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薄層色譜掃描儀的操作方法
發(fā)布時(shí)間：2017-09-12瀏覽次數(shù)：4586返回列表
薄層色譜掃描儀應(yīng)用范圍非常廣泛，薄層色譜（TLC）是色譜技術(shù)的種：將固定相涂布于玻璃板上或鋁板上，成均勻薄層，樣品中各組分隨流動相在薄層中定向移動，不同組分和固定性/流動相的作用力不同而實(shí)現(xiàn)了分離。薄層色譜(TLC)是種非常有用的跟蹤反應(yīng)的手段，還可以用于柱色譜分離中合適溶劑的選擇。薄層色譜常用的固定相有氧化鋁或硅膠，它們是性很大(標(biāo)準(zhǔn))或者是非性的(反相)。流動相則是種性待選的溶劑。在5.301中以及大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)中，都將使用標(biāo)準(zhǔn)硅膠板。將溶液中的反應(yīng)混合物點(diǎn)在薄板上，然后利用毛細(xì)作用使溶劑(或混合溶劑)沿板向上移動行展開。下面，我們來介紹下本儀器的操作方法，給大家做個(gè)參考。
薄層色譜掃描儀的操作方法如下：
、向方向研磨混合,去除表面的氣泡后，倒入涂布器中,在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器行涂布（厚度為0.2～0.3mm），取下涂好薄層的玻板，置水平臺上于室溫下晾干，后在110℃烘30分鐘，即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度（可通過透射光和反射光檢視）。
二、點(diǎn)樣。除另有規(guī)定外，用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上，般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊2.0cm，樣點(diǎn)直徑及點(diǎn)間距離同紙色譜法,點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。
三、展開。展開室如需預(yù)用展開劑飽和，可在室中加入足夠量的展開劑，并在壁上貼二條與室樣、寬的濾紙條，端浸入展開劑中，密封室的蓋，使系統(tǒng)平衡或按正文規(guī)定操作。 將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中,浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5～1.0cm（切勿將樣點(diǎn)浸入展開劑中）,密封室蓋,待展開至規(guī)定距離(般為10～15cm),取出薄層板，晾干，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定檢測。
四、如需用薄層色譜掃描儀對色譜斑點(diǎn)作掃描檢出，或直接在薄層上對色譜斑點(diǎn)作掃描定量，則可用薄層掃描法。 薄層掃描的方法，除另有規(guī)定外，可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)點(diǎn)及使用說明，結(jié)合具體情況，選擇吸收法或熒光法，用雙波長或單波長掃描。由于影響薄層掃描結(jié)果的因素很多，故應(yīng)在保證供試品的斑點(diǎn)在定濃度范圍內(nèi)呈線性的情況下，將供試品與對照品在同塊薄層上展開后掃描，行并計(jì)算定量，以減少誤差。各種供試品，只有得到分離度和重現(xiàn)性好的薄層色譜，才能獲得滿意的結(jié)果。
