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您的ELISA試劑盒比色結(jié)果的表達方法對了嗎?
發(fā)布時間：2019-09-02瀏覽次數(shù)：1752返回列表
比色效果的表達以往通用光密度（oplical density，OD），現(xiàn)按規(guī)則用吸光度（absorbence，A），兩者含義相同。通常的標明方法是，將吸收波長寫于A字母的右下角，如OPD的吸收波長為492nm，標明方法為"A492nm"或"OD492nm"。
酶標比色儀簡稱酶標儀，通常指專用于測讀ELISA試劑盒效果吸光度的光度計。關(guān)于固相載體方法的不相同，各有特制的適用于板、珠和小試管的規(guī)劃。許多試劑公司配套供應(yīng)酶標儀。酶標儀的主要功用目標有：測讀速度、讀數(shù)的性、重復(fù)性、度和可測規(guī)劃、線性等等。優(yōu)異的酶標儀的讀數(shù)通常可到0.001，性為±1%，重復(fù)性達0.5%。舉例說，若某孔測得的A值為1.083，則該孔相關(guān)于空氣的真實A值應(yīng)為1.083±0.01（1.073~1.093），重復(fù)測定數(shù)次，其A值均應(yīng)1.083±0.05（1.078~1.088）在之間。酶標儀的可測規(guī)劃視各酶標儀的功用而不相同。通常的酶標儀在0.000~2.000，新類型的酶標儀上限拓寬達2.900，甚至更高。超出可測上限的A值常以"*"或"over"或其它符號標明。應(yīng)留心可測規(guī)劃與線性規(guī)劃的不相同，線性規(guī)劃常小于可測規(guī)劃，比如某一酶標儀的可測規(guī)劃為0.000~2.900，而其線性規(guī)劃僅0.000~2.000，這在定量ELISA中制造標準曲線時應(yīng)予留心。
酶標儀不該安排在陽光或強光照射下，操作時室溫宜在15~30℃，運用前先預(yù)熱儀器15-30分鐘，測讀效果更安穩(wěn)。
ELISA試劑盒測讀A值時，要選用商品的活絡(luò)吸收峰，如OPD用492nm波長。有的酶標儀可用雙波長式測讀，即每孔先后測讀兩次，在zui適波長（W1），第2次在不活絡(luò)波長（W2），兩次測定間不移動ELISA試劑盒板的方位。例如OPD用492nm為W1，630nm為W2，畢竟測得的A值為兩者之差（W1-W2）。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等形成的光煩擾。
肉眼判斷結(jié)果時，顯色淺不易觀察，影響結(jié)果的準確性，必須使用酶標儀檢測，以保結(jié)果一致性。
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