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ELISA測定試劑盒試驗如何稀釋血清？
發布時間：2017-08-15瀏覽次數：1759返回列表
導讀：ELISA測定試劑盒是酶聯接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技能之后發展起來的一種免疫酶技能。此項技能自70年代初面世以來，發展十分迅速，現在已被廣泛用于生物學和醫學科學的很多范疇。每一盒ELISA測定試劑盒里邊都有一份對應的闡明書，而每一份闡明書里都會有寫樣本和稀釋液的稀釋份額，為何樣本都需求稀釋呢?
ELISA測定試劑盒試驗血清為何要稀釋？有兩個原因：
1，競賽按捺對比顯著，應稀釋競賽物；
2，以下降非特異性反響，使特異性的抗原抗體反響充分體現出來。
血清稀釋用通常的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，當然假如你嫌費事我覺得用生理鹽水代替PBS聯系也不大。不論你是用直接競賽還是直接競賽，血清的稀釋倍數必定要事前確定，但也不必一點點，你做一個預試驗即可，挑選OD在1.0左右的稀釋倍數，即你的ELISA中陰性孔OD在1.0，這么作出來的曲線對比靈敏。
ELISA測定試劑盒試驗稀釋血清的步驟：
先把蛋白稀釋必定的倍數，比如說10倍、20倍稀釋（這么能夠大體確定一個參數），將抗原進行一系列稀釋包被微量反響板，再用必定稀釋度的陽性參閱血清和陰性參閱血清進行孵育后洗刷，再加酶聯系物進行反響，經孵育洗刷后，加底物溶液顯色，停止反響后別離測定O.D值，挑選O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為適包被濃度。通常老是要挑選那個O.D值稍大于1.0，而不挑選小于1.0的抗原濃度。陰性參閱血清O.D值請求<0.1-0.2。也就是請求陽性參閱血清和陰性參閱血清的O.D值有顯著差別。
ELISA測定試劑盒是以免疫學反響為基礎，將抗原、牽9體的特異性反響與酶對底物的催化作用相聯系起來的一種敏感性很高的實驗技能。因為抗原、抗體的反響在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每參加一種試劑孵育后，可經過洗刷除掉剩余的游離反響物，然后保證實驗成果的特異性與穩定性。在實踐使用中，經過不一樣的規劃，詳細的方法步驟可有多種。
