抗原。可對目前常用的瓊脂糖進行某些修飾，如引入化學基團羥乙基，則可使瓊脂糖在65℃左右便能熔化，被稱為低熔點瓊脂糖。該溫度低于DNA的熔點，而且凝膠強度又無明顯改變。以此為支持物進行電泳，稱為低熔點瓊脂糖凝膠電泳，主要應用于DNA研究。如DNA鑒定，DNA限制性內切酶圖譜制作等，為DNA分子及其片段分子量測定和DNA分子構象的分析提供了重要手段。
總結瓊脂糖凝膠電泳的優點如下：
1. 瓊脂糖凝膠電泳操作簡單，電泳速度快，樣品不需事先處理就可以進行電泳。
2. 瓊脂糖凝膠結構均勻，含水量大(約占98%~99%)，近似自由電泳，樣品擴散較自由電流，對樣品吸附極微，因此電泳圖譜清晰，分辨率高，重復性好。
3. 瓊脂糖透明無紫外吸收，電泳過程和結果可直接用紫外光燈檢測及定量測定。
4. 電泳后區帶易染色，樣品極易洗脫，便于定量測定。制成干膜可長期保
