HR8207 外泌體提取試劑盒(體液)
- 產(chǎn)品/服務(wù)：HR8207 外泌體提取試劑盒(體液)
- 型 號：HR8207
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-04-07
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數(shù)：1040
產(chǎn)品簡介
北京百奧萊博供應(yīng)的外泌體提取試劑盒(體液)用于生化實驗研究等領(lǐng)域，我公司的外泌體提取試劑盒(體液)品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示：包括外泌體提取試劑盒(體液)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱：外泌體提取試劑盒(體液)
英文名稱：Exosomes Extraction Kit For body fluid
產(chǎn)品貨號：HR8207
產(chǎn)品規(guī)格：50T|100T
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名稱：Percoll
貨號：BTN131134
規(guī)格：250mL
Percoll是一種常用的低粘度的密度梯度介質(zhì)，由直徑在15-30nm的硅膠顆粒組成，顆粒外包被了聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，為化學(xué)惰性，不會影響細(xì)胞的活性。
產(chǎn)品特點：
1．Percoll滲透壓很低(<20mosm/kg H2O)，粘度也很小，可形成高達(dá)1.3g／ml 密度。
2．采用預(yù)先形成的密度梯度時可在低離心力(200～1000g)于數(shù)分至數(shù)十分鐘內(nèi)達(dá)到滿意的細(xì)胞分離結(jié)果。
3．離心后能形成1-1.3g/mL的密度梯度，可用于分離各種懸浮的細(xì)胞、線粒體、葉綠體和病毒(可小到70S)。
4．由于Percoll擴散常數(shù)低，所形成的梯度十分穩(wěn)定。此外，Percoll不穿透生物膜，對細(xì)胞害，因此廣泛用于分離細(xì)胞、亞細(xì)胞成分、細(xì)菌及病毒，還可將受損細(xì)胞及其碎片與完好的活細(xì)胞分離。
5．Percoll溶液高壓滅菌，必須進(jìn)行不添加鹽或蔗糖。鹽的存在會引起percoll糊化，蔗糖的存在會引起焦糖化。
儲存條件：常溫運輸和保存，有效期五年(未開封狀態(tài))。
使用方法：
1．不同濃度(密度)Percoll溶液的制備：先用9 份Percoll與1份 8.5％ NaCl或1.5MPBS混合達(dá)到生理性滲透壓，然后用生理溶液(0.85％ NaCl或0.15M PBS)稀釋到所需濃度。
| Percoll濃度(％) | 70 | 60 | 50 | 40 | 30 | 20 |
| 比重g/ml | 1.090 | 1.077 | 1.067 | 1.056 | 1.043 | 1.031 |
2．不連續(xù)密度梯度Percoll層的制備：先將試管壁用牛血清濕潤，除去多余血清，這種預(yù)處理可使逐層疊加的Percoll液平穩(wěn)沿管壁流下，使形成滿意的界面。在制備過程中一般用長針頭注射器從高密度向低密度逐層放置，有時相鄰兩層Percoll 比重相差不大時，可將Percoll液放入注射器中，小針頭斜面緊貼管壁，任其自然慢慢流下。
3．裝樣：樣品體積和細(xì)胞濃度根據(jù)不同細(xì)胞而異，一般加樣體積不宜過大，細(xì)胞濃度也不可過高，否則會影響細(xì)胞的分離和回收。
4．離心：一般采用離心力為400g，時間20～25min。由于多層Percoll 之間密度差別不大，因此離心機加速、降速時要慢，要平穩(wěn)。
5．取樣：當(dāng)所要分離的細(xì)胞大部分在兩層的界面時，可逐層去除Percoll液后收集界面部位的細(xì)胞;有時大部分細(xì)胞位于Percoll 層中,則需要逐層收集。收獲含有Percoll液的細(xì)胞經(jīng)2次洗滌后可供培養(yǎng)或檢測用。
分離純化細(xì)胞舉例
1．富含NK活性大顆粒淋巴細(xì)胞(LGL)的純化:按順序由下向上逐層加50％、47.5％、45％、42.5％和40％五種不同密度的Percoll,如用10ml 試管(或塑料管)分離,每層Percoll約1.2～1.5ml，初步從外周血中分離的PBMC細(xì)胞1×10８懸于１ml培基中，按要求裝樣、離心和取樣。一般富含NK 殺傷活性的LGL細(xì)胞位于42.5％與45％Percoll界面以及上下二層的Percoll液中。
2．純化淋巴母細(xì)胞和除去死細(xì)胞：分別疊加50％和30％Percoll液。收取經(jīng)PHA(或其它抗原、有絲分裂原)刺激PBMC,或含有較高比例異型的PBMC(如腎綜合征出血熱患者)，按要求裝樣、離心和取樣。位于管底的淋巴細(xì)胞為小淋巴細(xì)胞；兩層Percoll之間為淋巴母細(xì)胞，純度和回收率在80％以上，位于30％Percoll表面是死細(xì)胞。收獲淋巴母細(xì)胞可進(jìn)行表型、結(jié)構(gòu)以及功能的研究。
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