HR8208-50T 外泌體提取試劑盒(乳汁/唾液)
- 產品/服務：HR8208-50T 外泌體提取試劑盒(乳汁/唾液)
- 型 號：HR8208-50T
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-31
- 有效期至：長期有效
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總外泌體提取試劑盒（乳汁/唾液用）適用于從各種乳汁/唾液樣品中提取總外泌體。不需要超速離心，僅需通過簡單的常規離心即可從樣本中獲取大量結構完整的外泌體，具有快速簡單，提取效率高的特點，可節省更多的實驗時間和樣本。提取的外泌體可根據實驗目的用于后續的多種實驗，應用范圍廣泛。...
產品特點：
● 使用方便，無需超速離心，省時省力；
● 純度高，富集量大，應用范圍廣；
● 獲取的Exosome 結構和功能完整；
● 穩定性好，便于運輸，便于保存。
試劑盒以外自備試劑和儀器：
● 離心機 ● 移液器
使用注意事項：
● 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑。
● 以下以2mL乳汁/唾液為例，實際操作時按乳汁/唾液樣本和提取液用量體積比等比例調整使用即可。
● 不同乳汁/唾液樣本外泌體數量差異極大，請根據實際情況選擇乳汁/唾液樣本的量，根據下游應用和參考文獻確定。條件允許的情況下采用盡可能多的乳汁/唾液樣本。
● 常規的乳汁/唾液樣本最佳上樣量為5-10mL及以上，條件允許的情況下采用盡可能多的乳汁/唾液樣本。
● 已經分離好的外泌體樣本如果需要進行電鏡觀察，只能冰上或4℃保存，存放時間不超過兩天，注意不可冷凍保存，否則可能會影響電鏡觀察效果。
使用方法：
1、收集2mL待提取的乳汁/唾液樣品，置2-8℃保存。
【注】：
● 凍存樣品解凍后置2-8℃保存。
2、將樣品在4℃條件下，3000×g離心15分鐘。棄沉淀，收集上清。
3、小心將上清移入另一干凈離心管中。
4、將樣品在4℃條件下，10000×g離心20分鐘。棄沉淀，收集上清。
5、小心將上清移入另一干凈離心管中。
6、在2mL乳汁/唾液樣品中加入2mL提取液A，蓋緊離心管蓋，上下顛倒混勻1分鐘左右，使液體充分混勻。
7、在4mL液體樣品中加入1mL提取液B，蓋緊離心管蓋，上下顛倒混勻1分鐘左右，使液體充分混勻。
【注】：
● 試劑B使用前請充分混勻。
8、置2-8℃冰箱靜置過夜。
【注】：
● 靜置保存時間不少于10小時。
9、在4℃條件下，10000×g離心60分鐘。
10、小心移除上清，收集沉淀。
【注】：
● 盡可能吸干上清。
● 吸取時小心，防止吸掉沉淀。
11、取50-100μL外泌體保存液將沉淀重懸，即得到外泌體樣品。
【注】：
● 可以不用試劑盒中的外泌體保存液試劑C，根據下游實驗需要用自己的其它緩沖液重懸保存外泌體。
● 也可直接用于蛋白提取。
12、將外泌體樣本-80℃保存或直接用于下游應用。
【注】：
● 外泌體短期保存置于2-8℃保存即可，一周以上長期不用時置-80℃保存。
● 保存前可以用0.22μm過濾除菌。
常見問題分析：
● 如何鑒定提取的外泌體？
通常使用透射電鏡檢測（形態）、粒徑檢測（大小）、外泌體標志蛋白Western blot檢測等方法鑒定提取的外泌體。
● 外泌體WB標志蛋白用什么？
在進行WB檢測時，通常檢測外泌體標志蛋白為CD63、CD9、CD81、TSG101、ALIX、HSP70 等。
● 進行外泌體WB鑒定時有什么內參蛋白可供選擇？
沒有，該檢測屬于定性檢測。
● 蛋白濃度低？
很多細胞外泌體量不夠下游應用，在條件允許的情況請盡可能加大培養上清的上樣量。
處理部分樣本時可能沒有裂解完全，導致蛋白濃度低。請選擇高質量的蛋白裂解液或蛋白提取試劑盒。
● 抽提得到的RNA 濃度低？
很多細胞外泌體量不夠下游應用，在條件允許的情況請盡可能加大培養上清的上樣量。
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