WH0042 少量瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒（
- 產(chǎn)品/服務(wù)：WH0042 少量瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒（
- 型 號：WH0042
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-04-03
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數(shù)：935
產(chǎn)品簡介
少量瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒（由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于科研試驗，我公司專注于核酸電泳和回收產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng)，為您提供的少量瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒（質(zhì)量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產(chǎn)品。...
產(chǎn)品詳細介紹
特別提示：包括少量瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒（5μg)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱：少量瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒（5μg)
英文名稱：Mini Agarose gel DNA Purification and Recovery Kit
產(chǎn)品貨號：WH0042
產(chǎn)品規(guī)格：50次
本試劑盒采用可以、專一結(jié)合DNA的硅基質(zhì)材料和獨特的緩沖液系統(tǒng)，從TAE或TBE瓊脂糖凝膠上回收DNA片段，同時除去蛋白質(zhì)、其它有機化合物、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)，回收100 bp-30 kb DNA片段，回收率高達80%，每個離心吸附柱每次可吸附的DNA量為5μg。本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實驗。
產(chǎn)品特點：
·快速：整個操作過程快速方便，十幾分鐘即可完成回收工作。
·多樣：可以回收單鏈、雙鏈DNA片段以及環(huán)狀質(zhì)粒DNA。
·：獨特的離心柱和精心配制的緩沖液，保證zuì大量回收到高純度的目的DNA。
試劑盒組成：
| 組分 | 50T |
| 平衡液BL | 30ml |
| 溶膠液PN | 25ml |
| 漂洗液PW | 15ml |
| 洗脫緩沖液EB | 15ml |
| 吸附柱CA1 | 50個 |
| 收集管（2ml) | 50個 |
保存條件：室溫（15-25℃）干燥條件下，可保存12個月，更長時間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下，若溶液產(chǎn)生沉淀，使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時間，必要時可在37℃水浴中預(yù)熱10min，以溶解沉淀。
注意事項：（請務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項)
1．平衡液BL的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩(wěn)定性，消除高溫/潮濕或其他不良環(huán)境因素對吸附柱造成的影響。使用前請先檢查平衡液BL是否出現(xiàn)渾濁，如有混濁現(xiàn)象，可在37℃水浴中加熱幾分鐘，即可恢復(fù)澄清。
2．電泳時zuì好使用新的電泳緩沖液，以免影響電泳和回收效果。
3．如下一步實驗要求較高，則應(yīng)盡量使用TAE電泳緩沖液。
4．切膠時，紫外照射時間應(yīng)盡量短，以免對DNA造成損傷。
5．如果回收率較低，可在膠充分溶解后檢測pH值，如pH值大于7.5，可向含有DNA的膠溶液中加10-30μl 3M醋酸鈉（pH5.2）將pH值調(diào)到5-7之間。
6．回收<100 bp及>10 kb的DNA片段時，應(yīng)加大溶膠液的體積，延長吸附和洗脫的時間。
7．回收率與初始DNA量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少、洗脫體積越少，回收率越低。
使用方法：
使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1．柱平衡步驟：向吸附柱CA1中（吸附柱放入收集管中）加入500 μl平衡液BL，12000rpm（~13400×g )離心1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
2．將單一的目的DNA條帶從瓊脂糖凝膠中切下（盡量切除多余部分）放入干凈的離心管中，稱取重量。
3．向膠塊中加入等倍體積溶膠液PN（如凝膠重為0.1g，其體積可視為100 μl，則加入100μl PN溶液）。50℃水浴放置10min，其間不斷溫和地上下翻轉(zhuǎn)離心管，以確保膠塊充分溶解。如果還有未溶的膠塊，可再補加一些溶膠液或繼續(xù)放置數(shù)分鐘，直至膠塊完全溶解（若膠塊的體積過大，可事先將膠塊切成碎塊）。
注意：對于回收<300 bp的小片段可在加入PN完全溶膠后再加入1/2膠塊體積的異丙醇以提高回收率；膠塊完全溶解后zuì好將膠溶液溫度降至室溫再上柱，因為吸附柱在較高溫度時結(jié)合DNA的能力較弱。
4．將上一步所得溶液加入一個吸附柱CA1中（吸附柱放入收集管中），室溫放置2 min，12000rpm（～13400×g）離心30-60 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放入收集管中。
注意：吸附柱容積為800 μl，若樣品體積大于800 μl可分批加入。
5．向吸附柱CA1中加入600 μl漂洗液PW（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12000rpm（～13400×g）離心30-60 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放入收集管中。
注意：如果回收的DNA是用于鹽敏感的實驗，例如平末端連接實驗或直接測序，建議PW加入后靜置2-5 min再離心。
6．重復(fù)操作步驟5。
7．將離心吸附柱CA1放回收集管中，12000rpm（～13400×g）離心2 min，盡量除去漂洗液。將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘，徹底地晾干，以防止殘留的漂洗液影響下一步的實驗。
注意：漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應(yīng)（酶切、PCR等）實驗。
8．將吸附柱CA1放到一個干凈離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加適量洗脫緩沖液EB，室溫放置2 min。12000rpm（～13400×g)離心2 min收集DNA溶液。
注意：洗脫體積不應(yīng)少于20 μl，體積過少會影響回收的效率。洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若后續(xù)做測序，需使用ddH2O做洗脫液，并保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)，pH值低于7.0會降低洗脫效率；且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。DNA也可以用緩沖液（10mM Tris-Cl,pH8.0)洗脫。為了提高DNA的回收量，可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中，再次離心。
DNA濃度及純度檢測：
1．回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。
2．DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當于大約50μg/ml雙鏈DNA、40μg/ml單鏈DNA。
3．OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用ddH2O，比值會偏低，因為pH值和離子存在會影響光吸收值，但并不表示純度低。
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| RFT008 | 500bp DNA ladder(500～5000bp) | 100T(2×250μl) |
| RFT021 | DNA Marker IV(500～7000bp) | 100T(2×250μl) |
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