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講解薄層色譜掃描儀的正確使用方法
發(fā)布時(shí)間:2018-09-03瀏覽次數(shù):2854返回列表
薄層色譜掃描儀用于薄層色譜板或電泳板的光密度掃描。薄層定量工作zui初是通過(guò)目視法或測(cè)面積法,對(duì)薄層上分離的斑點(diǎn)與標(biāo)準(zhǔn)品行含量估計(jì),但由于方法粗糙,可引起很大誤差。后來(lái)將斑點(diǎn)定量收集后,結(jié)合比色法或紫外分光光度法等行定量,雖然準(zhǔn)確度有所提,但操作復(fù)雜,工作效率低。因此多年來(lái)薄層色譜法只能停留在分離鑒定和半定量的水平。70 年代后各學(xué)者結(jié)合薄層色譜法的點(diǎn)相繼設(shè)計(jì)出各種型號(hào)的薄層色譜儀,使薄層定量工作入了儀器化、自動(dòng)化的階段,從而使薄層色譜法成為微量、快速定量分析的有力手段。以下內(nèi)容講解薄層色譜掃描儀的正確使用方法。
、薄層板制備除另有規(guī)定外,將1份固定相和3份水在研缽中向方向研磨混合,去除表面的氣泡后,倒入涂布器中,在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器行涂布 (厚度為0.2~0.3mm),取下涂好薄層的玻板,置水平臺(tái)上于室溫下晾干,后在110℃烘30分鐘,即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度 (可通過(guò)透射光和反射光檢視)。
二、點(diǎn)樣除另有規(guī)定外,用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上,般為圓點(diǎn),點(diǎn)樣基線距底邊2.0cm,樣點(diǎn)直徑及點(diǎn)間距離同紙色譜法,點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。
三、展開(kāi)展開(kāi)缸如需預(yù)用展開(kāi)劑飽和,可在缸中加入足夠量的展開(kāi)劑,并在壁上貼二條與缸樣、寬的濾紙條,端浸入展開(kāi)劑中,密封缸的蓋,使系統(tǒng) 平衡或按正文規(guī)定操作。將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)缸的展開(kāi)劑中,浸入展開(kāi)劑的深度為距薄層板底邊0.5~1.0cm(切勿將樣點(diǎn)浸入展開(kāi)劑中),密封缸 蓋,待展開(kāi)至規(guī)定距離(般為10~15cm),取出薄層板,晾干,按各品種項(xiàng)下的規(guī)定檢測(cè)。
四、如需用薄層掃描儀對(duì)色譜斑點(diǎn)作掃描檢出,或直接在薄層上對(duì)色譜斑點(diǎn)作掃描定量,則可用薄層掃描法。








