WH0066 PCR增強劑
- 產品/服務：WH0066 PCR增強劑
- 型 號：WH0066
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-29
- 有效期至：長期有效
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產品簡介
PCR增強劑的品牌是百奧萊博，是優質的核酸擴增(PCR)產品，本制品僅用于生物化學研究方面，我公司專注于核酸擴增(PCR)產品的研發、生產和供應，為您提供的PCR增強劑質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示：包括PCR增強劑在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：PCR增強劑
英文名稱：PCR Enhancer
產品貨號：WH0066
產品規格：500μL
本制品能與所有的耐熱DNA聚合酶共同作用促進許多DNA模板的有效擴增，增加PCR反應的靈敏度和特異性。在PCR反應中，PCR增強劑主要通過提高DNA聚合酶的熱穩定性，降低DNA的二級結構起作用。因此在遇到一些復雜模板時（如GC含量高），可通過提高退火溫度，大地減少DNA二級結構對PCR的影響，同時對酶的活性沒有改變。需要注意的是，本制品不能對所有的PCR反應起增強作用，有時需要從其他方面來改進PCR體系。
本制品適合靈敏度要求較高的PCR、RT-PCR、Multiplex PCR、PCR條件的優化和GC含量很高的DNA擴增。本產品為5倍濃度。使用時直接加入到反應體系中即可，每20μl體系加入增強劑4 μl。
儲存條件：-20℃保存
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名稱：PCR級高GC的DNA清除劑
貨號：BTN61203
規格：1.5mL
本產品是我司開發的專門用于富含GC的DNA模板擴增的試劑。
產品特點：
1.，使用效果普遍好于常規的添加DMSO和甜菜堿的方法。
2.可以處理GC含量高達80%的DNA模板。
3. 操作簡單，將本產品用于溶解DNA沉淀即可使用。
儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。
使用方法：
將乙醇沉淀的高GC DNA直接溶解在適量的本產品中，充分吹打均勻，然后直接將DNA加入PCR反應體系中進行PCR反應。加入的DNA溶液zuì好不要超過PCR終體積的1/10。剩余的DNA可以長期保存。
名稱：即用型高保真PCR試劑盒
貨號：BTN90708
規格：1.5mL
本產品是即用型的2×高保真PCR預配反應液，含有除引物、模板以外的所有PCR試劑，包括Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等，特別適合于高保真PCR反應。
產品特點：
1. Pfu DNA聚合酶是使用zuì廣泛的高保真酶，其保真度為普通Taq酶的10倍。
2. 使用時只需在加入模板和引物并稀釋到1倍濃度即可進行PCR反應，非常方便，簡化了PCR的準備工作。
3. PCR反應所必需試劑全集于一管之中，數分鐘即可完成反應體系配置。由于加樣過程少，有利于減少污染，降低實驗誤差。
4. 本產品A型含電泳染料，PCR反應液可直接上樣電泳，進一步簡化了操作。
5. 由于各成分的濃度和比例都經過精心優化，反應的靈敏度高，特異性強。
6.適用于基因的高保真擴增和基因定點突變等實驗，得到的PCR產物可用于平末端克隆。
儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，保存期限為12個月。
使用方法：
將本產品與用戶自備的模板，引物混合液按下列推薦使用量(30μL反應體系)加入PCR 管中即可進行PCR，反應結束后直接取5-15μL電泳檢查擴增結果。如果反應體系不是30μL，各成分需要按比例增加或減少。
| 試劑 | 加入量 | |
| 2×高保真PCR MagicMix | 25μL | |
| DNA模板(自備) | 哺乳動物基因組DNA | 0.5-1μg |
| 酵母基因組DNA | 5-500ng | |
| 細菌基因組DNA | 0.5-50ng | |
| 質粒DNA | 5-500ng | |
| PCR回收片段 | 1-100pg | |
| PCR引物(自備) | 10-20pmol each | |
| 補水到 | 30μL | |
參考擴增條件：
| 預變性 | 94℃ | 4min |
| PCR(30個循環) | 94℃ | 30s |
| 50℃ | 30s | |
| 68℃ | 0.5kb/min | |
| 延伸 | 68℃ | 10min |
注意事項：
1. 本產品的Pfu DNA聚合酶比Taq DNA聚合酶的延伸反應速率低，因此我們推薦的擴增延伸反應時間為每kb 需2 分種。
2. Pfu酶3′-5′外切酶活性可降解引物，所以強烈建議在冰上配置完成PCR反應液后，立即放入PCR 儀中進行擴增，擴增完畢后立即進行電泳檢測。
3. 本產品擴增產物為平末端，不可以直接進行TA 克隆，可以使用ClionB載體(BTN51104)進行克隆。如需要進行TA克隆，建議對PCR產物純化后，用加A 試劑盒(BTN60105)加A后再進行TA克隆。
4. 由于Pfu 無 5′到 3′外切酶的活性，所以本試劑盒不能用于實時熒光PCR。
疑難解答：
Q：為何Pfu DNA Polymerase擴增效率不如Taq DNA Polymerase？
A：一是由于Pfu DNA Polymerase 具有3′-5′的外切活性，所以在合成過程中，該酶會隨時校對新添加的核苷酸是否配對，影響了合成效率；二是它能通過3′-5′的外切活性使引物部分降解，降低引物結合模板的能力，進而影響擴增效率。三是上面提到的尿嘧叮抑制作用。
Q：使用本產品時還有哪些注意事項？
A：1.引物長度和濃度一般應比常規的PCR 長和高(考慮到被Pfu DNA Polymerase的3′-5′的外切活性降解的因素)；
2.zuì好在反應前加Pfu DNA Polymerase。
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