SV1501 肽 N-糖苷酶 F

產品簡介
肽 N-糖苷酶 F由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持,本品用于科學研究,我公司專注于分子生物學試劑產品的研發、生產和供應,為您提供的肽 N-糖苷酶 F質量可靠,批間差小,且價格公道,熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示:包括肽 N-糖苷酶 F在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:肽 N-糖苷酶 F
英文名稱:Peptide N-glycosidase F
產品貨號:SV1501
產品規格:75KU|15KU
特性:
去除糖蛋白的 N-連接糖
概述:
肽 N-糖苷酶 F,即 PNGase F,是一種酰氨酶,可以在 N-連接糖蛋白的高甘露糖、雜合和復合寡糖部分zuì內側的 N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨殘基之間進行切割。PNGase F 還以不含甘油的形式提供,便于在 HPLC 方法中取得zuì佳效果。
來源:
從腦膜敗血性黃桿菌(Flavobacterium meningosepticum)中提取純化。
反應條件:
將糖蛋白于 1X 糖蛋白變性緩沖液(含 0.5% SDS,40mM DTT)中 100℃ 煮沸 10 分鐘使其變性,再在加入1% NP-40 的 1X GlycoBuffer 2 反應緩沖液中,37℃ 溫育進行反應。熱失活:75℃ 10 分鐘。
隨酶提供的試劑:
10X 糖蛋白變性緩沖液
10X GlycoBuffer 2 緩沖液
10% NP-40
分子量:
36,000 daltons。
質量保證:
無糖苷外切酶污染,無糖苷內切酶 F1、F2和 F3 活性,無蛋白水解活性。
單位定義:
1 單位指 10 μl 的反應體系中,37℃ 條件下 1 小時 從 10 μg 變性 RNase B 中除去超過 95%的碳水化合物所需要的酶量(65 我公司units = 1 IUB milliunit)。
濃度:
500,000 units/ml。
注意事項:
已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制,所以在反應混合物中必須加入 NP-40。
要使天然糖蛋白去糖基化,建議增加酶量并延長溫育時間。
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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
| WE0217 | 無RNA酶水 | 100ml |
| SV0829 | BalbBuffer 3.1 (10X) | 5ml|1.25ml |
| SV0893 |
o | 500次(50μl體系)|100次(50μl體系) |
| SV0899 |
o | 500次(50μl體系)|100次(50μl體系) |
| SV0906 | 血源擴增 Hemo KlenTaq | 1000次(25μl體系)|200次(25μl體系) |
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名稱:紅細胞裂解液
貨號:WE0218
規格:100ml
本產品是利用細胞內外鹽離子濃度差可導致細胞膜脹破的原理來裂解紅細胞,主要用于實驗中紅細胞的去除,比如:淋巴細胞的分離純化,經酶消化分散的組織細胞的分離純化,以及組織細胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。
使用方法:
1、向1倍體積的新鮮全血中加入3倍體積的紅細胞裂解液(如1ml新鮮全血加入3ml紅細胞裂解液)輕輕渦旋或顛倒混勻。
注意:如果對新鮮組織細胞進行處理,需經胰酶等消化成單個細胞懸液,離心收集細胞后再進行后續操作。
2、冰上孵育15分鐘,其間輕輕渦旋混勻兩次。
注意:紅細胞裂解后,溶液應該是清亮透明的。
3、4℃,450×g離心10分鐘收集白細胞,小心吸棄上清液。
4、向以上沉淀中加入兩倍體積的紅細胞裂解液,輕輕渦旋充分重懸白細胞(如起始血液為1ml,則加入2ml的紅細胞裂解液)。
5、4℃,450×g離心10分鐘收集白細胞,小心并徹底吸去上清液。
6、重懸細胞,用于后續實驗。
注意:如提取RNA,zuì好從此步開始使用無RNase的溶液進行。
儲存條件:室溫(15~30℃)
名稱:稀釋液 B
貨號:SV0824
規格:5ml|5ml
概述:
如果在使用過程中需要稀釋內切酶,建議稀釋后濃度不要低于 1,000units/ml。詳細信息請參見 282 頁,根據內切酶產品貨號查閱限制性內切酶的稀釋兼容性表選擇稀釋液的種類,表中列出了所有內切酶所需稀釋液種類。
貯存條件:
-20℃。
稀釋液成分:
稀釋液A:
50mM KCl,10mM Tris-HCl,0.1mM EDTA,1mM dithiothreitol,200 μg/ml BSA,50% 甘油(pH 7.4 @
25℃)。
稀釋液B:
300mM NaCl,10mM Tris-HCl,0.1mM EDTA,1mM dithiothreitol,500 μg/ml BSA,50% 甘油(pH 7.4 @25℃)。
稀釋液C:
250mM NaCl,10mM Tris-HCl,0.1mM EDTA,1mM dithiothreitol,0.15% Triton X-100,200 μg/ml BSA,50% 甘油(pH 7.4 @ 25℃)。
注意:以上稀釋液不能用于稀釋嗜熱聚合酶。
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