MQ0060 AGL1農桿菌電轉感受態細胞

產品簡介
AGL1農桿菌電轉感受態細胞是高品質的克隆與表達產品,由北京百奧萊博供應,本產品用于科學研究,本品質量穩定,價位合理,需要AGL1農桿菌電轉感受態細胞等克隆與表達產品的客戶,請到我公司官網聯系我們。...
產品詳細介紹
特別提示:包括AGL1農桿菌電轉感受態細胞在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:AGL1農桿菌電轉感受態細胞
英文名稱:AGL1 Electroporation-Competent Cell
產品貨號:MQ0060
產品規格:10×50μl/50×50μl
AGL1菌株為C58,RecA型背景,核基因中含有篩選標簽——利福平抗性基因rif和羧芐青霉素抗性基因carb,為了便于轉化操作,此菌株攜帶一無自身轉運功能的琥珀堿型Ti質粒pTiBo542DT-DNA,此質粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件,pTiBo542DT-DNA質粒自身的T-DNA轉移功能被破壞,但可以幫助轉入的雙元載體T-DNA順利轉移)。
pTiBo542DT-DNA型Ti質粒含有篩選標簽:strep,賦予AGL1菌株鏈霉素抗性,適用于水稻、擬南芥、楊樹等植物的轉基因操作,開的AGL1電轉感受態特別適用于大質粒的轉化:經pCAMBIA2301質粒(size:11633bp)檢測轉化效率可達5×104cfu/μg;經pCAMBIA2301-ZH質粒size:40kd)檢測轉化效率可達5×103cfu/μg。
保存條件:-80℃
基因型:
C58 RecA(rif R/carbR)Ti pTiBo542DT-DNA(strepR)Succinamopine
操作說明:
1.0.2cm電擊杯和杯蓋從儲存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘,待其瀝干水分,正置5分鐘,使乙醇充分揮發,待乙醇揮發干凈立即插入冰中,壓實冰面,電杯頂離冰面0.5cm以方便蓋上杯蓋,冰中靜置5分鐘充分降溫。
2.取-80℃保存的農桿菌感受態插入冰中5分鐘,待其融化,加入1-5μg質粒DNA(質粒體積不大于6μl,zuì好用試劑盒抽提,雙蒸水溶解),用手撥打管底混勻,立即插入冰中,用200μl槍頭將感受態-質粒混合物快速移到電擊杯中,蓋上杯蓋,空管保留待用。
3.啟動電轉儀,設置參數:C=25uF,PC=200ohm,V=2400V(此參數為Biorad 推薦,使用者也可按所用電轉儀推薦的protocol操作),將電擊杯快速放入電轉槽中,電擊完成快速插入冰中,加入700μl無抗生素的LB并轉移到感受態空管中,28℃振蕩培養2~3小時。
4.6000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養箱培養2-3天(當平板只含有50μg/ml kan時,28℃培養48h即可;平板中同時加入50μg/ml kan,20μg/ml rif時,需28℃培養60h;如果使用的平板含有50μg/ml rif則需要28℃培養72-90h)。
注意事項:
1.感受態細胞zuì好在冰上融化。
2.混入質粒時應輕柔操作。
3.轉化高濃度的質粒可相應減少zuì終用于涂板的菌量。
注意事項:
1.加入質粒時體積不應大于感受態體積的1/10;質粒不純或存在鹽,乙醇等污染,轉化效率急劇下降;若轉化大質粒或想獲得較高轉化效率,推薦使用高純質粒提取試劑盒提取質粒。質粒增大一倍,轉化效率下降一個數量級。
2.混入質粒時應輕柔操作。
3.轉化高濃度的質粒可相應減少zuì終用于涂板的菌量。
4.利福平濃度不應高于25μg/μl,過高的利福平濃度不利于農桿菌生長,會降低其生長速度和轉化效率。本公司感受態計算轉化效率時所用平板只含有50μg/ml kan,若所用平板含有20μg/ml rif則轉化效率降低到1/2。
5.培養基中加入利福平的目的是防止雜菌生長、篩選農桿菌;根據所用菌株抗性加入鏈霉素或慶大霉素可防止Ti質粒丟失,但鏈霉素不利于農桿菌的轉基因操作,所以一般培養農桿菌時不考慮鏈霉素或慶大霉素,Ti質粒丟失的概率低(可以忽略)。
根據您的關注的AGL1農桿菌電轉感受態細胞,您可能還對以下產品有需求:
| 貨號 | 名稱 | 規格 |
| BTN60603 | pression/BTN60603.html" target="_blank">即用型藍白T載體A型(T7-SP6,有MCS) | 20次 |
| BTN120515 | pression/BTN120515.html" target="_blank">即用型藍白T載體E型(無RNA啟動子,無MCS) | 20次 |
| BTN60803 | pression/BTN60803.html" target="_blank">可保種型藍白T載體 | 50 ng |
| BTN140378 |
pression/BTN140378.html" target="_blank">大腸桿菌BL21-Co | 10*100μl |
| BTN140430 | pression/BTN140430.html" target="_blank">大腸桿菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化學感受態細胞 | 0.1mL*10 |
| BTN80701 | pression/BTN80701.html" target="_blank">大腸桿菌TG1化學感受態細胞 | 0.1mL*10 |
.jpg)
關注AGL1農桿菌電轉感受態細胞,的同時,為您推薦更多您可能感興趣的產品:
BTN130806 pression/BTN130806.html" target="_blank">胚胎裂解液 1mL
BTN121112 pression/BTN121112.html" target="_blank">大腸桿菌Stbl3化學感受態細胞 0.1mL*10
BTN90801A pression/BTN90801A.html" target="_blank">一站式TA克隆試劑盒 20次
BTN120692 pression/BTN120692.html" target="_blank">硫酸慶大霉素 2mL
YT007 pression/YT007.html" target="_blank">RNase A (10mg/ml) 1ml
YT458 pression/YT458.html" target="_blank">TNF-α啟動子熒光素酶報告基因質粒 1μg
YT466 pression/YT466.html" target="_blank">C端EGFP標簽融合蛋白質粒(綠色熒光蛋白) 1μg
SY0012 pression/SY0012.html" target="_blank">DH5α化學感受態細胞 100μl×10管
如果您覺得“MQ0060 AGL1農桿菌電轉感受態細胞”描述資料不夠齊全,請聯系我們獲取詳細資料。(聯系時請告訴我從給覽網看到的,我們將給您最大優惠!)
本頁鏈接:http://www.521uz.com/com_bjbiolab01/sell/itemid-8541727.html
已經有972位訪客查看了本頁.




