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ELISA實驗中樣本的收集和運輸
發布時間：2018-12-10瀏覽次數：965返回列表
酶聯免疫吸附實驗（ELISA）可以用于：（1）檢測大分子抗原和特異性抗體等；（2）具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優點。
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
ELISA的樣本收集與運輸：
利用ELISA進行檢驗常見的樣本一般包括血液（指血，靜脈血），尿，糞便，腦脊液，胸腹水，前列腺液，**，**分泌物等，這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。
ELISA實驗中的血清需采用血管收集血液，室溫血液自然凝固30分鐘，1000xg離心15分鐘左右，收集上清，分裝后，標好號，-20°C或-80°C保存。運輸是用干冰。（注：一個樣本檢測一個指標至少需要40ul血清，您是一個樣本檢測4個指標，至少需要160ul血清，多準備一些。）
光鏡：肝臟組織4%多聚甲醛固定后密封，4度或者常溫保存即可，運輸時用冰袋。
電鏡：一定要是新鮮的組織加到新鮮配置的2.5%戊二醛中固定后，4度保存，電鏡所需的組織塊不需要太大，米粒大小即可，運輸時用冰袋即可。
免疫組化：取適當的組織放于4%的多聚甲醛中固定，密封，避光，四度或常溫保存，運輸時加冰袋即可。
RT-PCR和WB：取下肝臟組織，置于-80或者液氮中保存，運輸時用泡沫保溫盒加干冰。
注意事項:
血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假陽性反應。如在冰箱中保存過久，其中的可發生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。凍結血清融解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作，也可加入適當防腐劑。
按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。
