HR8786-200T ROS活性氧檢測試劑盒(cellRox Green)

本產品中的CellROX Green本身熒光較弱,可自由透過活細胞膜進入細胞內,并被細胞內的ROS氧化,氧化產物可摻入染色體DNA中,熒光強度增大,產生明亮的綠色熒光。根據活細胞中綠色熒光的產生,可以判斷細胞ROS含量的多少和變化。...
產品特點:
● 使用方便:可用激光共聚焦顯微鏡直接觀察、熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測;
● 背景低,靈敏度高;
● 線性范圍寬,使用方便。
檢測方法:
● 流式細胞儀 ● 熒光顯微鏡 ● 激光共聚焦 ● 熒光酶標儀 ● 熒光光度計
樣本類型:
● 懸浮細胞 ● 貼壁細胞
使用方法:
CellROX Green探針配制:
根據需要用量,用新鮮無酚紅無血清培養基或HBSS稀釋CellROX Green探針后充分混勻,避光保存備用。
2、探針使用終濃度200-1000倍稀釋。一般預實驗起始濃度按500倍即可。
【注】:
● 不能用含有血清的培養基稀釋探針。
● 也可以用HBSS緩沖液或PBS稀釋探針。
● 如果熒光太強,超過儀器的檢測范圍,可以按照1:1000-5000稀釋探針。
CellROX Green探針標記:
1、CellROX Green溶液可在新鮮無血清培養基、HBSS緩沖液或組織灌流液中稀釋到所需濃度,終濃度200-1000倍稀釋,以此染色液更換細胞培養基或灌流液;也可直接向無血清細胞孵育液體或灌流液中加入CellROX Green探針溶液至所需濃度。
【注】:
● 檢測貼壁細胞時,熒光顯微鏡檢測可以原位染色也可以消化下來后染色,流式檢測消化下來后染色。
2、依據細胞ROS含量的不同,CellROX Green終濃度可選擇在200-1000倍稀釋的范圍,孵育時間可選擇30分鐘-4小時,在37℃或室溫進行避光孵育。
【注】:
● 如果熒光太強,超過儀器的檢測范圍,可以按照1:1000-5000稀釋探針。
3、孵育結束后,用PBS等新鮮緩沖液清洗細胞或組織。漂洗時間要短。
【注】:
● 也可以用HBSS/PBS洗滌細胞。
熒光顯微鏡觀察:
1、對貼壁生長細胞或活組織,可直接在熒光顯微鏡下觀察;對懸浮生長細胞,取25-50μL細胞懸液滴到一張顯微載玻片上,再蓋上一張蓋玻片。
2、熒光顯微鏡下觀察。
流式細胞儀分析:
1、染色并洗滌細胞后用0.5~1 mL冷PBS重懸細胞(5~10萬)。
2、采用488nm波長激發,發射波長520 nm,測定待測細胞平均熒光強度。
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