BTN140390 釀酒酵母Y2HGold化學感受態
- 產品/服務：BTN140390 釀酒酵母Y2HGold化學感受態
- 型 號：BTN140390
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-04-21
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：956
產品簡介
釀酒酵母Y2HGold化學感受態由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于生化實驗研究等領域，釀酒酵母Y2HGold化學感受態是我司眾多優質克隆與表達之一，質量堪比同類進口產品，價格非常優惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括釀酒酵母Y2HGold化學感受態細胞在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：釀酒酵母Y2HGold化學感受態細胞
英文名稱：E.coli Y2HGold Chemical Competent Cell
產品貨號：BTN140390
產品規格：10×100μL
釀酒酵母Y2HGold是Clontech公司開發的GAL4系統酵母雙雜實驗用菌株，MATa型，可直接轉化質粒或與MATα型酵母菌株Y187 通過mating 操作進行蛋白互作驗證或篩庫試驗。Transformation marker 為：trp1，leu2，報告基因為：AbAr，HIS3，ADE2，MEL1。
Y2HGold-GAL4酵母雙雜系統需要兩種質粒配套使用：pGBKT7和pGADT7。質粒pGBKT7的篩選標志為TRP1，用于表達DNA-BD(來自酵母轉錄因子GAL4N 端1~174 位氨基酸)與目標蛋白(Bait)的融合蛋白；質粒pGADT7的篩選標志為LEU，用于表達AD(GAL4 C 端768 ~881 位氨基酸)與目標蛋白(Prey)的融合蛋白。
GAL4系統原理：一個完整的酵母轉錄因子GAL4可分為功能上相互的兩個結構域：位于N端1~174位氨基酸區段的DNA結合域(DNA-BD)和位于C端768~881 位氨基酸區段的轉錄激活域(AD)。DNA-BD能夠識別GAL4-respo
Y2HGold感受態細胞經特殊工藝制作，-80℃可保存三個月，pGADT7質粒檢測轉化效率>104cfu/μg DNA。
Y2Hgold的基因型是：MATa，trp1-901，leu2-3，112，ura3-52，his3-200，gal4Δ,gal80Δ，LYS2::GAL1UAS-Gal1TATA-His3，GAL2UAS-Gal2TATA-Ade2URA3::MEL1UAS-Mel1TATA AUR1-C MEL1
產品組成：
| 成分 | 規格 |
| Y2Hgold感受態細胞 | 0.1ml×10支 |
| PGADT7，10 ng/μL | 10μl |
| Carrier DNA，5μg/μL | 100μl |
| PEG/LiAc | 5ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：感受態細胞干冰運輸、-80℃保存，Carrier DNA -20℃保存；PEG/LiAc 4℃保存；有效期半年。
自備試劑：目的DNA、YPDA、 SD培養基等。
使用方法：
1. 取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μl，可以根據實際情況分裝使用。
以下實驗以100μL感受態細胞為例。
2. 待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中依次加入2-5μg預冷的目的質粒、10μLCarrier DNA(95-100℃ 5分鐘，快速冰浴，重復一次)、500μl PEG/LiAc，吹打混勻，30℃水浴30分鐘(15分鐘時翻轉6-8次混勻)。
3. 42℃水浴15分鐘(7.5分鐘時翻轉6-8次混勻)。
4. 5000rpm離心 40秒，棄上清。取400μl ddH2O 重懸沉淀，5000rpm離心 30秒，棄上清。
5. 取50μl ddH2O 重懸沉淀，涂板，29℃培養48-96小時。
注意事項：
1. 酵母菌株對高溫敏感，zuì適生長溫度為27-30℃；高于31℃，生長速度和轉化效率呈指數下降。
2.菌落變粉不是污染，是酵母細胞生長中一個常見現象。當細胞在平板培養幾天后，平板上的Adenine 被酵母消耗完畢，酵母試圖通過自身代謝途徑合成 Adenine以供利用，然而，有些菌株的ADE2基因被破壞，Adenine 合成途徑受阻；又由于其ADE4,5,6,7,8基因均正常，所以造成中間產物P - ribosylamino imidazole(AIR)在細胞中積累而使菌落變為粉紅色。
3. 酵母在缺陷培養基中生長速度比YPDA培養基慢，培養基中缺陷成分越多，生長越慢，以轉化涂板為例：涂YPDA 平板29℃，48h培養可見直徑1mm 克隆；涂SD 單缺平板29℃，48-60h培養可見直徑1mm 克隆，涂SD 雙缺平板29℃，60-80h培養可見直徑1mm 克隆，涂SD 三缺或四缺平板29℃，80-90h培養可見直徑1mm 克隆。
4.轉化高濃度的質粒可相應減少zuì終用于涂板的菌量。
5. 同時轉化2-3 種質粒時可增加質粒的用量。
根據您的關注的釀酒酵母Y2HGold化學感受態細胞，您可能還對以下產品有需求：
名稱：DNA粘轉平試劑盒
貨號：BTN60107
規格：20次
本產品利用Pfu DNA polymerase所具有3′到5′的聚合酶活性和5′到3′外切酶活性，將3′或5′突出的DNA片段轉化成平末端，用于克隆工作。
產品特點：
1. 簡單，精心優化過的2×Polishing Buffer中含有所需要的所有成分，不需要單獨準備。
2.適用于任何平末端的DNA載體。
產品組成：
| 成分 | 規格 |
| Pfu DNA Polymerase(3U/μL) | 20μl |
| 2×Polishing Buffer | 0.5ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。
使用方法：
1. DNA片段的準備：
無論是來源Taq，Tth,T7，Klenow和Vent等DNA聚合酶合成的DNA片段，還是用限制性內切酶制備的DNA片段，粘轉平之前均需要將DNA沉淀以便去除反應液中的無關成份。沉淀DNA的方法包括經典的鹽/純沉淀法，離心柱DNA 吸附法和百奧萊博的一管式非醇超快DNA沉淀法。
2. 設置粘轉平(Polishing)反應：
|
在一個干凈的離心管中，分別加入 | |
| 3′或5′突出的DNA片段 | 10-500ng |
| 2×Polishing Buffer | 25μL |
| Pfu DNA polymerase | 1μL |
| 補水到 | 50μL |
| 72℃保溫2小時。 | |
注意：如果不使用熱蓋式PCR 儀器加熱，則需要在反應管中再加入適量液體石蠟以防反應過程中水份蒸發。
3.反應后處理
粘轉平反應后，樣品可以放-20℃長期保存，也可以直接用于T4 DNA連接酶催化的連接反應。對10μL的連接反應體系，一般需要加入1-2μL粘轉平反應液。由于Pfu DNA polymerase在連接反應的溫度條件下幾乎沒有活性，所以不必去除。但文獻報道，去除后連接效率更高。
.jpg)
關注釀酒酵母Y2HGold化學感受態細胞，的同時，為您推薦更多您可能感興趣的產品：
| 貨號 | 名稱 | 規格 |
| BTN90407B | pression/BTN90407B.html" target="_blank">λDNA(不含N6-甲基腺嘌呤) | 5μg |
| BTN90208 | pression/BTN90208.html" target="_blank">大腸桿菌SURE化學感受態細胞 | 0.1mL*10 |
| BTN140386 | pression/BTN140386.html" target="_blank">釀酒酵母AH109化學感受態細胞 | 10×100μL |
| BTN140384 | pression/BTN140384.html" target="_blank">農桿菌GV3101化學感受態細胞 | 10×100μL |
| BTN131234 | pression/BTN131234.html" target="_blank">地塞米松 | 1mL |
| BTN120682 | pression/BTN120682.html" target="_blank">桿菌肽溶液 | 1mL |
| BTN120690 | pression/BTN120690.html" target="_blank">紅霉素溶液 | 10mL |
.jpg)
如果您覺得“BTN140390 釀酒酵母Y2HGold化學感受態”描述資料不夠齊全，請聯系我們獲取詳細資料。(聯系時請告訴我從給覽網看到的，我們將給您最大優惠！)
本頁鏈接：http://www.521uz.com/com_bjbiolab01/sell/itemid-8570761.html
已經有956位訪客查看了本頁.
